几种蛋白质或多肽放射性碘化方法的比较

在放射免疫和放射受体分析中,所要测量的蛋白质或多肽的浓度往往在 pMole 或更低的范围,因此要求放射性配体必需有高比放射性。多肽、蛋白质用 H~3或 C~(14)标记比较困难,最常用的是 I~(131)或 I~(125)标记。后者不仅经济便宜,测量操作简便,而且灵敏度也大大提高。多肽或蛋白质的碘化,要求被标记物的用量少,比放射性高,特别是要保持生物活性。比较熟悉的碘化方法为1.一氯化碘法,2.电解法,3.氯胺-T 法和乳过氧化物酶法。这些方法大多基于蛋白质分子中酪氨酸残基的亲电子碘化作用(为图1所示)。但这些方法存在的共同问题是亲电子碘化作用所要求的氧化条件导致了蛋白质的受     

~(125)I(~(131)I)标记血卟啉的研制

为了研究光敏剂血卟啉在组织内的分布状况及运动变化规律等,以提高疗效,按文献制备了放射性标记的血卟啉作为“示踪剂”。1 碘化标记1)氯胺T法:反应所用的氯胺T(ChT),Na_2S_2O_5,KI等均用0.2mol/L pH7.5PB溶解,临用前配制.小试管中放入血卟啉0.5mL(5mg/mL,针剂,中国医学科学院肿瘤研究所提供)、Na~(125)I(Na~(131)I)25μL(约2mCi)和ChT0.5mL(5mg/mL),搅拌下室温反     

中华眼镜蛇毒组份Ⅲ的碘化标记物制备及质量鉴定

目的：研究对眼镜蛇毒(Naja naja atra venom)组份Ⅲ进行^125I放射性标记的方法及其质量评价．方法：用氯胺-T法碘化标记眼镜蛇毒组份Ⅲ．结果：用氯胺-T法按^125I标记组份Ⅲ，标记物放化纯为98．38％，比活度为0．945mCi／mg，RF值为0．76，每个组份Ⅲ分子上带0．56个^125I原子，与非标记组份Ⅲ有相同的生物学活性和理化性质．结论：所标记的眼镜蛇毒组份Ⅲ符合放射结合分析的要求．     

~(125)Ⅰ-碘化标记抗CEA单克隆抗体的制备

本文报道了~(125)I-碘化标记抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体的制备方法。用氯胺-T法进行放射性碘化标记,标记率68.9—84.2%。产品经Sephadex G-50柱层析分离纯化后,放化纯度达94.1%;若使用前再通过凝胶过滤一次,能达到更高的纯度。产品能保持良好的免疫活性和稳定性,并已用于免疫放射测定法(IRMA)研究中,亦得到了较满意的结果。     

牛精细胞膜上凝集素受体的分离及其测定方法

应用非离子型去垢剂Brij58增溶牛精细胞获得的膜蛋白,经VBL-Sepharose4B亲和柱层析分离,可获得在PAGE、SDS-PAGE中均呈现单一蛋白带的VBL受体.其亚基分子最为46500d.牛精细胞经Brij58增溶的膜蛋白经用~(125)I标记,再经VBL-Sepharose4B亲和柱层析,也能获得~(125)标记的凝集素受体.经测定,用亲和层析法获得的凝集素受体,保持了原有的生物学活性.     

量子调控NaI分子的解离动力学

利用含时量子波包法理论研究了Na 分子与超快飞秒激光脉冲场作用后的解离动力学。受到非绝热效应的影响,NaI分子的激发态波包传播到势能面的交叉区域时发生了分裂。一部分波包转移到V1态势能面上,另一部分波包则在V2态上解离成Na原子和I原子。研究结果表明,NaI分子的解离几率与激发态波包的传播速率有关。通过调节飞秒激光脉冲场的波长和脉冲宽度,可以改变激发态波包的传播速率,最终达到控制NaI分子解离动力学的目的。     

快速标记~(131)I,~(123)I(~(82)Br)-6-碘(溴)甲基-19-去甲基胆固醇

一、引言由小鸟正治等人首次合成的~(131)I 标记6-碘甲基-19-去甲基胆固醇(以下简称 NCL-6-I),是目前公认的对肾上腺疾患的定位诊断和鉴别诊断具有较高临床价值的放射性药物.但小鸟和吴伯惠等人的研究表明,以乙腈或丙酮的溶剂,在通 N_2条件下加热回流4—7小时,Na~(131)I,Na~(123)I 与 NCL-6-I 同位素交换的标记产率为50—70%.由于 NCL-6-I 的热     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的细胞表面受体研究

从Ulex europaeus L.种子中纯化的荆豆凝集素I(UEH I),不仅专一地凝集人O型血细胞,也能凝集牛精细胞,表明这些细胞表面存在有UEH I的受体.应用经FITC或~(125)I标记的UEH I与牛精细胞结合,研究受体在精细胞表面的分布;Glc、Con A、PHA和Fuc的浓度对~(125)I-UEH I与O型血细胞结合的影响;O型血细胞和牛精细胞与~(125)I-UEH I的饱和实验,获得饱和结合曲线或竞争性结合曲线,得出各自的Scatchard图,分别计算出O型血细胞和牛精细胞表面的UEH I受体的数目。     

高分子量尿激酶的放射免疫测定

本文介绍了高分子量尿激酶放射免疫分析方法的具体程序以及人尿中高分子量尿激酶的测量结果。标记采用Hunter等改进的氯胺T氧化法。碘化前,高分子量尿激酶用二异丙基氟磷酸失活,以避免生物机体中干扰物质带来的不良影响。失活的高分子量尿激酶与lmci~(125)Ⅰ反应2分钟,反应液全部上Sephadex G—50柱层析,经鉴定,标记率为35—40％。高分子量尿激酶放射免疫测量程序为:反应管中加入一定体积的缓冲液,30μl~(125)Ⅰ标记的高分子量尿激酶(约2×10~4cpm),标准品或待测样品,反应抗体。总体积0.3ml,摇匀,4℃保温24小时,然后力口入20μlSPA菌体试剂,混匀后于37℃保温0.5小时,3500rpm离心10分钟,测量沉淀放射性。用本法测定5例正常成人尿中高分子量尿激酶值为14.6±6.1iu/ml,灵敏度为0.8iu/ml尿。     

~(125)Ⅰ标记金环蛇神经毒素~(ⅩⅣ)与大白鼠脑皮质内菸碱性结合位点的研究

用离心法,从大白鼠脑皮质部分分离制备含有菸碱样胆碱受体,并用此粗制受体跟~(125)I-标记的金环蛇神经毒素ⅩⅣ(间~(123)I-Nt)进行结合试验。同时应用放射受体分析法研究了~(125)I-Nt 跟粗制受体结合的特性和各种因素对其结合的影响。结果表明:在一定范围内,随着粗制受体量、~(125)I-Nt 量的增加以及结合试验时温孵时间的延长,都能在不同程度上增加粗制受体跟~(125)I-Nt 的结合。但当加入的~(125)I-Nt 和粗制受体量增加到一定限度时,~(125)I-Nt 和粗制受体的结合便会达到饱和状态,然而,这种结合是可逆的。此外,这种结合还受温度、pH、温孵时间等因素的影响,一,二价金属离子和菸碱性受体的激动剂及对抗剂也能程度不同地抑制~(125)I-Nt 与粗制受体的结合.     

一种新型抗癌放射性药物前体的设计与合成

设计并合成一种用于治疗肿瘤的放射性125I标记的药物前体： 2-（2,-磷酸化羟苯基）-6-碘-4-（3氢）-喹唑啉酮,并经荧光光谱、FTIR、MS和NMR确证了目标化合物的结构.在碘标记当中,使用双(三丁基)锡来活化标记困难的有机分子,方法操作简单,定位准确,结果证明有用.     

一碘化N-(2-羟乙基)乙二胺盐在染料敏化太阳电池中的应用

文章利用超微铂电极,结合循环伏安法和电化学阻抗谱,研究了所制备的一碘化N-(2-羟乙基)乙二胺盐(HEEDAI)中,不同I2浓度对溶液中I3-的氧化还原行为及Pt电极/电解质溶液界面的影响;将HEE-DAI和1-甲基-3-丙基咪唑碘(MPII)分别作为I-供体,组成纯离子液体电解质组装成染料敏化太阳电池(DSSC),并比较了相应DSSC的光伏性能。结果表明,随着HEEDAI中I2浓度的增加,溶液中I3-的扩散系数逐渐减小;I2浓度为0.15 mol/L的HEEDAI所组装成的DSSC表现出较好的光伏性能;且与MPII相比较,HEEDAI所组装的DSSC具有较高的开路电压和填充因子。     

用^211At和^131I标记蛋白质的研究

报道了砹—211和碘—131标记蛋白质的方法.通过过氧化氢或氯胺T直接氧化制备,使用凝胶色谱从反应产物中分离标记蛋白质,相对法比较放射性计数测定标记产率,过氧化氢适用于~(211)At标记蛋白质,氯胺T有利于~(131)I标记蛋白质.8次实验的结果表明,用过氧化氢氧化标记的~(211)At牛血清白蛋白产率96.4％,氯胺T氧化标记的~(?)I牛血清白蛋白产率66.1％.间接法标记蛋白质,放射性核素~(211)At同对氨基苯甲酸反应获得对—~(211)At—苯甲酸,经乙醚萃取和高效液体色谱分离,然后再偶联到免疫球蛋白或牛血清白蛋白上。动物实验结果表明,此种结合的标记蛋白质在体内稳定,标记率不低于初始~(211)At放射性活度的40%.     

应用放射受体法测定胰岛素效价的初步探讨

一般测定胰岛素生物活性的方法主要通过生物检定,利用小白鼠惊厥法或兔血糖法,但这两种方法操作繁琐,误差范围较大不能满足生产测定的需要。我们遵照毛主席“教育必须为无产阶级政治服务,必须同生产劳动相结合”的教导,克服重重困难,与有关单位协作,开展了用放射受体法定量测定胰岛素生物活性的工作,摸索了试验条件,现将放射受体法的基本原理,实验方法和初步结果分述于下: 一、基本原理 目前比较多的工作认为蛋白质多肽激素类的作用首先与靶细胞膜上的特异受体相互作用,传递信息,引起细胞内一系列化学传递和转换,最后产生激素引起的生理效应…     

C_(o4)(CO)_8(μ-CO)_2(μ4-POR)_2(R:-C_3H_7,-C_4H_9,-CH_2CH_2Ph)化合物的晶体和分子结构

用x光单晶衍射法测定了三种四核钴原子簇化合物的品体和分子结构,它们均为暗红色或红色片状晶体,Co_4(CO)_8(μ-CO)_2(μ_4-POC_3H_7)_2(I)属单斜品系,空间群P(21/a),晶胞参数属单斜晶系,空间群P_(21/n),晶胞参数属三斜晶系,空间群P1,晶胞参数,分子核心为类八面体构型,即四个钴原子以平面矩形排列,而平面上下由四桥合磷原子构成骨架碎片Co_4P_2,近似为D_(2k)对称性,而整个分子具有对称中心。     

131I标记OVA及其载131I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒SPECT显像研究

制备载131I-OVA的荷正电聚乳酸-乙醇酸(PLGA/DDAB)纳米粒,探讨其在活体动物体内的生物分布与转运研究。氯胺T法对卵清蛋白(OVA)进行131I标记,Sephadex G 25纯化标记抗原,纸层析法测定标记物的生物活性和体外稳定性。纳米沉淀法制备PLGA/DDAB纳米球,将其与131I-OVA共混吸附,制备载131I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒。动物试验选择C57/BL6小鼠,肌肉注射载131I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒,分析131I-OVA在小鼠组织器官中的分布情况,并于注射疫苗制剂后不同时间行SPECT正位静态显像,观察小鼠不同组织内放射性浓聚情况。结果显示,标记抗原经纯化后,测得131I-OVA比活度达32～42 μCi.μg-1,标记率达(71.92±0.08)%,放射性化学纯度为(85.94±0.15)%。标记物在新鲜血清中存放72 h后,仍保持很高的反应活性,表明标记的OVA稳定性良好。采用纳米沉淀法制备PLGA/DDAB纳米球,平均粒径、分散系数和Zeta电位分别为122.8 nm、0.084和+31.5 mV。将其与131I-OVA共混吸附,抗原携载率达(89.60±0.21)%。注射载131I-OVA的PLGA/DDAB纳米球疫苗制剂,与无佐剂疫苗相比,抗原在注射部位消失的速度更为缓慢。结果表明,成功制备了载131I-OVA的PLGA/DDAB纳米球,生物活性较好,可用于抗原在活体动物的生物分布与转运研究。     

一种烟碱乙酰胆碱受体(nChRs)显像前体化合物的合成及标记

以 2 溴 3 吡啶酚和 (S) 2 氮杂环丁烷羧酸为起始物 ,合成了一种以 N (CH3 ) 3 为取代基团的前体化合物 :6 [-N(CH3 ) 3 + I- ] A 85 380 .用此前体化合物进行18F标记取代 ,制得了可用于nChRs受体PET显像的标记化合物 :6 [18F] A 85 380 .整个放射标记分离时间为 5 0～5 5min .其标记率不低于 38%～ 4 8% ,比活度可达 0 .74× 10 11Bq/ μmol.     

(131)~I标记卵清蛋白及其载(131)~I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒SPECT显像

制备载(131)~I-OVA的荷正电聚乳酸-乙醇酸(PLGA/DDAB)纳米粒,探讨其在活体动物体内的生物分布与转运研究。氯胺T法对卵清蛋白(OVA)进行(131)~I标记,Sephadex G 25纯化标记抗原,纸层析法测定标记物的生物活性和体外稳定性。纳米沉淀法制备PLGA/DDAB纳米球,将其与(131)~I-OVA共混吸附,制备载(131)~I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒。动物试验选择C57/BL6小鼠,肌肉注射载(131)~I-OVA的PLGA/DDAB纳米粒,分析(131)~I-OVA在小鼠组织器官中的分布情况,并于注射疫苗制剂后不同时间行SPECT正位静态显像,观察小鼠不同组织内放射性浓聚情况。结果显示,标记抗原经纯化后,测得(131)~I-OVA比活度达32~42μCi·μg-1,标记率达(71.92±0.08)%,放射性化学纯度为(85.94±0.15)%。标记物在新鲜血清中存放72 h后,仍保持很高的反应活性,表明标记的OVA稳定性良好。采用纳米沉淀法制备PLGA/DDAB纳米球,平均粒径、分散系数和Zeta电位分别为122.8 nm、0.084和+31.5 m V。将其与(131)~I-OVA共混吸附,抗原携载率达(89.60±0.21)%。注射载(131)~I-OVA的PLGA/DDAB纳米球疫苗制剂,与无佐剂疫苗相比,抗原在注射部位消失的速度更为缓慢。结果表明,成功制备了载(131)~I-OVA的PLGA/DDAB纳米球,生物活性较好,可用于抗原在活体动物的生物分布与转运研究。     

无标记生物传感技术以及应用

过去20年当中,生物传感分析技术已经广泛应用于科学研究中,其分析系统在实验室等领域广泛使用。简单说,生物传感可以被定义为一种器件：采用生物或化学受体来检测分析物,就键合的选择性、亲和性以及化学计量比、动力学、热力学等方面给出很多有意义的信息。虽然其作为一种强有力的方法,对于化验生物活性分子,精准表征分子识别过程的信息还很欠缺。无标记生物传感,不需要使用受体（如荧光物质、发光体、放射物质等）就可以达到监测的目的。     

人精细胞膜表面白附子凝集素受体的研究

从天南星科犁头尖属白附子和块基中(?)化的白附子凝集素能凝集人精细胞,起凝时凝集类型以尾对尾居多,完全凝集后或为混合型。用FITC标记白附子凝集素,其F/P为1.0,与人精细胞受体的结合表明该受体分布较均匀,以顶体区域较多。用氯胺T法标记~(125)I—白附子凝集素,其比放射性为1 .9微居里/微克,与人精伯胞膜受体的结合呈S型饱和曲线,Scatchard plot非线性,提示受体之间可能存在协同效应。以饱和分析法计算人精细胞膜表面受体的结合位点数为4.1×10_7。