蓖麻蚕蛹mtDNA的限制性内切酶图谱

采用碱变性法制备蓖麻蚕蛹ｍｔＤＮＡ，经九种限制性内切酶单酶和双酶酶解后，琼脂糖凝胶电泳检测酶切位点数和酶切片段长度。根据片段的大小确定消失片段与新生片段关系，通过对片段重叠、拼接、判断各片段邻近位置，从而构建了９种限制性内切酶、共２４个酶切位点蓖麻蚕蛹ｍｔＤＮＡ酶切图谱。     

丝羽乌骨鸡mtDNA限制酶酶切研究

应用碱变性法制备丝羽乌骨鸡（简称丝羽鸡）肝细胞ｍｔＤＮＡ，测其分子量为１８．５ｋｂ．用限制性内切酶进行酶切分析，结果表明，ＢａｍＨⅠ、ＰｓｔⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＳａｃⅠ在丝羽鸡ｍｔＤＮＡ分子上分别有１、１、１、２个酶切位点．根据单酶和双酶完全酶切片段的分子量，建立了丝羽鸡ｍｔＤＮＡ的限制酶图谱．与由来亨鸡肝细胞ｍｔＤＮＡ为材料所得的研究结果比较，发现丝羽鸡与来亨鸡在ｍｔＤＮＡ种质方面存在着较大差异．     

福建两个蛋鸭品种和常见野鸭线粒体DNA(mtDNA)限制性酶切图谱的比较

用７种限制性内切酶（ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅡ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｏｃＲⅤ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＸｂａⅠ）分析了蛋鸭（金定鸭、莆田黑鸭）、野鸭（斑嘴鸭、绿头鸭）的ｍｔＤＮＡ限制性类型,并用双酶法构建了以上鸭类的ｍｔＤＮＡ限制性酶切图谱．结果表明,蛋鸭与野鸭在ｍｔＤＮＡ结构上发生了明显分岐．比较两种野鸭和金定鸭的图谱,发现金定鸭与绿头鸭的亲缘关系较近．     

牛蛙mtDNA的一种提取方法及初步酶切分析

本文中使用牛蛙作为材料提取mtDNA进行RFLP分析.探讨提取牛蛙mtDNA的方法及酶切图谱.结果表明,按本实验操作方法能够提取足量牛蛙的mtDNA,用以酶切分析.采取KpnI.Xho.SacI.PstI.HindⅢ等五种限制性内切酶酶切牛蛙mtDNA,能够粗略求出它的分子量大约在20kb左右.     

限制性内切酶介导的整合技术

限制性内切酶介导的整合技术是近年发展起来的一种研究基因的新方法,与质粒拯救相结合,可快速分离质粒两侧的DNA序列,进而对该序列做进一步分析和研究．该技术已应用于基因突变、基因标记、寻找新基因等研究领域．本文重点介绍了限制性内切酶介导的整合技术的原理、影响因素及应用现状．     

重组质粒pPAHD1的限制性内切酶图谱分析

本文对我们构建的含有青霉素酰化酶(Acylace)基因的重组质粒pPAHD1进行了限制性内切酶图谱的测绘。使用了限制酶14种,证明BglⅡ,SalⅠ,SmaⅠ和BamHⅠ在重组质粒上各有切点一个;EcoRⅠ有切点两个:HindlⅡ,AvaⅠ各有切点三个;PvuⅠ有切点四个;EcoRⅤ和XmnⅠ各有切点五个。     

珠鸡mtDNA的限制性图谱

应用AvaⅠ，BamHⅠ,BglⅠ,DraⅠ,EcoRⅠ,HpaⅠ,PvuⅡ,SacⅠ,SalⅠ,ScaⅠ和StuⅠ共11种限制酶对珠鸡（Acryllium vulturinum)mtDNA进行单酶切分析，结果表明，珠鸡mtDNA的分子量为16.7kb，另以其中除AvaⅠ和StuⅠ外的9种限制酶进行双酶切分析，构建了珠鸡mtDNA的限制性图谱，并与家鸡（Gallus gallus domesticus)比较，二者mtDNA序列歧异值为0.073。     

鳙鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱

用１１种限制性内切酶分析鳙鱼的线粒体ＤＮＡ，构建了全部１１种酶２２个切点的物理图谱，鳙鱼线粒体ＤＮＡ的分子大小约为１６．４４ｋｂ。酶切位点的分布是非随机的。     

两步亲和层析纯化限制性核酸内切酶Bsp 63Ⅰ

以Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ６３为材料,采用ＤＮＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅＦ３ＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ两步亲和层析,分离纯化得到电泳均一纯限制性核酸内切酶Ｂｓｐ６３Ⅰ。酶的得率约为１３０单位／ｇ湿菌,比活力高达６１４００单位／ｍｇ蛋白。还报道了ＤＮＡ－Ｓｐｅｈａｒｏｓｅ４Ｂ两种亲和吸附剂制作方法的改进。     

正常和细胞质雄性不育水稻线粒体DNA限制性内切酶的酶切图谱分析

从N,cms-WA,cms-BT和cms-RL四种不同细胞质源的水稻中制备线粒体DNA。用限制性内切酶Pst Ⅰ,Hind Ⅲ和Xho Ⅰ等酶切线粒体DNA经琼脂糖凝胶电泳,发现水稻N,cms-WA,cms-BT和cms-RL细胞质确有不同的线粒体DNA,不同的保持系之间也存着一定的差异。水稻线粒体DNA最小分子的大小在195～245kb之间。     

青鱼线粒体DNA限制性酶切图谱的研究

用10种限制性内切酶对青鱼(Mylopharyngodonpiceus)的肝脏mtDNA进行了分析,其分子质量为9 949×106u,分子大小约为16 60kb.PstⅠ、EcoRⅠ、XhoⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、PvuⅡ、SalⅠ、XbaⅠ、BglⅡ、BglⅠ在青鱼的mtDNA分子上分别具有0、3、1、4、4、3、2、2、2、3个切点.根据单酶解及双酶解结果建立了青鱼mtDNA的限制性酶切图谱.     

上海四膜虫(Tetrahymena shanghaiensis)线粒体DNA的酶切分析

该文以六种限制性内切酶对上海四膜虫ｍｔＤＮＡ进行单酶完全酶切,ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｈａⅠ酶切均产生４个片段,ＰｓｔⅠ、ＨｐａⅡ、ＨａｅⅢ酶切分别产生５、６、７个片段。不同的酶切征段大小及总和有一定的差异,酶切结果比较,有较大的差异。同其它方法如四膜虫大核ｒＤＮＡ限制性内切酶分析、同工酶分析及皮层细胞骨架组分分析结果一致,进上步证明上海四膜虫是梨形四膜虫复合种的一种。     

绿头鸭基因组微卫星分布规律研究

[目的]研究绿头鸭(Anas platyrhynchos)的全基因组微卫星分布特征及规律.[方法]利用生物信息学方法对已报道的绿头鸭全基因组查询搜索并进行特征分析.[结果]在绿头鸭1 070 Mbp的基因组中,1～6个碱基重复的微卫星数量有476 957个,总长度为9 101 935 bp,相对丰度为445.77个·Mb-1,占全基因长度的0.83％.不同重复类型的微卫星中单碱基的数量最多,有326 468个,长度为5 444 144 bp,占基因组微卫星总数的68.45％;然后依次是四碱基、二碱基、三碱基、五碱基和六碱基,数量分别为66 753,30 262,29 712,20 248和3 514个,长度分别为1 504 868,501 244,527 310,920 915和203 454 bp,分别占基因组微卫星总数的14％,6.34％,6.22％,4.25％和0.74％.绿头鸭基因组中,分布数量最多的14种拷贝类型按数量由多到少排列依次是A,A A AC,A A AT,AT,A AT,AC,A AC,A A A AC,C,AG,AAAAT,AAAG,AAGG和AGG,这些拷贝类型的数量均超过2 500个,合计占基因组微卫星总数的95.1％,有明显的A偏倚.[结论]研究结果为绿头鸭微卫星的筛选和开展进一步的分子生物学研究奠定了基础.     

线粒体D-Loop区全序列分析A2a基因敲除小鼠生产扩大群的遗传稳定性

目的采用线粒体D-Loop全序列测定法对A2a基因敲除小鼠近交系生产扩大群中的小鼠进行了遗传稳定性分析。方法对5个子代A2a杂合子50只小鼠的线粒体DNA D-Loop区进行了PCR扩增,产物纯化后测序,其结果与小鼠线粒体标准序列比对,分析50只小鼠之间的序列差异。结果发现检测的50只小鼠的D-Loop基因序列完全一致,且与小鼠线粒体标准序列完全一致。结论 A2a基因敲除小鼠扩大繁殖群具有较好的遗传稳定性,同时为进一步研究A2a小鼠提供遗传学资料。     

动物线粒体DNA

线粒全DNA作为分子标记已被广泛应用于家畜育种、生物进化、发病机理、临床诊断等方面的研究，并取得了许多有价值的结果．综述了动物线粒体DNA的结构特征、遗传特征，并阐明了线粒体DNA多态性研究方法、研究进展以及线粒体DNA多态性在动物遗传育种中的应用．     

中国猛禽类线粒体DNA遗传多态性研究进展

鸟类线粒体ＤＮＡ的研究在种群生物学和进化生物学研究方面越来越显示出重要的作用,特别是在遗传多态性和基因流研究方面更具特殊意义。简要回顾了鸟类线粒体ＤＮＡ的研究历史,并分析了中国猛离线粒体ＤＮＡ遗传多态性的研究现状及进展,要点：１．猛禽类线粒体基因组大小存在遗传多态性,２：猛禽类线粒体ＤＮＡ的进化速率与哺乳类相同,３;种间或种内存在丰富的遗传变异;４．不同地理种群存在ｍｔＤＮＡ克隆群的连续性。     

中国白兔线粒体DNA限制性图谱

用 ６ 种限制性内切酶分析了中国白兔的线粒体 Ｄ Ｎ Ａ（ｍ ｔ Ｄ Ｎ Ａ）。测得其相对分子质量约为１６．８, Ｅｃｏ ＲⅤ, Ｂａｍ ＨⅠ, ＰｓｔⅠ, Ｅｃｏ ＲⅠ, ＨｉｎｄⅢ在中国白兔 ｍ ｔ Ｄ Ｎ Ａ 上分别有 １,２,２,２,６ 个切点, ＳａｌⅠ 在其上没有切点。根据单酶降解和双酶降解片段的相对分子质量,构建了中国白兔ｍ ｔ Ｄ Ｎ Ａ的限制性内切酶图谱。     

恩施悬棺人骨mtDNA初步分析

本文以恩施宋代悬棺的骨骼或牙齿样品为对象,经过一系列的处理,获得并扩增了mtDNA的HVSI区的部分序列,通过几个实验初步认定是古DNA.同时通过与部分现代人mtDNA数据的比较参照,对所研究样品单倍群归属进行了初步确定,发现他们主要属于南方类型,但也可能有北方成分.