用高代数小鼠胚胎干细胞制作嵌合体小鼠

为了检验胚胎干的全能性,通过用1日龄卵巢移植后,经体外受精得到的囊胚的饲养建立了小鼠的ES系,并在较高的代数下(第41代)制出了5只毛色嵌合体小鼠,但是没有得到性腺嵌合的小鼠。研究结果证实,高代数的ES细胞仍然具有构建嵌合体的能力。     

小鼠孤雌生殖胚胎干细胞的分离及分化潜能研究

用免疫外科法从小鼠孤雌生殖胚胎分离胚胎干细胞,并研究了其在体内、体外的分化潜能．结果发现:从小鼠孤雌生殖的胚胎中可分离出胚胎干细胞(pES),可以传代培养25代,能表达很强的碱性磷酸酶,核型稳定呈40XX．培养至第18代的pES在体内可诱导肿瘤形成,并可分化为三个胚层的组织细胞．免疫组化结果显示:神经细胞特异性烯醇化酶（NSE）、肌肉特异性肌动蛋白?-actin均呈阳性,表明分离培养的pES在体内可至少分化为来自外胚层和中胚层的组织细胞．传至第20～24代的pES细胞,经体外定向诱导分化,可定向分化为节律性收缩的心肌细胞及神经细胞．免疫组化检测显示节律性收缩的心肌细胞表达?-actin,而神经细胞表达NSE．结果表明:利用免疫外科法可从孤雌生殖的小鼠胚胎建立pES,这些pES在体内、体外都具有分化为多种类型细胞的潜能．     

中药诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的研究进展

指出了胚胎干细胞(ES细胞)是一类可进行自我复制和更新并向骨骼、软骨、脂肪、神经、肌肉等多个胚层的组织分化的细胞.研究表明:ES细胞移植入缺血心脏后可以分化形成新生心肌细胞,血管内皮细胞等,还可以通过分泌多种生长因子,促进微循环的建立,提高梗死后心脏功能.综述了中药如黄芩苷、葛根素、淫羊藿苷、黄芪、丹参、皂苷、双龙方等诱导小鼠干细胞分化为心肌细胞的研究进展.     

胚胎干细胞的体外扩增

探讨了胚胎干细胞在体外大量扩增的方法。将胚胎干细胞复苏后，选择合适的培养基(含高糖和谷氨酰胺的DMEM，加入ψ=20％胎牛血清，10^5U/L青链霉素双抗，0．1mmol／L L—谷氨酰胺，10^3IU／L白血病抑制因子，0．1mmol／L β-巯基乙醇)进行培养。此外，使用早代胚胎于细胞；培养时使用不涂明胶的一次性培养瓶；掌握好消化、复苏和冻存时机并及时换液；按照严格步骤进行培养、传代、冻仔。对扩增后的ES细胞进行染色体和全能性检测。结果表明，在较短时问内(5d)可将胚胎干细胞扩增16倍以上。扩增后的ES细胞较好地保持了胚胎干细胞的全能性和核型。可见使用合适的培养基，按照严格步骤操作，短期内完全可以大量扩增胚胎干细胞。     

哺乳动物胚胎干细胞的特性及利用

哺乳动物胚胎干细胞（ES细胞）是由动物早期胚胎发育的内细胞团（ICM）或原始生殖细胞（PGC）分离得到的。人们利用ES细胞所具有的全能性、体外分化以及稳定的遗传性能等特点，展示了ES细胞在建立哺乳动物的早期胚胎体外分化模型、转基因动物模型、器官和组织的修复和移植治疗、克隆动物的生产、发育生物学的研究等方面广阔的应用前景。但是，由于哺乳动物错综复杂的基因调控和环境因素的影响，对于胚胎干细胞的研究还存在诸多问题，还需作更深入细致的研究。     

应当重视人胚胎干细胞的研究

生物体个体发生的调控 ,也即单个受精卵细胞如何可以如此精确地分化为各种完全不同的细胞、组织和器官 ,并最终发育成为一个完整的生物体 ,一直是生命科学中的难解之谜 ,它被认为是与生命起源、意识产生（即中枢神经系统的信息加工）并列的生命科学的３大难题之一。很显然 ,这３大问题是生物学中“上帝”存在论的最后防线 ,因而对它们的研究 ,在自然科学中具有特殊的重要意义。发育生物学的研究表明 ,受精卵在分裂期的早期 ,尚未植入子宫之前形成一个称为囊胚（ｂｌａｓｔｏｃｙｔｅ）的结构 ,它由大约１４０个左右的细胞组成。囊胚的“外壳…     

人胚胎干细胞的研究进展及临床应用

目的探讨人类胚胎干细胞的研究进展和应用前景.方法对人类胚胎干细胞的来源、建系、生物学特性及应用前景作一综述.结果人类胚胎干细胞在临床上有广泛的应用前景.结论人类胚胎干细胞的研究是人类发育生物学的重大突破,揭示了人体发生发展奥秘的进程,可能为现代临床医疗模式带来革命性的变化.     

人胚胎干细胞的研究进展及临床应用

目的探讨人类胚胎干细胞的研究进展和应用前景.方法对人类胚胎干细胞的来源、建系、生物学特性及应用前景作一综述.结果人类胚胎干细胞在临床上有广泛的应用前景.结论人类胚胎干细胞的研究是人类发育生物学的重大突破,揭示了人体发生发展奥秘的进程,可能为现代临床医疗模式带来革命性的变化.     

人胚胎干细胞的研究进展及临床应用

目的探讨人类胚胎干细胞的研究进展和应用前景。方法对人类胚胎干细胞的来源、建系、生物学特性及应用前景作一综述。结果人类胚胎干细胞在临床上有广泛的应用前景。结论人类胚胎干细胞的研究是人类发育生物学的重大突破,揭示了人体发生发展奥秘的进程,可能为现代临床医疗模式带来革命性的变化。     

用小鼠胚胎干细胞高效培育小脑神经细胞

<正>日本理化研究所13日发布新闻公报称,该所研究人员成功诱导小鼠胚胎干细胞,有选择性地分化成小脑神经细胞,且实现了较高的分化效率。公报说,小脑皮质中层内的浦肯雅细胞是掌管精确运动和学习的主要神经细胞,在医学方面具有相当重要的作用,以往诱导胚胎干细胞有选择性地分化成浦肯雅细胞的方法效率低下,只有约0.5%的胚胎干细胞最终能分化成浦肯雅细胞。     

草鱼生长激素基因在COS7细胞中转染表达的研究

应用RT-PCR技术克隆草鱼生长激素(gcGH)的cDNA,将此cDNA定向插入真核表达载体VR1020中,构建成重组真核表达质粒VgcGH.利用脂质体法使质粒VgcGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实gcGH基因在COS7细胞中得到了持续和正确的转染表达.     

稳定转染Oct-4基因后人脂肪来源干细胞性状分析

观察了转染Oct-4基因对人脂肪来源干细胞性状的影响.首先将Oct-4基因全序列亚克隆至逆转录病毒载体pMSCVneo中,构建逆转录病毒重组质粒,然后以脂质体介导转染包装细胞PT67,成功建立PT67-Oct4细胞系,随后转染人脂肪来源干细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)中,最后对高表达Oct-4基因的ADSCs性状进行观察.实验结果表明,对高表达Oct-4蛋白的ADSCs-Oct4同未转染Oct-4的ADSCs相比,ADSCs-Oct4在形态学、表面标志、核型等方面无明显差别,接种ADSCs-Oct4细胞8周后裸鼠体内未形成肿瘤.以上结果说明ADSCs-Oct4细胞遗传性状稳定,无致瘤性,为深入开展ADSCs研究提供了实验依据.     

大鼠胚胎神经干细胞体外培养及诱导分化

神经干细胞在理论研究和临床应用上有着广泛的前景.本文主要在体外分离培养SD大鼠胚胎前脑的神经干细胞,并分别用去除生长因子或添加全反式维甲酸(ATRA)两种方法诱导分化.免疫荧光染色技术分别检测细胞巢蛋白(Nestin)的表达及分化后β微管蛋白Ⅲ(β-Ⅲtubulin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,计算分化率.结果显示:细胞生长状态良好,呈Nestin表达阳性.分化后可获得β-Ⅲtubulin及GFAP表达阳性的细胞,其中ATRA诱导方法获得β-Ⅲtubulin阳性细胞较多.     

反义人端粒酶催化亚单位基因转染对人结肠癌细胞恶性表型的逆转作用

利用基因重组技术,人端粒酶催化亚单位基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞.该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G2M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落.说明反义hTRT基因体外导入结肠癌细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的增殖且能使其恶性表型发生逆转.     

胚胎干细胞的培养体系综述

综述胚胎干细胞培养基，有饲养层培养体系和无饲养层培养体系的主要成分，以及无血清胚胎干细胞培养基。     

小鼠ES细胞可在体外诱导分化为神经元样细胞

通过悬浮培养和0.5 μmol/L RA诱导,建立了定向诱导ES细胞向神经元样细胞分化的体系 .在该体系中,神经元样细胞于类胚贴壁后48 h之内出现,4～6 d时达到最多,8～10 d 后减少.由ES细胞分化而来的神经元样细胞具有典型的形态特征,并且可以与NF抗体发生特异反应.     

牛生长激素释放激素基因研究进展

利用26篇文献,从GHRH基因的结构、生物学功能、多态性与生产性状的关系等方面就牛GHRH基因研究进展进行了论述.     

微囊化转CEA基因细胞诱导小鼠抗肿瘤免疫的研究

为发展癌胚抗原(CEA)阳性肿瘤的治疗性疫苗,应用基因工程和静电液滴技术制备出微囊化转CEA基因细胞,经腹腔免疫实验小鼠,再分别应用CEA基因转染的H 2 2 细胞小鼠皮下及腹腔接种,观察微囊化转CEA基因细胞对小鼠肿瘤的抑制作用及其诱导小鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤CEA 阳性肿瘤细胞的能力,并用流式细胞术检测了小鼠肿瘤细胞的生长周期和各实验组脾脏T淋巴细胞亚群的分布情况. 结果显示,微囊化转CEA 基因细胞可以有效抑制CEA阳性肿瘤的生长,诱导小鼠CTL对CEA阳性肿瘤细胞的特异性杀伤 ,并能改善荷瘤小鼠的免疫功能,延长腹水瘤小鼠的生存期.