蛋白激酶Ca亚类真核表达质粒的构建和过表达细胞模型的建立及初步分析

蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)是依赖于Ca~(2+)和磷脂的多功能蛋白激酶,它在细胞信号传导、生长调节、肿瘤发生中发挥重要作用.分子克隆技术表明PKC是由多基因家族编码,迄今已发现至少12种亚类,各亚类在细胞中的生理功能各有差异.为了进一步探讨特异PKC亚类在细胞生长调控中的作用,我们构建了PKCα亚类的真核表达质粒,并通过基因转染的方法导入正常人胚肺细胞(2BS),首次建立了过表达PKCα的2BS细胞模型,并对此模型进行了初步分析.     

可调控高表达钙调素细胞模型的建立与初步分析

钙调素(Calmodulin简称CaM)是广泛存在于各类真核细胞中、具有调节细胞生长、分化和癌变作用的蛋白。Means等发现钙调素含量的增高是细胞进入s期的限速因子。肿瘤细胞中钙调素含量高于相应的正常细胞已被多次证实。但因研究方法的局限,缺少有效     

人蛋白激酶Bγ基因的cDNA克隆、组织表达谱分析及染色体定位

蛋白激酶Ｂ（ＰＫＢ）是受第二信使调控的一类蛋白激酶,在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具重要作用。由于其活笥在某些人类肿瘤组织中有明显提高,且参与了Ｒａｓ信号传导通路,提示其在某些肿瘤的形成过程中起介导作用,以小鼠Ｐｋｂγ的核苷酸序无为探针,用同源筛选方法,从人肝cＤＮＡ文库中步移获得一个长１９９８ｂ ｐ的ｃＤＮＡ片段,包含一段长１４４０ｂｐ的ＯＲＦ,它编码了４７９个氨基酸残基。而     

表达人类Bcl-2蛋白的L929细胞模型的建立与应用

将人类ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ以正向克隆于真核表达载体ｐＬＸＳＮ并转染于Ｌ９２９细胞,建立了稳定表达人类Ｂｃｌ－２蛋白的哺乳类细胞模型,利用模型细胞进行研究表明,Ｂｃｌ－２的表达对细胞的正常增殖与存活表型无明显影响,但能增加细胞对肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）和ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＳ）两种致凋亡因素的抵抗能力。此研究丰富了ｂｃｌ－２基因调控细胞凋亡的资料,为深入探讨ｂｃｌ－２的作用机制及其与其     

表达钙调素反义RNA人肝癌细胞模型的建立及其对细胞增殖和转化的作用

作为Ca~(2+)在细胞内的主要受体,钙调素(Calmodulin,CaM)广泛存在于各种真核细胞中,是一种能调节细胞生长、分化和转化的多功能蛋白。 由于CaM的反义RNA相对于它的多种拮抗剂来说具有更强的特异性并且没有药理毒性作用,因此我们构建了表达钙调素反义RNA的人肝癌细胞模型,并对此模型在钙调素低表达状态下的生长特性、周期分布、基因表达及其与转化的关系进行了分析,以探讨钙调素对细胞增殖与转化的影响。     

含两类耐药基因逆转录病毒载体的构建及在人脐血CD34+细胞中的表达

将耐药谱截然不同的３种耐药基因（ｍｄｒｌ, ｍｇｍｔ, ｄｈｆｒ）两两组合,以逆转录病毒介导在人脐血ＣＤ３４＋细胞中表达,增强了细胞对相应两种不同类型化疗药物的抗性,使造血细胞受到多重保护,为研究肿瘤化疗中如何更大程度地保护正常组织,降低药物毒副作用,提高治疗效果提供实验基础．     

含两类耐药基因逆转录病毒载体的构建及在人脐血CD34+细胞中的表达

将耐药谱截然不同的３种耐药基因（ｍｄｒｌ,ｍｇｍｔ,ｄｈｆｒ）两两组合,以逆转录病毒介导在人脐血ＣＤ３４＾＋细胞中表达,增强了细菌对相应两种不同类型化疗药物的抗性,使造血细胞受到多重保护,为研究肿瘤化疗中如何更大程度地保证正常组织,降低药物毒副作用,提高治疗效果提供实验基础。