BHK21细胞在新型微载体培养系统生长条件优化

目的：使用BelloCell-500AP生物反应器和BioNOC-II微载体,对BHK21细胞在此新型高密度培养生物反应器中的生长特性进行研究。方法：首先将1.5×108个BHK21细胞悬液加入含有微载体的生物反应器内,按生物反应器厂家推荐参数进行培养,每天取载体计数观察BHK21的生长特性。然后调整细胞浓度和微载体培养系统运行参数。结果：BHK21细胞经过6 d培养载体中细胞总数达到峰值,细胞密度是起始接入数量的31倍为4.41×109个;经过培养过程参数优化,确定适于BHK21细胞高密度培养参数。试验成...     

我国BHK-21细胞悬浮培养生产口蹄疫疫苗的进展

口蹄疫疫苗生产中应用BHK-21细胞悬浮培养技术比转瓶贴壁培养在产量和质量上均有优势,该技术也已全面应用于我国口蹄疫疫苗生产中.悬浮培养技术中悬浮细胞株的驯化,个性化培养基开发和生物反应器高密度培养工艺是疫苗生产工艺的关键因素,也是未来研究的主要方向.     

悬浮培养型 BHK -21 细胞的生长规律和不同接种密度培养效果的研究

为探索悬浮培养型BHK-21细胞的生长规律和最佳接种密度,以3．0×10^5个／mL、4．0×10^5个／mL、5．0×10^5个／mL、6．0×10^5个/mL和7．0×10^5个／mL等5个接种密度培养了悬浮培养型BHK-21细胞,绘制了细胞生长曲线和活力变化曲线．结果显示,悬浮培养型BHK-21细胞生长曲线呈“S”型,接种培养前24h细胞处于适应期,生长曲线上密度增长不大,期后细胞进入对数增长期,生长密度呈指数增长．以3．0×10^5个／mL和4．0×10^5个／mL接种培养的在120h达到最大增殖密度,分别为4．65×100个／mL和5．59×10^6个／mL,倍增时间分别为26．9h和26．7h;以5．0×10^6个／mL、6．0×10^6个/mL和7．0×10^6个／mL接种培养的在96h就达到最大增殖密度,分别为5．14×10^6个／mL、5．36×10^6个／mL和5．1×10^6个／mL,倍增时间分别为22．4h、24．1h和25．2h．各组在培养的96h以前细胞活力均在90％以上且变化较小,120h和144h时细胞活力开始下降,且接种密度越高活力下降越快．该细胞以4．0×10^5个／mL、5．0×10^5个／mL、6．0×10^5个／mL接种培养能达到较高培养密度,细胞生长快,且细胞峰值持续时间长．     

悬浮培养型BHK-21细胞生长特性及成瘤性研究

目的:了解低血清驯化的悬浮培养型BHK-21细胞的生长特性及致裸鼠成瘤能力.方法:比较研究悬浮型和贴壁型BHK-21细胞的细胞形态、生长动力学和成瘤性.结果:驯化的悬浮培养型和贴壁培养型BHK-21细胞生长状态均良好,最大增殖浓度分别为517×104/mL和39.67×104/mL,群体倍增时间分别为23.03h和21.36h,能显著提高细胞培养密度(P0.05).背部皮下接种致裸鼠成瘤性实验表明,驯化的悬浮培养型组裸鼠的体重增长率均低于贴壁培养型BHK-21细胞、阳性细胞组(Hela)和阴性细胞组(KMB17)(P0.05),裸鼠成瘤体积增长率均高于其他三组(P0.05).结论:驯化的悬浮培养型BHK-21细胞能显著提高细胞密度,其成瘤性方面还需进一步改善.     

表达vWF蛋白的重组BHK细胞的无血清培养

采用HADAMARD统计设计方法建立了适于重组BHK细胞培养和vWF蛋白表达的无血清培养基SFMA。用SFMA进行重组BHK细胞的批培养,细胞生长明显优于有血清培养(DMEM FBS(φPRS=0．05))和无血清培养基SFM-Ⅱ的培养,最大细胞密度可分别提高16．7％和40%。同时,在培养的96h,蛋白的表达水平比有血清培养提高了18．7%,SFMA维持培养48h的vWF蛋白的表达水平比SFM-Ⅱ提高了50％。     

温度对重组BHK细胞生长、代谢和vWF蛋白表达的影响

通过重组幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)在不同温度下的批培养和脉冲培养,研究了温度对重组BHK细胞生长、代谢以及血管性血友病因子(vWF)蛋白表达的影响。相对于37℃,升高和降低温度的培养都降低了细胞的生长速率和密度,降温的作用更明显,主要表现为延长了细胞生长的迟滞期。在不同温度的脉冲培养中,细胞的比生长速率变化不大,表明进入对数生长期后,细胞生长对一定范围的温度变化不敏感。培养温度对细胞群体中处于S期的细胞比例影响不大,但在33℃和39℃下培养,细胞群体中处于G0/G1期的细胞比例有明显升高,处于G2/M期的细胞比例下降。当培养温度降低到33℃时,细胞群体中发生凋亡的细胞数随着温度升高而增加。温度的降低能显著提高单个细胞的vWF蛋白表达能力,在33℃下培养,vWF平均比生产速率提高了45%。     

柴胡细胞悬浮培养

柴胡愈伤组织的诱导以适当浓度的２，４－Ｄ和细胞分裂素的配合使用效果较好。在细胞悬浮培养过程中，细胞生长的情况是接种后的９￣１８天迅速生长，１８天后基本停止生长；ｐＨ值随培养的进程由开始时的５．８逐渐降至４．９（第９天），然后又出现回升。对培养液的检测表明：未分化出根的柴胡培养细胞也能生成柴胡皂甙。     

伊贝母细胞悬浮培养的研究

研究了伊贝母细胞悬浮培养过程中接种量、培养方式和激素浓度对细胞生长的影响；测得细胞生长周期为１９～２４ｄ；分析了培养液的ｐＨ、蔗糖浓度、电导率和Ｄｏ变化的原因。鉴定了悬浮培养细胞中含有生物碱，其总生物碱和西贝素含量均高于栽培鳞茎。     

细胞悬浮培养制备紫杉醇的研究进展

紫杉醇具有很强的抗癌活性,药用价值很高.综述了生物合成、微生物发酵和细胞悬浮培养制备紫杉醇的研究进展,重点阐述细胞培养过程中外植体的选取、培养基的组成和诱导因子等对紫杉醇产率的影响.     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

基于培养大学生创新能力的开放性实验教学质量评价体系的研究

培养大学生的创新能力是目前高校积极探索的课题,也是高校实行开放性实验教学的主要目标,对于提高开放性实验教学质量,建立开放性实验教学质量评价体系显得十分必要.在以培养大学生创新能力为核心的基础上探讨了开放性实验教学质量评价体系的模式,并在实践中应用.实践表明科学合理的评价体系能很好地促进开放性实验教学质量的提高.     

论教师的创新素质及其培养

教师的创新素质是指在教育教学过程中表现出来的涵盖创新精神和创新能力的稳定的心理品质，对于教师自身的发展和学生创新素质的培养有重要意义。教师的创新素质主要应通过教师个人的努力和学校的管理来培养。     

设施栽培对土壤环境质量的影响

为了解决设施栽培土壤退化问题,以沈阳西郊不同种植年限的蔬菜温室为研究对象,采用实地采样分析的方法,对设施栽培土壤环境质量状况进行了研究。结果表明,不同种植年限的温室土壤全盐、硝酸盐含量均显著高于露地土壤,并随着种植年限呈增加的趋势。温室土壤pH值与露地土壤相比呈下降的趋势。在温室蔬菜不同生长季,随着番茄的生长,土壤盐分及硝态氮含量均呈增加的趋势,土壤pH值呈下降的趋势。温室土壤环境质量随着种植年限增加而逐渐下降。从工程、生物和农艺措施方面提出了解决设施栽培土壤退化问题的建议。     

物理教学中重视创新素质的培养

阐述了物理教育中培养学生的创新能力的几点看法。     

人口素质模型的构建及人口素质水平测度

构建了人口素质模型.围绕个体素质和社会素质,建立了人口素质水平的评价指标体系,选择了30个观测指标,采用主成分分析对我国省、自治区、直辖市的人口素质水平进行了测度和分析.研究结果表明,经济发达地区的人口素质水平普遍偏高;人口素质水平与城市化水平相关程度较大;从动态的、历史的角度来看,经济发展水平对人口素质水平的提升起到了重要作用.     

优化实验室管理 提高人才培养质量

目前我国高等教育发展迅猛，办学规模扩大较快，高校的实验室发展也较快，高校实验室在这种迅速发展的形势下，更应该注重加强实验室建设和管理工作，培养新世纪人才。     

化学实验中非预期效应分析及思索

在详细地分析了化学实验中产生非预期效应的原因的基础上。提出了解决办法 ,结合实验中非预期效应的解决 ,阐明了培养学生创造性能力、科学观察能力、信息的获取、转化、传递、加工能力等综合能力的方法