丝瓜核糖体失活蛋白的研究进展综述

丝瓜核糖体失活蛋白是一类具多种生物学功能和活性的蛋白,本文在阐述了该类蛋白的理化性质的同时，综述了该类蛋白的酶学机制、活性位点和用做免疫毒素等方面的研究进展。     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究

采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- PAGE结果计算其 PI为 9.0 ,对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显 ,其 IC50 为 5.3× 10 -10 mol/ L左右 .体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞 ,Vero,SP2 / 0 ,3T3,Kb,Navana,S- 180等肿瘤细胞株和麻疹病毒均表现有不同程度的抑制作用 ,而对完整人胚肺二倍体细胞却毒性极小 .     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究

经硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析、Blue Sepharose CL-6B亲和层析和Superdex 75分子筛层析从苦瓜籽中纯化出苦瓜核糖体失活蛋白.纯化的蛋白经IEF、梯度PAGE、SDS-PAGE和Periodate-Schiff分析均为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带.根据SDS-PAGE计算其相对分子量为3.0×104 Da,IEF显示其pI为9.0.N端测序结果为Asp-Val-Ser-Phe-Arg.采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和圆二色谱(CD谱)对纯化RI     

植物核糖体失活蛋白的生物学活性研究进展

核糖体失活蛋白是一类广泛存在于高等植物细胞中,能专门作用于真核细胞损伤核糖体功能的毒蛋白．对植物来源的核糖体失活蛋白的抗病毒、抗肿瘤、诱导细胞凋亡等生物学活性研究进展做了概述,并就其今后的研究工作进行了展望．     

三角梅核糖体失活蛋白在转基因番茄中的功能

根据已报道的三角梅(Bougainvillea spectabilis Willd)的核糖体失活蛋白(RIP)基因序列,以厦门本地艳紫三角梅(B. glabra Choisy cv. Sanderiana)为材料,通过RT-PCR技术扩增到其RIP成熟蛋白的基因序列BouM并成功转化番茄.经检测,BouM转基因番茄对蚜虫、蚂蚁及番茄灰霉菌都有很好的抗性作用,显示了其在植物抗病抗虫中的应用前景.但是同时转基因番茄对小白鼠的生长有一定的抑制作用,因此将其作为植物抗病虫基因利用时,其生物安全性也是一个值得重视的问题.     

麻疯树核糖体失活蛋白curcin基因的原核表达及其抗真菌活性的研究

通过PCR方法,将麻疯树核糖体失活蛋白curcin的开放阅读框片段从麻疯树总DNA中扩增出来.并将该克隆基因片段连接到原核表达载体pQE-30中,成功构建了重组质粒pQE-C,转化大肠杆菌M15菌株.经IPTG诱导后,curcin重组蛋白在大肠杆菌中成功表达.然后通过纯化原核表达产物,得到纯化的curcin重组蛋白,并以纸片法进行体外抗菌活性检测,发现其具有较强抗真菌活性.     

川滇琼地区麻疯树种子核糖体失活蛋白资源调查

本研究对西昌、攀枝花、仁里、海口、三亚、东方六地的麻疯树种子进行资源调查研究,结果显示六个地区麻疯树种子胚乳核糖体失活蛋白含量均值为1.8770~2.5602mg/g,由高到低依次为西昌、三亚、海口、仁里、攀枝花、东方,且地区间差异较大.各地区内部种子胚乳核糖体失活蛋白含量数据分析显示,仁里地区种子胚乳核糖体失活蛋白含量变异系数最大,为14.6189;海口地区的变异系数最小,为7.1876.麻疯树种子性状相关性分析结果显示胚乳核糖体失活蛋白含量与百粒重、出仁率值在0.01水平上没有相关性,与含油率相关性不显著,与可溶性蛋白含量在0.01水平上低度负相关.综合各项指标认为西昌地区的麻疯树种子核糖体失活蛋白含量较高,可作为现阶段核糖体失活蛋白应用的材料来源之一.     

间接酶联免疫法检测麻疯树核糖体失活蛋白

建立了基于单克隆抗体的间接非竞争酶联免疫法用于检测麻疯树核糖体失活蛋白的含量.优化单克隆抗体最佳工作浓度为312.5ng/mL,辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG最佳工作浓度为200ng/mL.该方法的线性范围为25~300ng/mL,线性回归方程为y=0.0024x+0.0322,相关系数R2=0.9985,定量检测限25ng/mL,定性检出限3.0336ng/mL.试验证明该方法准确度较高,且具有较好的重复性和特异性,可以用于实际检测麻疯树种仁核糖体失活蛋白的含量.     

一种快速微量的非放射性核糖体失活蛋白活性检测方法

建立了一种非放射性的利用兔网织红细胞裂解液（Rabbit Reticulocyte Lysate）无细胞翻译系统和荧光素酶检测系统（Luciferase Assay System）的核糖体失活蛋白检测方法,快速检测了两种方法提取的麻疯树核糖体失活蛋白（RIPs）Curcin的无细胞蛋白质翻译抑制活性,测得离子交换层析法纯化Curcin的IC50＝0.045±0.009nmol/L,分子筛层析纯化Curcin的IC50＝0.217±0.026nmol/L;该方法避免了放射性同位素的使用,使检测过程简便、快速     

苦瓜的药理作用及其在心血管疾病中的应用

苦瓜是一种药食两用的植物,具有广泛的药理作用,如降血糖、调节血脂、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、免疫调节、抗菌、抗生育等,其中降血糖、调节血脂、抗炎、抗氧化的药理作用对心血管系统疾病具有潜在的临床用药价值。通过查阅分析苦瓜近年的国内外研究文献,综述了苦瓜的药理作用研究进展及其在心血管疾病中的应用,展望了苦瓜在药品、功能性食品及保健品中的应用前景。     

Establishment of in Vitro Regeneration System of Bitter Melon （Momordica Charantia L. ）

0　IntroductionBittermelon (MomordicaCharantiaL .)belongstoMomordicaofCucurbiteae .Itisnotonlyavegetablecropbutalsoanimportantmedicalherb (Hoetal.1991)inChinaandeastAsia .Inrecentyears ,phytochemistshaveisolatedanumberofpotentialmedicalcomponentsfrombittermelon ,suchastheα momorcharininactivatingribo some (Fengetal.1990 ;Leungetal.1997) ,MAP30(Momordicaanti Hivprotein) ,whichsuppressesHIV(humanimmunodeficiencyVirus)activity (Lee Huangetal.1990 ,1995 ) ,andmomordicosideAandB ,bothofwh…     

苦瓜提取物健美功效评价及其安全性研究

从健美功效性与安全性两方面对苦瓜提取物进行研究,通过透皮吸收实验、促进脂肪分解能力实验以及脂肪酸合酶抑制实验,对苦瓜提取物的健美功效进行了评价;通过红细胞溶血性实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验、人体斑贴实验,对其安全性进行了研究.实验结果表明:苦瓜提取物具有一定的健美功效,在较低质量浓度(10.0 mg/mL及以下)时安全无刺激,因此可以作为外用健美功效添加剂.     

土鸡蛋与蛋鸡蛋的蛋清中粗蛋白含量比较研究

利用国际上通用的蛋白质测定的标准方法——凯氏定氮法，对土鸡蛋与蛋鸡蛋蛋清中的粗蛋白含量进行测定，并经过t检验后，得到了两者无显著差异的结论。     

攀援植物苦瓜对遮阴和外界支持物的形态可塑性反应

通过人为蔗阴和人为提供外界支持物的方法,对草本攀援植物苦瓜的生长动态以及形态特征进行了研究,结果表明：（1）不同蔗阴处理下苦瓜植物的生长有较大的差异,弱光照下不利于苦瓜构件数量的增加和生物量的积累;（2）植株在弱光下形成较少的分枝、较薄的叶片,以及较细长的主茎和叶柄,表现比强光生长环境下更强的形态可塑性;（3）植株在生长早期较生长晚期有较大的形态可塑性,（4）在光资源充足的情况下,外界支持物的缺乏不会对苦瓜的生长造成太大的影响。     

田间增加UV-B辐射对丝瓜光合作用日变化及水分利用效率的影响

在自然条件下，增加不同强度的UV—B辐射，对攀援植物丝瓜叶片光合速率日变化和水分利用效率进行了研究，发现经增加R1强度UV—B辐射处理的丝瓜的净光合速率和蒸腾速率比对照上升了28％和33％，水分利用效率则下降了3．4％，而经增加R2强度UV—B辐射处理的丝瓜的净光合速率和蒸腾速率比对照上升了47％和13％，水分利用效率也上升了28％，且其光合作用不受午间强光的抑制，光合午休现象消失了．这表明，在该实验的UV—B强度下，丝瓜的光合作用不但未受抑制，反而还增强了，说明适当增加UV—B辐射对丝瓜的生长有利．