白腰文鸟古纹状体粗核神经纤维联系的研究

本实验采用辣根过氧化物酶(HRP)顺逆行追踪法,对白腰文鸟的古纹状体粗核(RA)的纤维联系进行了研究,实验表明:端脑内发声控制的主要运动神经核团——古纹状体粗核(RA)除了与发声控制神经核团有纤维联系之外,还与其他神经核团有纤维联系.     

白腰文鸟古纹状体粗核的纤维联系和机能研究

本实验对白腰文鸟的古纹状体粗核(RA)进行了电刺激和HRP法研究,结果发现:①电刺激RA核,出现呼吸频率的加快、竖羽、鸣叫、流涎、眨眼等动作。②HRP法研究表明,RA核与中脑丘间复合核背内侧亚核(DM)、上纹状体腹侧尾核(HVC)、新纹状体巨细胞核外侧部(LMAN)、古纹状体带核(TN)、蓝斑(Loc)等都有纤维联系,这就提示RA核除了与发声运动有关之外,还与植物性神经系统有关。     

鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学及神经联系

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟(Lonchura striata)间脑听觉中继核--卵圆核(n. Ovoidalis Ov)中心核及其壳区(shell)的形态学特征,再应用神经示踪剂BDA (biotionylated dextran amine)对壳区的神经投射进行了研究.结果发现: (1) 脑啡肽免疫组织化学方法较尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ov壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而中心核几乎不存在;(2) Ov 壳发出纤维投向端脑听区L2b, L1 ,L3,下丘脑腹内侧核(ventromedial nucleus VMN)和下丘脑前内侧核(n. anterior medialis hypothalami AM); (3) Ov壳接受端脑古纹状体粗核(robust archistriatum RA)壳区、中脑背内侧核(mesencephalicus lateralis pars dorsalis MLd)与丘间核(n. intercollicularis ICo)界面区的投射.首次发现鸣禽卵圆核壳区同非鸣禽相似,也与下丘脑有神经投射联系,它为听觉发声引起内分泌活动及有关行为的改变提供了神经结构基础.     

栗鹀前脑发声控制核团的季节性差异

本实验测量了雄性成年栗鹀(Emberiza rutila)前脑及延髓的三个发声控制核团HVc、RA及nXIIts的体积。结果发现,前脑HVc用RA体积具有明显的季节性差异:春季明显大于秋季(P<0.01),而直接支配鸣肌的延髓NXIIts无季节性差异(P>0.05)。这表明,栗鹀鸣啭能力的春秋季差异与其前脑发声控制核团的春秋季体积变化有关。     

鸣禽白腰文鸟高级发声中枢细胞 起源点及其性双态性增殖

为了更有针对性地研究鸣禽高级发声中枢（ＨＶＣ）性双态性的形成过程,本文以白腰文鸟（Ｌｏｎｃｈｕｒａｓｔｒｉａｔａ） 为实验对象,首先通过ｖｉｍｅｎｔｉｎ免疫组织化学分析端脑 ＨＶＣ 区域放射胶质细胞纤维的起源与走向,推断出幼鸟孵化后 的 ＨＶＣ 正背侧 ＶＺ区为 ＨＶＣ 细胞的主要发源位点;在此基础上,对１５ｄ幼鸟经由胸大肌注射３Ｈ－胸腺嘧啶以标记端脑 新生细胞,通过３Ｈ放射性自显影技术比较雌、雄 ＨＶＣ 干 细 胞 的 增 殖 能 力,充分证明了 ＨＶＣ 细 胞 发 源 点 的 神 经 干 细 胞 细胞增殖能力具有显著的性别差异．      

黄喉鹀延髓舌下神经核发声控制中枢的神经联系

用辣根过氧化物酶(HRP)顺、逆行追踪技术,研究鸣禽类黄喉(巫鸟)延髓舌下神经核气管鸣管部(nXIIts)的中枢联系。向该核内微电泳入HRP后,发现在中脑背内侧核(DM)及端脑古纹状体粗核(RA)等处有密布的逆行标记细胞;在舌下神经气管鸣管支有标记纤维。结果表明,延髓舌下神经核气管鸣管部接受中脑背内侧核和端脑古纹状体粗核的传入投射;由它发出的轴突组成舌下神经气管鸣管支。因此,黄喉(巫鸟)的舌下神经核气管鸣管部是延髓内发声控制的基本运动神经核团。     

新生小鼠神经干细胞的分离、培养和鉴定

目的：探讨新生小鼠神经干细胞(NSCs)分离、培养以及鉴定的方法。方法：分离新生昆明种小鼠(出生24h内)的大脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,利用无血清培养基悬浮培养细胞,获得具有自我增殖能力的细胞克隆,并将细胞克隆贴壁培养测其分化能力。应用抗Ncstin、Musashi、SSEA-1、NSE免疫细胞化学方法及BrdU标记方法鉴定细胞克隆。结果：从新生昆明种小鼠大脑组织分离的细胞悬液,经悬浮培养,生成大量具有增殖能力的细胞,可形成神经球(neurosphercs),抗Nestin、Musashi、SSEA-1阳性,BrdU标记也呈阳性。细胞克隆贴壁培养后神经球分化为神经细胞,抗NSE阳性。结论：上述方法分离的细胞具有自我更新、自我复制及分化为神经细胞的能力,属于中枢神经系统干细胞。     

成年小白鼠新生神经元的观察

将 3[H]标记的胸腺嘧啶核苷 (3[H]-thymidine)注入成年小白鼠腹腔 ,大脑中的神经细胞有丝分裂 ,可通过放射自显影在新生神经细胞中以银粒方式显现 3[H]标记 ,在光镜下观察脑切片中的银粒细胞即为新生神经元 .本实验利用放射自显影的方法 ,在成年小白鼠的海马和嗅球区域观察到新生神经元 .     

断鸣管神经支对白腰文鸟鸣声的影响

为探究鸣管神经支（NXⅡts）对发声控制的作用以及验证鸣禽发声的侧别优势和性别差异,以成年白腰文鸟为实验材料,记录其正常鸣声及切断鸣管神经支后的鸣声.用Cool Edit Pro和Wavesurfer 等声音处理和分析软件,比较和分析雄鸟和雌鸟、断单侧和双侧鸣管神经前后声学特征的差异.结果表明,成年白腰文鸟的NXⅡts可单侧支配鸣肌,切断左侧NXⅡts将导致声音严重受损,而断右侧则影响不大,表明具有左侧优势.两侧NXⅡts既相互协调又各有侧重,左侧产生较高频率的声音,而右侧则有较高的熵值,使得音节稳定性和调频一致性增强.雄鸟左侧NXⅡts控制较高的音量和较长的音节,而雌鸟的音量和音节时长两侧均可以独立调节.断双侧神经对音量、音调和音色都产生明显影响.     

栗鹀前脑发声控制核团体积的性别差异

栗鹀属于鸣禽类的一种,是东北常见的鸟类之一。本文对鸣禽栗鹀前脑发声核制核团HVc与RA进行了测量,并加以比较。结果表明,前脑HVc与RA核团体积存在着明显的性别差异。雄鸟的核团体积均大于雌鸟(P<0.05)。这表明造成栗鹀鸣啭能力的性别差异是由其神经结构的形态不同造成的。     

鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学？…

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟（Ｌｏｎｃｈｕｒａ ｓｔｒｉａｔａ）间脑听觉中－卵圆核（ｎ．Ｏｖｏｉｄａｌｉｓ Ｏｖ）中心核及其壳区（ｓｈｅｌｌ）的形态学特征,再应用神经示踪剂ＢＤＡ（ｂｉｏｔｉｏｎｙｌａｔｅｄ ｄｅｘｔｒａｎ ａｍｉｎｅ）对壳区的神经投射了研究,结果发现（１）脑啡肽免疫组织方法尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ｏｖ壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而忠订户站不存在;     

金丝雀发声和其它功能核团向原纹状体栎核的投射

用ＨＲＰ示踪方法研究金丝雀端脑原纹状体栎核的传入和传出投射，将ＨＲＰ微电泳入该核内，观察其顺、逆行记物的分布，结果表明，原纹状体栎核接受上纹状体腹侧尾核新纹状体前部巨细胞核外侧部、原纹状体带核及蓝斑核的优越性传入投射，由原纹状体栎核发出的纤维支配中脑丘间核背内侧部和大下神经气管鸣管部。     

Projection neurons within a vocal motor pathway are born during song learning in zebra finches

Many birds learn song during a restricted 'sensitive' period. Juveniles memorize a song model, and then learn the pattern of muscle contractions necessary to reproduce the song. Of the neural changes accompanying avian song learning, perhaps the most remarkable is the production of new neurons which are inserted into the hyperstriatum ventralis pars caudalis (HVc), a region critical for song production. We report here that in young male zebra finches many of the new neurons incorporated into the HVc innervate the robust nucleus of the archistriatum (RA) which projects to motor neurons controlling the vocal musculature. Furthermore, far fewer of these new neurons are incorporated into the HVc of either adult males that are beyond the sensitive learning period, or young females (who do not develop song). Thus, a major portion of the vocal motor pathway is actually created during song learning. This may enable early sensory experience and vocal practice to not only modify existing neuronal circuits, but also shape the insertion and initial synaptic contacts of neurons controlling adult song.     

两种鸣禽鸣啭控制核团体积的季节性变化

用Ｎｉｓｓｌ染色和ＨＥ染色,通过定量分析研究了鸣禽粟巫和燕雀鸣啭控制核团体积的季节性变化,同时对睾丸体积的季节性变化进行了观察,结果表明,鸣禽前脑三个主要鸣啭相关核团上纹状体腹侧尾核,古纹状体粗核,旁嗅叶的Ｘ区的体积存在显著的季节性差异。睾丸的体积和重量亦呈显著的季节性变化,这些结果揭示,鸣禽鸣啭能力的季节性变化是受鸣啭控制核团体积和睾酮水平季节性变化的影响。     

BrdU及其单克隆抗体的应用

5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入DNA后,可用荧光染料或被荧光染料标记的抗BrdU单克隆抗体进行定量和定性测定。抗BrdU单克隆抗体的应用为细胞动力学、肿瘤学和遗传学上区别DNA合成细胞,测定DNA合成速度、顺序和部位提供了一个快速、敏感和精确的方法。     

家兔派尹尔氏(Peyer's Patches)淋巴集结圆顶上皮内微褶细胞的来源与分化

对不同发育时期家兔Peyer's Patches圆顶的显微和亚显微结构系统观察表明,圆顶上皮内的微褶细胞来源于中胚层,而不是由未分化的肠上皮细胞分化而来,可能同巨噬细胞是同一组细胞系来源。     

鸣禽前脑上纹状体腹侧尾核超微结构的观察

实验用鸟经脑灌流后于HVc处取材,用Epon 812包埋剂浸润包埋,经铀－铅电子染色后,H－600投射电镜下观察,IBAS图像分析集资进行处理,结果发现,鸣禽HVc核 的神经细胞以圆形,卵圆形为主,胞体体积无明显的种间差别,但雄鸟细胞比雄鸟大,HVc的突触连接以轴－树突触和轴－棘突触为常见,经统计学t检验HVc单位面积突触总数,I型和II型突触所占比较,棘突触所占比较的种间差异不显著（P＞0．05）,而性别差异显著（P＜0．05）,结果表明,鸣禽唯唱控制核团体积的性别差异不仅反映在显微水平,而且在亚显微水平亦表现出明显的性别二态性。