庆阳市献血者梅毒螺旋体感染现状与趋势分析

了解庆阳市无偿献血者中梅毒螺旋体的感染情况和流行人群属性特征。研究近7年庆阳市献血人群梅毒螺旋体(TP)抗体的检测结果和流行病学趋势分析,并对献血者归队意愿进行调查问卷。2012-2018年从126218人份献血者中筛查出TP抗体阳性样本1193人份,献血者TP抗体阳性率为9.45‰,TP抗体合并感染状况中TP抗体分别与HCV和HBsAg合并阳性的样本数量相对较多。开展献血者梅毒螺旋体检测结果和流行病学趋势分析,为逐步完善献血者的归队机制,预防梅毒螺旋体经血传播的风险,提供血液筛查和防控策略科学依据。     

CMIA在梅毒特异性诊断中的临床应用价值

目的探讨全自动微粒子化学发光免疫法(CMIA)在梅毒特异性抗体筛查中的临床应用价值。方法收集疑似梅毒病例血清标本396份,分别采用CMIA、明胶颗粒凝集试验(TPPA)和蛋白质印迹法(Western blotting,WB)对标本进行梅毒特异性抗体检测,以蛋白质印迹法为金标准,比较CMIA和TPPA的敏感度与特异性。采用SPSS 20.0统计学软件绘制ROC曲线,计算得出本实验室梅毒特异性抗体S/CO的最佳临界值。结果在396份血清样本中,以WB结果为梅毒特异性抗体检测金标准,CMIA的敏感度为100%,特异性为88.9%,阳性预测值为87.1%,阴性预测值为100%,与WB的总符合率为93.7%;TPPA的敏感度为96.4%,特异性为91.2%,阳性预测值为89.1%,阴性预测值为97.2%,与WB的总符合率为93.4%。ROC曲线分析得出梅毒特异性抗体S/CO比值为3.42时,CMIA的特异性达到98.57%,敏感度为97.71%,具有的诊断价值最高。结论 CMIA检测梅毒螺旋体特异性抗体具有高敏感度和特异性,与TPPA比较优势明显,可作为临床上梅毒特异性抗体大批量血清学检测的首选方法。当CMIA的S/CO≤1.0或≥3.42时,可直接报告结果,节约医疗成本;当CMIA的S/CO为1.00～3.42时,可加做WB确证试验以提高检测结果的可靠性和准确性。     

TRUST诊断试剂的配制与初步检定

人体感染梅毒螺旋体后，患者体内产生一种抗心磷脂的抗体，即反应素。根据这一原理可以在体外用心磷脂（cardiolipin）作为抗原检测梅毒患者血清中的抗心磷脂的抗体。本品系采用VDRL抗原重悬于特制的甲苯胺红溶液中制成的TRUST试剂。能与血清或血浆中反应素发生红色的絮状凝集反应。本品以科学的配方，熟练的技术，高纯度的原材料，成熟的工艺制得的TRUST试剂，经初步检定已达到有关标准。是临床实验室梅毒初筛和疗效观察的必备试剂之一。     

11682名受血者输血前血液传染性指标分析

目的 :探讨受血者输血前传染性指标检测的意义。方法 :对11682名受血者输血前标本进行HBsAg、抗 -HCV、抗 -HIV和梅毒抗体4项指标进行检测 ,统计并分析。结果 :输血前受血者4项指标总阳性率为7 44 %。其中HIV和梅毒螺旋体感染呈上升之势 ,50岁以上人群梅毒螺旋体感染率较高 ,上升尤为显著(P<0 01)。结论 :受血者输血前有必要检测血液传染性指标 ,并将其列入患者输血的必要环节     

肝抗原自身抗体的检测在自身免疫性肝炎诊断中的临床意义

目的 检测自身免疫性肝炎(AIH)患者血清中抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体(LKM-1)、抗肝细胞溶质抗原(LC-1)及抗线粒体抗体(AMA-M2),并对其阳性率进行比较,为临床诊断AIH筛选和确立相应的实验辅助诊断指标.方法 采用免疫荧光法检测抗SMA,免疫印迹法检测抗SLA/LC、抗AMA-M2、抗LKM-1及抗LC-1.结果 自身免疫性肝炎(AIH)组:抗SLA/LP抗体阳性率为42.9%,抗SMA阳性率为14.3%,抗LKM-1、抗LC-1及AMA-M2均为阴性.原发性胆汁性肝硬化(PBC)组:抗线粒体抗体(AMA-M2)阳性率100%,其他各项检测均阴性.对照组全部阴性.结论 抗SLA/LP抗体在AIH相关抗体中有较高的诊断价值,可作为AIH新的血清学指标.     

2006～2008年湘潭市无偿献血者HIV与TP感染状况的调查

目的调查湘潭市无偿献血者中人类免疫缺陷病毒（HIV）和梅毒螺旋体（TP）的感染状况。方法2006年1月～2008年12月湘潭市共检测53969名献血者,采用ELISA检测献血者的抗-HIV和抗-TP,梅毒螺旋体还增加TRUST的检测,确定HIV和TP在湘潭市献血人群中的感染率。结果所有献血人员中没有检测到HIV感染,TP的感染率年平均为0.43%。ELISA与TRUST检测抗-TP的结果差异有统计学意义;TP-ELISA敏感性高于TRUST。结论湘潭市献血人员中未发现HIV感染者,但梅毒的感染率有上升的趋势,提示本站应着重加强梅毒螺旋体的检测。     

吗啡人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用化学法合成吗啡人工抗原,将此抗原免疫新西兰大白兔制备抗吗啡多克隆抗体.利用混合酸酐法将吗啡人工抗原分别与蛋白质载体BSA及OVA偶联,经蛋白质电泳以及紫外扫描检测,证明吗啡人工抗原合成成功.用间酶联免疫检测法检测,证明制备得到了高效价的吗啡多克隆抗体血清,且与吗啡人工抗原具有高特异性反应,可用于吗啡免疫学检测方法的研究.     

4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化

用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔获得GnRH抗体.用间接ELISA方法检测抗血清效价,并用Western blot鉴定其特异性.制备抗原肽亲和纯化柱,纯化多克隆抗体.结果显示,4种多克隆抗体效价高达1∶500 000(体积比),并能和相应的GnRH多肽特异性结合,纯化后的抗体在SDS-PAGE显示为单一条带.通过上述方法,获得4种高效价、高纯度的GnRH抗体,为低等动物GnRH的研究提供了理论依据.     

老年人群感染梅毒螺旋体血清学检测结果的研究

探讨老年人梅毒螺旋体3种血清学检测效果。选取2015年1月1日到2015年12月31日医院收治60岁以上住院患者行梅毒检测后的110例梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)阳性患者为研究对象,对患者进行甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)试验。比较3种检测方法的检测结果。110例TP-ELISA阳性患者经TRUST检测,57例为阳性,阳性率为51.8%。经TPPA检测,107例患者均为阳性,阳性率为97.3%。TPPA检测阳性率明显高于TRUST检测,x2=59.887,P0.05。TP-ELISA与TRUST联合筛查,减少部分患者的漏诊或误诊,TPPA作确证试验,结果更为可靠。联合应用TP-ELISA、TRUST、TPPA三种方法可以提高检测的特异性和灵敏度。     

左氧氟沙星人工抗原的制备及其抗体鉴定

用N-羟基琥珀酰亚胺法把左氧氟沙星与载体蛋白牛血清白蛋白偶联制备免疫抗原,用氯甲酸异丁酯法将左氧氟沙星与鸡卵清蛋白偶联,制备包被检测抗原,采用紫外扫描法对合成的抗原进行鉴定.用免疫抗原免疫大白兔获得抗左氧氟沙星多克隆抗体血清,经间接ELISA试验检测特异性抗体效价,测得效价达1:212以上.通过紫外扫描及间接ELISA试验,结果表明,制备的抗原和抗体获得成功.     

麻痹性痴呆4例临床分析

目的 分析麻痹性痴呆的临床特征和诊断.方法 回顾性分析4例麻痹性痴呆患者的临床资料,智能测定和各项实验室检查结果.结果 4例患者误诊为精神分裂症3例.4例患者血清梅毒抗体检查均为阳性,2例脑脊液梅毒抗体阳性,简易智力状况检查评分均≤21分.经青霉素和抗精神药物治疗后,一般精神症状控制,但均有不同程度的智能下降.结论 麻痹性痴呆极易误诊,临床表现、梅毒血清学、脑脊液检查是诊断的重要依据,早期诊断和治疗是预后的关键.     

戊二醛聚合猪血红蛋白免疫学特性分析

目的 阐明加弗氏佐荆条件下,戊二醛聚合猪血红蛋白(glutaradehyde polymerized porcine hemoglobin,pPolyHb)对不同种类动物的免疫原性,初步探讨pPolyHb与人、牛血红蛋白的抗原决定簇的异同.方法 在加弗氏佐剂的条件下,pPolyHb多次皮下免疫小鼠、大鼠和兔子.间接ELISA法检测抗血清IgG滴度;免疫印迹法分别检测小鼠、大鼠和兔子抗pPolyHb抗体与猪、牛、人、小鼠、大鼠、兔子、pPolyHb和戊二醛聚合牛血红蛋白之间的交叉反应.结果 在加弗氏佐剂的条件下,pPolyHb能够刺激动物产生较高滴度的IgG,不同种类的动物产生IgG滴度不同;小鼠、大鼠和兔子抗pPolyHb抗体与不同来源的血红蛋白之间的交叉反应有明显的差异.结论 在有弗氏佐剂的条件下,pPolyHb有较强的免疫原性.但是,对不同种类动物免疫刺激的强弱不同;对不同种类的动物,pPolyHb刺激抗体产生的抗原决定簇可能大部分相同,但也有部分不同,由此产生的抗体也不同;pPolyHb与人和牛血红蛋白均有一些相似的抗原决定簇,但也有一些相互独立的抗原决定簇.     

猴B病毒BVgD-多肽ELISA检测方法的建立

目的建立猴B病毒抗体BVgD-多肽ELISA检测方法。方法以Western-blot分析猴B病毒糖蛋白D(BVgD)上的多肽抗原决定簇(BVgD-多肽)的抗原性,采用方阵滴定法,确定ELISA法的最佳实验条件。用灭活BV全病毒、HSV-1和BVgD-多肽三种抗原系统对猴血清样品进行平行检测,比较分析了三种系统的抗原性特点。并且将检测结果与美国BV抗体检测试剂盒的检测结果进行了比较。结果建立了猴B病毒抗体的BVgD-多肽ELISA法,研究结果表明本方法与BV全病毒和以HSV-1病毒为抗原的试剂盒相比,敏感性较低、特异性较好,避免了制备BV抗原对实验室要求高和HSV-1抗原引起的非特异性问题。检测结果与美国实验室BV抗体检测结果的符合率达85%。     

SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因的表达及其在SARS诊断中的应用

目的为SARS感染后建立一种特异性免疫学诊断方法,为基因疫苗的研制提供备选实验材料.方法利用基因重组的方法,在大肠杆菌中表达了SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白全长基因,经包涵体的初步纯化,金属螯合层析进一步纯化N蛋白,SDS-PAGE电泳和ELISA方法进行结果检测.结果N蛋白抗原与30名SARS感染患者血清结合全部为阳性,对照组30名正常人血清为阴性,30名发热但非SARS患者血清为阴性.结论利用基因重组的方法对SARS-CoV N蛋白进行了表达和纯化,证明该重组N蛋白抗原具有良好的反应特异性,是良好的应用于病毒感染早期诊断的抗原.完全可用于组构检测核心抗体的诊断试剂.并建立了免疫学的检测方法,为抗体检测提供了安全、方便的手段,并为基因工程疫苗研究奠定了基础.     

应用单克隆抗体建立快速狂犬病毒抗原检测方法及其应用的研究

该项目运用单克隆抗体技术快速检测狂犬病毒抗原，采用狂犬疫苗作为标准抗原，免疫动物，制备出抗狂犬病毒的单克隆抗体，再将获得的多株单抗混合，增加单抗的亲合力，捕捉狂犬病毒抗原，做成酶免疫双抗体夹心法试剂。用该试剂对不同来源的狂犬病毒株和不同来源的狂犬疫苗进行检测，结果与法国巴斯德研究所生产的试剂测试结果相同，     

抗大肠癌组织差异表达蛋白(SCAP47)抗体的制备及初步应用

制备一种新的大肠癌组织差异表达蛋白质抗体(抗SCAP47),用于检测大肠癌相关肿瘤抗原SCAP47。采用本室制备的大肠癌组织差异表达蛋白质(SCAP47)免疫新西兰纯种兔,制备兔抗SCAP47抗体,用双向免疫扩散法和ELISA法测定抗体效价;并用ELISA法检测129例患者的胃肠道肿瘤和疾病及正常对照组织的可溶性SCAP47抗原。用SCAP47抗原免疫新西兰纯种兔,获得抗SCAP47抗体,经检测其最高效价：双向免疫扩散法为1：32;ELISA法为1：6400。129例患者的胃肠道肿瘤和疾病及正常对照组织可溶性SCAP47抗原ELISA法检测结果显示：诊断大肠癌的敏感性52．4％,特异性95．4％,阳性预示值84．6％,阴性预示值80．6％,似然比11．4,约登指数0．47。本实验制备的抗SCAP47抗体是一种新的大肠癌相关抗原SCAP47抗体。由于SCAP47不同于CEA、P^27、CCA等大肠癌肿瘤标志物,且在大肠癌中呈现高度表达,推测其可能是一种新的大肠癌相关抗原。因此,制备抗SCAP47抗体为用于多种指标联合检测早期大肠肿瘤提供了一种新的检测工具。     

猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法的建立与初步应用

摘要: 目的 建立猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法,应用于临床样品中 FHV-1 抗体的检测。方法 培养猫肾传代细胞( CRFK) ,接种 FHV-1 病毒,制备 CRFK 正常抗原和 FHV-1 特异抗原,滴定山羊抗猫 IgG-HRP 和 抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、稳定性及精密性实验。结果 正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工 作浓度分别为 0. 05 μg /mL、10 μg /mL 和 1∶ 5 000; 正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为 8. 7% 和 5. 8% ,批间平均变异系数分别为 11. 9% 和 6. 6% ; 检测灵敏度为 1∶ 6 400; 与猫细小病毒( FPV) 、猫杯状病毒( FCV) 均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于 25% 。结论 建立的 ELISA 方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强,可用于猫 FHV-1 抗体的检测。     

GFAP单克隆抗体制备及ELISA检测方法研究

制备抗胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)单克隆抗体,并尝试建立双抗夹心ELISA检测方法,为出血性脑卒中早期诊断提供基础材料.用重组人GFAP作为抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗GFAP单克隆抗体;用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot检测抗体的亚类、表位和特异性;采用ELISA技术制备GFAP检测试剂盒.获得了7株抗GFAP单克隆抗体,抗体亚类为Ig G2或Ig G1,抗体特异性好.抗体配对成功,ELISA检测重组人GFAP灵敏且稳定.     

建立Raji细胞免疫酶抑制法对血清抗HLA—DR抗体的检测

由于Raji细胞表面具有表达HLA-DR抗原特点,利用被测血清中抗HLA-DR抗体与抗人HLA-DR单克隆抗体竞争和Raji细胞表面HLA-DR抗原结合的特征,建立了Raji细胞免疫酶抑制法检测血清中抗HLA-DR抗体的方法。进行了方法学特异性,重复性和实验条件确定研究,并用此方法检测了72例系统性红斑狼疮患者和113例健康者血清。结果显示:该方法特异性强(中性粒细胞无显色反应);重复性好(抗体阳性血清变异率C.V为4.66％,抗体阴性血清C.V为0％);抗体滴度范围1∶5-1∶40。系统性红斑狼疮患者中抗HLA-DR抗体阳性率为30％;而健康阳性率为1.8％。作者认为:用Raji细胞免疫酶抑制法检测血清中抗HLA-DR抗体是一种特异性强,重复性好,操作简便和假阳性率低的方法,这种方法值得推广应用。     

长爪沙鼠仙台病毒( SeV) 抗体ELISA 检测方法的建立与应用

摘要: 目的建立长爪沙鼠仙台病毒( SeV) 抗体ELISA 检测方法,用于长爪沙鼠体内仙台病毒抗体的检测。方法孵育鸡胚,接种SeV,制备鸡胚尿囊液正常抗原和SeV 特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、精密性、稳定性实验。结果正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0. 1 μg /mL、2 μg /mL 和1∶ 5 000; 正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为9. 6% 和8. 4%,批间平均变异系数分别为9. 0% 和5. 9%; 检测灵敏度为1∶ 10 240; 与沙鼠小鼠肝炎病毒( MHV) 、小鼠肺炎( PVM) 、呼肠孤病毒3 型( Reo3) 均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA 方法特异性、敏感性强,重复性、稳定性好,检测结果,准确、可靠。可用于长爪沙鼠体内SeV 抗体的检测。