一品红离体培养及体细胞胚高频率发生的研究

一品红苞片为外植体进行离体培养,以MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1固体培养基愈伤诱导率及相对生长量最高。此培养基中继代的愈伤组织转入MS+2,4-D 1.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+水解酪蛋白80 mg.L-1固体培养基时体细胞胚分化率最高。加入活性碳1 g.L-1有利于高频率体细胞胚发生。MS培养基优于N6和B5培养基,有利于高频率体细胞胚发生。胚性愈伤组织及时转入液体培养基中悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。     

光质和生长物质组合对怀山药零余子脱分化和再分化的影响

本文以怀山药优良品种“铁棍山药”为材料，研究了光质和生长物质的不同组合对零余子脱分化和再分化的影响．结果表明：(1)在愈伤组织诱导过程中6-BA与NAA的组合优于6-BA与2，4-D的组合；在6-BA 2mg/L(单位下同) NAA2和4培养基上，愈伤组织在白光和红光下出现的比较早，诱导率在白光、红光、黄光、蓝光、绿光及黑暗各条件下均能达到100％．(2)在愈伤组织分化过程中，在相同条件下的蓝光分化率最高(为100％)，红光和白光次之(分别为95％和91．7％)，绿光和黄光较低(分别为84．4％和75％)，黑暗最低(为22．6％)．     

杜仲叶片愈伤组织诱导及增殖培养条件的优化

以杜仲嫩叶为外植体,运用正交试验优选6-BA、NAA、2,4-D和PVP四种物质组合,进行杜仲愈伤组织诱导及增殖试验。结果表明:(1)这四种物质对杜仲愈伤组织诱导的影响顺序是6-BA>NAA>PVP,对增殖的影响顺序是6-BA>NAA>2,4-D。利用杜仲叶片诱导愈伤组织最佳培养基为MS+0.5 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1NAA+2%PVP。(2)增殖培养基中添加1.0 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-12,4-D为最适增殖组合,能明显提高杜仲愈伤组织增殖系数。应用优化的杜仲愈伤组织诱导及增殖培养条件,能获得较大量的愈伤组织,使规模化生产杜仲有效成分成为可能。     

安祖花组织培养研究

安祖花外植体的离体培养显示,在MS+2,4-D 0.1 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1+BA1.0 mg.L-1的培养基愈伤组织诱导率最高,达93.8%.40 d后,将愈伤组织接于MS+BA1.0 mg.L-1的培养基上,45 d后出现芽的分化.再生芽易于生根,将小芽接于MS培养基上壮苗30 d,再接于1/2MS培养基上,30 d后形成完整小植株,移栽成活率达95%以上.     

林茜草愈伤组织诱导与组培苗的快速繁殖研究

研究林茜草的茎段培养分化技术,探索林茜草快速繁殖适合培养条件;摸索出诱导林茜草愈伤组织的最佳培养方法,为林茜草人工栽培用以提取其所含代谢药用成分的工业化生产提供原材料.根据植物组织培养方法,将林茜草茎段用不同浓度的生长调节剂培养基配方培养,使其诱导林茜草的茎、叶、进行愈伤组织诱导.结果表明,MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基适于诱导愈伤组织发生;MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基可诱导林茜草茎段能迅速分化为幼苗;MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基与MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基先后使用,可诱导林茜草生根形成完整植株.     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件.以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化.结果表明:珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基(MS+2,4-D 4.0 mg/L+6-BA 2.0mg/L+3%蔗糖)对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇舍量(鲜重)最高,达到160 μg/g.     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

美洲商陆不同外植体组培的初步研究

以美洲商陆(Phytolacca americana L.)叶、下胚轴、根尖为外植体,初步研究了3者最适于诱导形成愈伤组织的激素种类和浓度水平.研究证实,叶诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+0.1 mg.L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1 mg.L-1吲哚丁酸(IBA)+0.1 mg.L-1赤霉素(GA)3+300mg.L-1水解乳蛋白(LH)+30g.L-1蔗糖+9.0g.L-1琼脂,pH5.8.下胚轴诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+0.1mg.L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1 mg.L-1赤霉素(GA)3+300 mg.L-1水解乳蛋白(LH)+30 g.L-1蔗糖+9.0 g.L-1琼脂,pH5.8.根尖诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+5.0 mg.L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+5.0 mg.L-1吲哚丁酸(IBA)+0.1 mg.L-1赤霉素(GA3)+300 mg.L-1水解乳蛋白(LH)+30g.L-1蔗糖+9.0g.L-1琼脂,pH5.8.     

黄芩愈伤组织与丛芽诱导

为寻求黄芩愈伤组织、丛芽诱导的最佳条件,分别以茎尖、茎段、叶片、带节茎段等为实验材料比较不同诱导条件对诱导率的影响;比较培养过程中愈伤组织的增重量及生长状态.结果表明,诱导率:带节茎段要高于其它外植体;MS+6-BA0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L为愈伤组织诱导率最高、愈伤组织增殖最大的培养基组合;MS+6-BA1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L为不定芽诱导最合适培养基.     

油菜薄层细胞培养中不同光质对愈伤组织诱导和增殖的效应

本实验以油菜(Brassica napus L.)花序轴薄层细胞为外植体,基本培养基为MS,附加不同浓度和比例的NAA和6-BA组合。接种后,选取白光、植物生长灯、红光、蓝光四种不同光质的光进行光照,以黑暗为对照,置恒温培养柜中培养,探讨不同光质对愈伤组织诱导和增殖的效应。结果表明:在相同或不同的培养基上,不同光质对愈伤组织的诱导效应都不同,蓝光,红光对油菜愈伤组织诱导具有明显的促进作用。在相同培养基中,不同光质处理对愈伤组织的增殖效应也不同,蓝光、红光对愈伤组织增殖的促进作用也是明显的。     

睡菜外植体愈伤组织诱导与培养初步研究

利用睡菜带芽的嫩茎段作为外植体,切成0.5 cm长的片段,通过MS培养基和激素配比实验,筛选出了睡菜茎段愈伤组织诱导的最佳培养基配方.实验结果表明：适宜的消毒时间75%酒精30 s,升汞9 min;适宜的初代培养基为MS＋BA 1.0 mg.L^-1＋NAA 0.10 mg.L^-1;适宜的继代培养基为MS＋BA 0.5 mg.L^-1＋NAA 0.05 mg.L^-1;在培养基中添加1.5 g/L的多菌灵粉剂可以有效抑制真菌生长,诱导出愈伤组织后应在30 d内及时进行继代培养.     

长春花愈伤组织的诱导和增殖

以长春花(Catharanthus roseus (L.)Don)幼嫩叶片作为外植体．接种于附加不同浓度的NAA,2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果发现除单独使用KT不能产生愈伤组织外,其它3种单独使用时,在一定的浓度范围均有愈伤组织产生;最佳的组合培养基为MS NAA 0．5mg／L 2,4-D0．5mg／L 6-BA2．0mg／L．进一步研究发现,在黑暗和光照培养条件下,愈伤组织增殖呈“S”型,且生长周期均为27d。     

驱蚊香草愈伤组织的诱导和增殖

以驱蚊香草（Pelargonium graveolens）的幼嫩叶片为外植体,接种于附加不同浓度的NAA、2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果表明：单独使用4种植物生长调节物质对驱蚊香草愈伤组织的诱导在一定浓度范围内都有效果,其中单独使用KT时效果不太明显;最佳的组合培养基为MS＋2,4-D0．2mg／L＋6BA0．5mg／L．在黑暗和光照培养条件下．愈伤组织的增殖呈“S”型,且生长周期均为30d．     

正交设计法在白三叶组织培养中的应用

以白三叶的叶片为外植体,采用正交设计法,对愈伤组织生长和细胞悬浮培养的培养基进行了优化筛选。实验结果表明,白三叶叶片愈伤组织生长的最佳培养基配方为ＭＢ＋０．５ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／Ｌ甘氨酸＋１００ｍｇ／Ｌ肌醇＋３％蔗糖＋０．７％琼脂;细胞悬浮培养的最佳培养基的配方为ＭＢ＋４ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／     

柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导及植株再生

为探索柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导技术,选取柳杉4个家系,采集其尚未完全成熟的种子进行愈伤组织的诱导,并经器官发生再生途径得到再生植株。利用6-BA、2,4-D等激素种类及其浓度的正交设计,研究各因素及其交互作用对柳杉种子合子胚愈伤组织诱导的影响。结果发现:柳杉4个家系的愈伤组织诱导量在8月中旬采种时呈明显上升,至8月底时各家系的子叶胚愈伤诱导率达到最高,其中57号家系愈伤诱导率最高,达92%。柳杉4个家系,在不同激素组合中愈伤诱导率存在着一定的差异。其中57号家系子叶胚在DCR+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L培养时,愈伤组织诱导率达到最高,且诱导出来的愈伤组织状态为白色、干燥、无针状突起,结构紧密。愈伤组织在DCR培养基上成功获得再生植株。     

何首乌根和茎愈伤组织的诱导和二苯乙烯苷含量的检测

以何首乌根和茎为外植体,通过正交试验筛选根和茎诱导的最佳培养基,结果表明在26℃和暗培养条件下,MS培养基中添加1 mg•L-1 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和0.4 mg•L-1萘乙酸（NAA）最容易诱导出愈伤组织,诱导率可以达到96.7 %。通过HPLC测定了根和茎愈伤组织的二苯乙烯苷含量,分别为1.5mg/g和0.4mg/g。