氨对重组中国仓鼠卵巢细胞生长及人红细胞生成素表达的影响

氨对重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞的生长具有明显的抑制作用，并遵循二级抑制模型，抑制常数Ka为41．5（mmol/L)^2，即当氨浓度为6．45mmol/L时，细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50％，在重组CHO细胞的批培养过程中，细胞密度和红细胞生成素浓度随着起始氨浓度的提高而下降，但存在一最适的氨浓度，在此浓度下，单位重组CHO细胞的EPO比生成速率最大。     

戊二醛改性胶原蛋白载体制备及在CHO细胞培养中的应用

天然胶原蛋白通过戊二醛改性试剂对其进行化学改性处理,继之以湿热灭菌处理以改善胶原蛋白理化性质,特别是胶原蛋白的收缩温度和膜通透性来制备动物细胞培养载体,综合改性胶原蛋白膜载体在CHO细胞生长及目的产物EPO表达方面的优势,确定新型胶原蛋白膜载体性价比优于C-DISK及进口A-DISK载体。     

柠檬酸对 CHO 细胞生长和代谢的影响

研究了重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO)批培养过程中柠檬酸对细胞生长和代谢的影响。结果表明:柠檬酸明显抑制了细胞的生长。与对照组相比,添加12 mm o l/L柠檬酸的处理组细胞的葡萄糖比消耗速率(QG lc)降低了37.5%,渗透压提高了10.0%,乳酸生成量与葡萄糖消耗量的比值增加了27.0%,氨生成量与谷氨酰胺消耗量的比值也增加了。在谷氨酰胺代谢过程中,更多的谷氨酰胺经谷草转氨酶途径生成α-酮戊二酸,参与能量代谢。柠檬酸促使细胞更多地被捕获在G 1期,阻碍细胞的DNA合成,抑制细胞增殖,并促进蛋白的表达。     

β-hCG重组基因在几种哺乳类细胞中的表达

为探讨用哺乳类细胞表达β-hCG基因。将重组β-hCG基因导入L－1和CNE－2细胞，在L－1细胞中得到10ng／mL的β-hCG，在CNE－2细胞中有7ng／mL的β-hCG，而且β-hCG还能在传代培养的L－1和CNE－2细胞中产生。再将重组β-hCG基因和dhfr基因其导入CHO细胞，在培养液中得到6．85mg／mL的表达量，说明β-hCG重组基因在哺乳类细胞中有表达功能，但尚未获得能稳定表达β-hCG的单克隆CHO细胞株。     

不同批次新生牛血清对CHO细胞培养效果的研究

为建立静置及微载体悬浮培养中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)的最适血清的快速筛选方法,在含10％不同批次国产新生牛血清的F12培养液中培养CHO细胞,分别用传代稳定性观察、克隆形成率、绘制微载体培养生长曲线及生长动力学分析的方法,评价不同批次国产新生牛血清对CHO细胞促生长...     

人神经营养因子-3在哺乳动物细胞中瞬时表达和稳定表达的初步研究

将人神经营养因子－3全长cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3,分别COS-7儿CHO细胞中获得了瞬时表达和稳定表达，经大乳鼠脊髓背根神经节测活，瞬时表达和稳定表达产物均能明显促进其神经突起的生长，瞬时表达量约为10^-7g/mL，稳定表达量可达10^-8g/mL。     

基于无外源激素下肉苁蓉细胞悬浮培养的研究

设计了不添加外源激素进行肉苁蓉细胞悬浮培养的方案,考察了细胞生长及其次生代谢产物苯乙醇苷、总黄酮和肉苁蓉多糖的变化情况.结果表明:在无外源激素悬浮培养下,肉苁蓉细胞的生长与次生代谢产物的合成与添加外源激素的相类似,细胞仍能快速生长及产生代谢产物,实现了不依赖外源激素的肉苁蓉细胞生长与次生代谢产物的积累,细胞培养成本降低,且安全、可食用.     

视网膜母细胞瘤基因产物磷酸化水平与细胞生长状态的关系

随着无血清培养细胞时间的延长，红胞合成Ｒｂ蛋白量和磷酸化水平逐渐降低，当细胞生长停止时，Ｒｂ蛋白处于低磷外化状态．正丁酸钠可诱导ＨＬ６０终端分化为单核－巨噬细胞；视黄酸、二甲基亚砜使ＨＬ６０分化为粒细胞．尽管分化途径不同．但是终端分化的细胞都只能合成低磷酸化的Ｒｂ蛋白．结果表明当细胞处于生长停滞状态，细胞都只能合成低磷酸化的Ｒｂ蛋白．     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究．经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０－３．建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数     

转瓶中不同供氧状况对昆虫细胞生长的代谢的影响

对传统转瓶进行了改进,使之成为一套既可有效控制供氧又可在线检测细胞摄氧率的小型多功能培养装置,并在此基础上,系统考察了不同供氧状况对ＩＰＬＢ－Ｓｆ２１－ＡＥ昆虫细胞生长和代谢的影响。结果表明：维持适宜的溶氧水平对优化昆虫细胞的生长和代谢至关重要,昆虫细胞的摄氧率与其生长代谢密切相关,并可作为在线监控细胞生态状态的重要依据。     

High expression of EPO gene using un-dhfr negative cell

Erythropoietin (EPO) genomic gene was cloned and its expression vector pOP13/EPO was constructed. CHO_K12 cell was transfected by this vector using lipofectin method. A stable expression cell strain C10 cell with the EPO production at 160IU/d in 10\+6 cells were obtained at 400 μg/mL G418. Based on the C10 cell, another vector pHY/dhfr (dihydrofolate reductase) that carries a dhfr gene and a selecting marker of hygromycin B resistant gene was transferred to this cell. Several cell clones were obtained at 200 μg/mL hygromycin B. These cell clones that can express both EPO gene and exogenous dhfr gene were selected under the progressively increased concentration to 1 μmol methotrexate(MTX). Some high EPO expression cell clones were obtained, the highest expression was 2 400 IU/d in 10\+6 cells, 15 times higher than that without MTX pressure. Then, a method of EPO high expression by using un_dhfr negative cell was primarily established. EPO bioactivity was found by using TF_1 cell.     

Protective effect of sodium butyrate on the cell culture model of Huntington disease

This study aimed to develop a cell culture model of Huntington disease and observe the effect of sodium butyrate on this cell culture model. Exon 1 of both a wild type and a mutant IT15 gene from the genomic DNA of a healthy adult and a patient with Huntington disease was amplified and cloned into the eukaryotic expression vector pEGFP-C1. Human neuroblastoma SH-SY5Y cells were transiently transfected with these recombinant plasmids in the absence and presence of sodium butyrate (0.1, 0.2, 0.5, 1.0 mmol/L). The MTT assay was used to measure cell viability. The results indicated that the N-terminal fragment of mutant huntingtin formed perinuclear and intranuclear aggregates and caused a decrease of SH-SY5Y cell viability. Sodium butyrate inhibited the decrease of SH-SY5Y cell viability caused by the N-terminal fragment of mutant huntingtin. This suggests that sodium butyrate has a protective effect on this cell culture model of Huntington disease.     

Protective effect of sodium butyrate on the cell culture model of Huntington disease

This study aimed to develop a cell culture model of Huntington disease and observe the effect of sodium butyrate on this cell culture model.Exon 1 of both a wild type and a mutant IT15 gene from the genomic DNA of a healthy adult and a patient with Hunt- ington disease was amplified and cloned into the eukaryotic expression vector pEGFP-C1.Human neuroblastoma SH-SY5Y cells were tran- siently transfected with these recombinant plasmids in the absence and presence of sodium butyrate(0.1,0.2,0.5,1.0 mmol/L).The MTT assay was used to measure cell viability.The results indicated that the N-terminal fragment of mutant huntingtin formed perinuclear and intranuclear aggregates and caused a decrease of SH-SY5Y cell viability.Sodium butyrate inhibited the decrease of SH-SY5Y cell via- bility caused by the N-terminal fragment of mutant huntingtin.This suggests that sodium butyrate has a protective effect on this cell cul- ture model of Huntington disease.     

草鱼对葡萄糖和淀粉作为能源的利用研究

通过10周生长实验和同位素示踪实验探讨草鱼对不同结构糖的利用。生长实验结果显示,草鱼摄食以葡萄糖作为糖源的饲料后其相对生长率、饲料效率、蛋白质效率均显著高于摄食以淀粉作为糖源的饲料组。同位素示踪实验结果显示,草鱼灌喂^14C－标记葡萄糖饲料后24h内每2小时间隔内呼出的^14CO2放射活度比均高于灌喂^14C－标记淀粉饲料组。说明草鱼对于葡萄糖作为能源的利用优于对淀粉作为能源的利用。     

豌豆顶芽衰老过程中的显微、超微结构和nDNA的变化

显微、超微结构研究表明 ,短日照条件下豌豆顶芽的衰老过程是从营养生长锥向花芽的转化 ,而用DNA原位末端标记 (TUNEL)、Caspase 8WesternBlot和 14 0bpDNA片断积累的试验结果证明 ,转化为花芽的整个生长锥细胞发生了编程性死亡 (PCD) ,而且其最顶端部分细胞首先发生PCD ,而顶端周围的分生组织细胞逐渐分化出花芽的各部分 ,但顶芽最后并没有发育成为完整的花 ,所有细胞就都发生PCD ,从而顶芽衰老     

Smad3基因剔除小鼠6月龄的生物学特性研究

选用 6月龄Smad3基因剔除小鼠 ,称重、采血、解剖 ,检测其生理生化、体重、脏器重量及剖检的特性 ,其结果 :纯合型的MCH、CK、Tibil、GOT和LDH L ,及其肾上腺脏器指数差异显著 ;+ -的肾脏重量差异显著。不同基因型之间比较 :WBC、HCT、MCHC、GLU、CHO、ALP、BUN、LDH L和CA ,及其体重、心脏、肝脏、肾脏、胸腺的脏器指数差异显著 ,并且纯合型的WBC、HCT、CK、CRE、GPT、GOT、ALP、BUN、LDH L较野生型和杂合型小鼠高 ,MCHC、GLU、CHO、MG、CA较野生型和杂合型小鼠低 ;杂合型的GOT、野生型的CK、ALP差异显著。 6月龄Smad3基因剔除小鼠的生理生化指标及脏器重量和指数具有一定的特性     

葡萄糖对莱茵衣藻生长和产氢的影响

通过在莱茵衣藻的培养基中添加葡萄糖,考察了葡萄糖对莱茵衣藻生长及产氢的影响。结果表明,在Tris Acetate Phosphate (TAP)培养基中添加葡萄糖对莱茵衣藻生长有利,最佳葡萄糖浓度为03g/L,藻细胞数和叶绿素浓度分别提高了12.8％和16.4％。在产氢培养基中,添加葡萄糖对莱茵衣藻产氢也有促进作用,氢气产量提高了27％。     

EGFP-IgG4融合基因真核表达载体的构建及其表达

构建增强型绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein, EGFP）和IgG4基因的融合蛋白真核表达载体pMM-EGFP-IgG4/WG,转染至中华仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)中成功表达,并发出绿色荧光,证明pMM-EGFP-IgG4/WG是一种良好的生产分泌型外源融合蛋白的阳性对照.