肌红蛋白与药物作用的荧光光谱及同步荧光光谱研究——以盐酸洛美利嗪为例

以荧光光谱法和同步荧光光谱法研究肌红蛋白与药物盐酸洛美利嗪在水溶液中的相互作用,结果显示随着体系中盐酸洛美利嗪的增多,它们的相互作用增强,为阐明药物特别是脑血管扩张药与蛋白质作用提供了理论依据.     

肌红蛋白的活性中心铁卟啉与金属离子相互作用的研究(Ⅰ)--与铜离子的相互作用

用荧光光谱和UV Vis吸收光谱技术研究了肌红蛋白(Mb)和Cu2 的相互作用,结果表明在水溶液中Cu2 的加入使Mb中血红素在597nm处的荧光峰强度降低,也使Mb在407nm处的Soret带的吸收峰强度减弱,清楚地表明Cu2 与Mb发生了相互作用。     

猪心肌高铁肌红蛋白荧光光谱测定条件的确定及功能域的指认

以纯猪心肌高铁肌红蛋白(p Met Mb)为对象,建立荧光光谱条件并经同步荧光指认其主要功能域.研究表明,以600 nm/min扫描速度和中等响应时间为基本条件,p Met Mb的适宜荧光光谱条件分别是20 mmol/L p Met Mb、10 nm狭缝宽度和270 nm或430 nm为激发光波长.经同步荧光光谱解析,酪氨酸(Tyr-)、色氨酸(Trp-)和铁卟啉环(heme-Fe3+)荧光特征峰分别在312、355和630 nm处.270 nm是Trp-和Tyr-适宜激发光波长,而430 nm是heme-Fe3+适宜激发光波长.与马肌红蛋白(h Mb)比较,其Trp-和heme-Fe3+荧光光谱特征峰出现红移.430 nm可激发630 nm处heme-Fe3+,发生电子迁移和能量跃迁.随着Trp-和heme-Fe3+特征峰的红移,推测p Met Mb中heme-Fe由五配位高自旋(Fe2+)转变为六配位低自旋(Fe3+).     

牦牛肌红蛋白的cDNA序列测定及其氧化特性的研究

通过对牦牛肌红蛋白的含量和cDNA序列的测定及心肌肌红蛋白氧化和脂类氧化相关性的研究，初步探讨了牦牛适应高原低氧环境的机理. 牦牛与黄牛的肌红蛋白cDNA序列比较，二者只有2个碱基的差异（89位氨基酸由cac变为cat，91位氨基酸由gcc变为gct），但由于氨基酸密码子简并性，两者的氨基酸序列没有差异.牦牛的骨骼肌的肌红蛋白含量为488.3 nmol/g，与黄牛相比没有显著差异，但牦牛心肌的肌红蛋白含量为823.4 nmol/g，比黄牛高61.2％（P＜0.05）.在4 ℃贮存下，牦牛心肌中肌红蛋白的氧     

关于肌红蛋白能带结构的研究

以肌红蛋白为基础,采用赝势理论和其他近似方法提出了一种描述蛋白质半导性的电子模型,所得禁带宽与Eley的实验值基本一致,并据计算结果绘出了其能带图．     

肌红蛋白的活性中心铁卟啉与金属离子相互作用的研究（I）——与铜离子的相互作用

用荧光光谱和UV-Vis吸收光谱技术研究了肌红蛋白(Mb)和Cu^2 的相互作用，结果表明在水溶液中Cu^2 的加入使Mb中血红素在597nm处的荧光峰强度降低，也使Mb在407nm处的Soret带的吸收峰强度减弱，清楚地表明Cu^2 与Mb发生了相互作用。     

过氧化物酶活性部位的模拟及其催化显色反应的研究

本文合成了锰(Ⅲ)与meso-四(4-磺基苯)卟啉的螯合物(Mn-TPPS_4),研究了它作为过氧化物模拟酶对过氧化氢、4-氨基安替比林与苯酚显色反应的催化活性。拟订的光度法可准确地测定0～6μg/ml H_2O_2含量,1.5μg、8.0μg和40μgH_2O_2的平均回收率依次为95％、96％和100％。将显色反应与葡萄糖氧化酶催化反应偶联,测定了人血清中葡萄糖的含量,取得了满意的结果。     

基于漫反射可见光谱无损检测生鲜牛肉和猪肉肌红蛋白

基于表面漫反射可见光谱,提出一种用于定量检测生鲜牛肉和猪肉中脱氧肌红蛋白、氧合肌红蛋白和高铁肌红蛋白的无损检测方法。将光谱检测系统采集的光谱信号转化成反射吸光度,结合多元线性回归预测生鲜牛肉和猪肉中肌红蛋白相对质量分数,同时应用经典可见分光光度法测定肌红蛋白相对质量分数以验证预测结果有效性。结果表明:表面漫反射可见光谱法可定量检测肌红蛋白,理论预测结果与实验结果之间存在显著线性关系,相关系数R²≥0.9536。基于漫反射可见光谱的无损检测方法可量化生鲜牛肉、猪肉中肌红蛋白质量分数,旨在为生鲜肉制品的品质监控提供技术支持。     

催化动力学测定痕量钴研究综述

综述了近年来催化动力学光度法测定痕量钴的进展情况。对催化显色动力学光度法、催化褪色动力学光度法、催化荧光光度法、阻抑动力学光度法、催化化学发光光度法等几个类别，从反应介质、灵敏度、线性范围等方面介绍了对不同反应体系的研究情况，并对催化动力学光度法测定痕量钴的发展趋势做出预测。     

竹红菌甲素和马心肌红蛋白相互作用的光谱研究

利用紫外可见吸收光谱和荧光光谱研究了竹红菌甲素(HA)与肌红蛋白(Mb)的相互作用．结果表明两者的相互作用主要存在于竹红菌甲素与马心肌红蛋白分子中的氨基酸残基之间．     

乳酸脱氢酶在CTAB-戊醇反胶束体系中的催化动力学研究

以十六烷基三甲基溴化铵（CATB）-异辛烷-戊醇反胶束体系对乳酸脱氢酶（LDH）了固定化,探讨了体系含水量W0（W0=n（水）/n（CTAB）、CTAB浓度、戊醇体积比对LDH固定化的影响及游离酶和固定酶的催化动力学性质.结果表明：LDH进入反胶束的最佳条件是：体系含水量为4.3,CTAB浓度为0.24 mol/L,戊醇体积比为25%.对游离酶和固定化酶的酶促反应的最适pH值均为8.8,最适反应温度分别为52℃和30℃,米氏常数Km分别为65mmol/L和48mmol/L.在25℃时,游离酶存放2 h后失活35%,而固定化酶仅失活16%,说明反胶束固定化LDH具有良好的活力稳定性.     

双酶提取蒲公英根多糖工艺优化及其抗氧化性研究

以蒲公英根烘焙粉为原材料,研究了酶添加量、酶解温度和酶解时间在单酶和双酶协同酶解条件下对多糖得率和DPPH自由基清除率的影响,并采用响应曲面法优化了酶解工艺参数。结果表明,单酶法提取1g蒲公英根多糖的适宜条件为:料水比(g∶mL)1∶30,纤维素酶酶解温度50℃,酶添加量1.0mL;木瓜蛋白酶酶解温度60℃、酶添加量2.0mL。双酶法多糖提取率高于单酶法,影响多糖得率的工艺因素主次顺序为酶解时间、酶解温度、酶添加量。适宜的多糖提取条件为:料水比(g∶mL)1∶30,木瓜蛋白酶悬液(200U/mL)添加量1.98mL,纤维素酶悬液(200U/mL)添加量0.99mL,55℃提取1.9h,此时多糖得率为32.97%±0.13%,DPPH 自由基清除率为92.31%±0.25%。烘焙和酶解工艺可提高蒲公英根多糖得率和DPPH自由基清除率。     

高原鼢鼠和小白鼠心肌及骨肌肌红蛋白含量与乳酸脱氢酶活性的比较研究

通过比较高原鼢鼠和小白鼠心肌和骨骼肌中肌红蛋白（Mb)含量和乳酸脱氢酶（LDH）活性的差异,探讨动物心肌和骨骼肌Mb含量对LDH活性的影响。     

酶解技术及其应用

简单介绍了酶解技术的基本原理以及酶解技术在中药有效成分提取与分离纯化、食品饮料、酿造、饲料、纺织等领域的应用。     

蔗渣乙醇预处理及其对酶解的影响

采用自催化乙醇法对蔗渣原料进行预处理,并通过傅里叶变换红外光谱、扫描电镜、X射线衍射仪对预处理样品进行分析,然后进行酶解.结果表明:蔗渣原料经乙醇预处理后,有大量木质素溶出和半纤维素水解;预处理样品的相对结晶度提高了32.97%;蔗渣纤维表面碎化,细小纤维暴露出来,极大地提高了酶解效率;当温度为195℃、乙醇体积分数为40%、保温时间为30min时,蔗渣原料木素去除率为57.97%,此时100g蔗渣原料经此预处理所得预处理液中的木糖量为8.59g,占原料中总木糖的35.16%,预处理样经酶解,所得酶解液中葡萄糖含量为40.29g,占原料中总葡萄糖的92.15%;初步实现了蔗渣原料中半纤维素和纤维素的逐步分离,同时得到大量乙醇木素;最优酶用量为10FPU/g(以每克固体浆料计),固液比为1∶40(g/mL).     

不同磁场对过氧化氢酶活性及酶促反应的影响

在不同的磁场条件下研究了Nu—Fe—B静磁场对过氧化氢酶活性和反应动力学参数及二级结构的影响．采用磁场强度为0．15T、0．30T、0．45T的静磁场分别处理过氧化氢酶溶液,以曝磁时间为参数,对酶的活性、反应动力学参数、二级结构分别进行测定．结果表明,与对照样相比,处理过的过氧化氢酶活性增大,当作用时间为1h时,活性最大．3个磁场下酶的活性分别增加了18．2％、23．5％和25．8％;用不同的磁场对过氧化氢酶溶液分别作用1h,与对照样相比,随着磁场强度的增加,Km值从0．02785mol／L增加到0．08724mol／L,Vm值从0．03597mol／（L·min）增加到0．09511mol／（L·min）;同时,圆二色光谱测定结果表明磁场处理过的过氧化氢酶的二级结构也发生变化,这可能是由于磁场对过氧化氢酶辅酶中的Fe^3＋影响而引起的．     

活性氧自由基对细胞色素C和肌红蛋白的作用

研究了过硫酸铵－Ｎ，Ｎ，Ｎ＇，Ｎ＇四甲基乙二胺（ＡＰ－ＴＥＭＥＤ）体系产生的活性氧自由基（超氧阴离子自由基（Ｏ２－）、羟基自由基（·ＯＨ））对细胞色素Ｃ和肌红蛋白的作用．结果表明，Ｏ２－可以将细胞色素Ｃ中的三价铁离子还原为二价铁离子，延长作用时间可使铁卟啉基团脱落；亦可使肌红蛋白中的铁卟啉脱落．与此同时，紫外可见吸收光谱发生了变化．圆二色谱的变化说明蛋白分子中的α－螺旋遭到破坏．植物Ｌ－ＳＯＤ对于该损伤有保护作用．     

锌离子对酶法测定抑制作用的研究

基于乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的反应,在最佳酶反应条件下,研究了金属离子对酶催化的抑制作用.发现Zn2 对LDH的酶促反应有显著的抑制,抑制常数KQS为13mmol/L,属非竞争性抑制.根据在抑制剂作用下的米氏方程,可以利用酶法对锌离子进行定量测定.通过加入金属离子络合剂乙二胺四乙酸(EDTA)进行了干扰消除实验,结果表明:可有效消除一定浓度的Zn2 对LDH酶促反应测定底物的干扰.