葡萄球菌GST-mTSST-1融合蛋白的纯化及其免疫活性鉴定

将DH5α/pGXmTSST基因工程菌用IPTG诱导表达,经超声波破碎、离心、收集上清再用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱(GS4B)亲和层析纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变GST-mTSST-1融合蛋白.以SDS-PAGE分析该融合蛋白的表达量和纯度,经双向免疫琼脂扩散试验鉴定GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性.结果表明,GST-mTSST-1融合蛋白在重组菌中可溶性表达,通过GS4B胶亲和层析纯化,SDS-PAGE电泳分析得到纯度较高的目的蛋白,其相对分子质量约为47 000,与理论值一致.兔抗GST-mTSST-1抗血清可特异识别天然rTSST-1蛋白中与GST-mTSST-1融合蛋白相对应的抗原组份,证实GST-mTSST-1融合蛋白具有与野生型rTSST-1相同的表面抗原决定簇,具有较好的免疫原性.     

免疫磁珠检测食品中金黄色葡萄球菌的研究

通过对金黄色葡萄球菌免疫磁珠添加量、免疫磁珠与菌液最佳反应时间、免疫磁珠分离金黄色葡萄球菌的敏感性试验、特异性试验的研究,确定了金黄色葡萄球菌抗体添加量50μg/m L、免疫磁珠添加量100μL,免疫磁珠与菌液最佳作用时间为30 min,免疫磁珠法检测灵敏度底限为10-9,相应的细菌浓度为14 cfu/m L.本试验制备的免疫磁珠灵敏性强,特异性高,大大节省了检测时间和费用.因此研究食品中金黄色葡萄球菌快速、准确检测方法以预防和控制食品安全事件的发生,具有重要的现实意义.     

金黄色葡萄球菌快速检测技术的研究进展

金黄色葡萄球菌是食品、医院内感染以及化妆品领域重要致病菌之一,建立和发展快速检测方法对于预防和控制该菌引起的疾病具有重要意义.对金黄色葡萄球菌的生物学特性、流行病学特征进行了简单介绍,并重点综述了近些年建立的常用金黄色葡萄球菌快速检测方法,分析比较了各检测方法的优缺点.     

PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因

根据金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的ＰＣＲ技术。利用该方法可从含有肠毒素Ｄ基因的金黄色葡萄球菌中扩增出ＰＣＲ产物。扩增产物具有特异性,长为３１６个碱基对。经限制性核酸内切酶ＨｈＩⅠ酶切证实扩增产物为ＳＥＤ基因片段。     

不同条件对金黄色葡萄球菌耐热核酸酶活性影响的研究

耐热核酸酶作为产肠毒素型金黄色葡萄球菌的生长标志，对其研究具有重要的意义．本实验通过比较不同pH值、生长时间、Na^＋浓度、加热时间等因素对金黄色葡萄球菌耐热核酸酶分泌及活性的影响．反映了耐热核酸酶是一种性质十分稳定的蛋白质，耐热核酸酶活性检测应用于加工处理食品的金黄色葡萄球菌污染方面具有重要意义．     

基于顺磁微粒的金黄色葡萄球菌肠毒素B免疫层析试纸条的制备

采用基于顺磁微粒标记抗体的免疫层析法,制备金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)快速定量检测的层析试纸条。利用EDC和NHS交联活化顺磁微粒,对顺磁微粒包被抗体的体系进行优化;根据双抗夹心法原理制备免疫层析试纸条,对制备的SEB免疫层析试纸条进行测试研究。优化的顺磁微粒偶联抗体的缓冲体系为p H 9.0,5mmol/L硼酸,0.05%Tween-20;磁珠包被抗体量为125μg/2mg磁珠,封闭剂为0.25%的脱脂牛奶,磁珠保存液为5mmol/L硼酸、0.05%Tween-20+0.05%Triton X-100,0.01%Na N3,0.5%BSA,p H9.0;建立的SEB顺磁微粒免疫层析试纸条T线抗体浓度为1mg/m L,最低检测限为1ng/m L,磁信号检测显示,该试纸条在SEB浓度0.1~1 000ng/m L范围内具有很好的线性关系。SEB顺磁微粒免疫层析法具有简单快速、灵敏度高、可定量的特点,可应用于SEB的快速检测。     

微量元素硒对金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的：观察5种浓度的亚硒酸钠对金黄色葡萄球菌的抑制作用。方法：采用Kirby－Bauer纸片扩散法。结果：5种浓度的亚硒酸钠的抑菌环直径分别为10.2mm、12mm、13.8mm、15.6mm、16.8mm,青霉素和红霉素的抑菌环直径则各为7．2mm、9．4mm。结论：硒对金黄色葡萄球菌的抑制作用要强于青、红霉素（P＜0.001）,并与浓度呈正相关。     

用生物素标记核酸探针检测鼠金黄色葡萄球菌的研究

利用聚合酶链反应技术从金黄色葡萄球菌基因组DNA中扩增出 6 78bp耐热核酸酶nuc基因特异性片段 ,经生物素标记后作为核酸斑点杂交试验的探针 ,对实验动物的金黄色葡萄球菌及其临床样品进行了检测。结果显示 ,标记探针与金黄色葡萄球菌DNA呈杂交阳性 ,而与链球菌、大肠埃希氏菌和巴氏杆菌DNA呈杂交阴性 ,斑点杂交的检测灵敏度为 1pg基因组DNA。用斑点杂交试验和PCR对 2 4 0份临床样品进行了检测 ,检出率为 2 9% (7 2 4 0 ) ,符合率为 10 0 %。这些试验结果表明 ,研究制备的核酸探针及建立的斑点杂交试验具有较高的特异性和敏感性 ,可用于实验动物金黄色葡萄球菌的快速检测     

炒青对金黄色葡萄球菌抑制的研究

用琼脂扩散法测得６０℃下浸泡０．５小时的炒青提取液对金黄色葡萄球菌地抑制效果最佳,炒青对金黄色葡萄球菌的最低抑制浓度是０．１％,并测得当年炒青的抑菌了好、隔年次之、三年后抑菌作用明显下降。     

谷胱甘肽S转移酶P1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病关系的研究

目的:了解湖北地区健康汉族人群和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)基因多态性,探讨汉族人GSTP1基因多态性与COPD的关系。方法:用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态分析(PCR-RFLP)检测68例健康汉族人和50例COPD患者GSTP1基因型。结果:健康人群和COPD人群中有3种基因型,但以Ile105纯合子基因型为主,两组人群的基因型和基因频率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:GSTP1基因多态性可能与COPD的发生无相关性。     

关于谷胱甘肽硫转移酶M1和T1基因多态性与疾病风险关系Meta分析的中文文献的文献计量学分析

通过《中国知网》的期刊特色期刊博士论文硕士论文和国内会议五大子库,对谷胱甘肽硫转移酶M1和T1(GSTM1、GSTT1)基因多态性与疾病风险关系Meta分析的文献进行了跨库检索,经筛选,得到40篇以中文发表的Meta分析文献,并用文献计量方法对其发表年度、来源子数据库、学科、发表期刊、作者、机构、基金等进行了统计分析,以期对关于GSTM1、GSTT1基因多态性与疾病风险关系Meta分析的国内文献的发展趋势有更全面的认识.     

人胰高血糖素样肽-1突变体的生物学活性研究

为了解基因工程制备的重组人胰高血糖素样肽-1突变体（^2Gly-hGLP-1）的生物学活性，首先将重组hGLP-1和^2Gly-hGLP-1分别与二肽酰基肽酶Ⅳ（DPPⅣ）在37℃共同孵育．结果表明，与DPPⅣ孵育4h后，大于90％的hGLP-1被DPPⅣ降解，而85％以上的^2Gly-hGLP-1保持完整，可明显抵抗DPPⅣ的降解．之后将二者分别以12nmol／kg剂量腹腔注射Wistar大鼠，在不同时间点取血，测定血糖与血浆胰岛素水平．与对照组相比，腹腔注射重组hGLP-1和^2Gly-hGLP-1（12nmol／kg）可显著降低血浆葡萄糖水平，并提高血浆胰岛素水平（P〈0．001），且在15．30min时间点，^2Gly-hGLP-1的效应高于hGLP-1（P〈0．05）．     

Toxicity of Diphenyl-pentenone Against Three Aphids （Homoptera： Aphididae） and Its Effects on the Esterases and Glutathione S-transferase

The most provocative aspect of this study is its original findings on the toxicity of diphenyl-pentenone (1,5-diphenyl-2-penten-l-one, DP) against the three kinds of aphids (Maerosiphum granarium Kirby, Lipaphis erysimi (kaltenbaeh), Schizaphis aurantiae (Fosc.) and the inhibitory effects of DP againstdetoxification enzyme system of the aphid (S aurantiae). The result of bioassay in the laboratory shows that the product has strong contact activity and very good antifeeding activity, with higher efficacy than anabasine and nicotine, two botanical aphidicides. The median lethal concentrations of the three products against the apterous adult (Mgranarium) are 175.85, 217.23 and 245.22 mg/L, respectively, at 24h of pest treatment. DP is inferior to methomyl in contact assay but superior in antifeeding activity assay against the three aphides. DP has strong inhibitory effects on nonspecific esterases, carboxylesterase of aphid (S aurantiae), but it can not inhibit AchE. DP also has strong inhibitory effects on glutathione Stransferase of the aphid.     

前S1抗原的检测及其与HBV血清标志物之间关系的探讨

目的了解前S1抗原和乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物常见模式之间的关系,探讨前S1抗原检测的临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法对269例HbsAg阳性血清进行前S1抗原检测,并与相应的HBV血清标志物模式进行比较分析.结果HbeAg阳性组的前S1抗原阳性率无显著差别(P>0.05),HbsAg阳性组的前S1抗原阳性率也无显著差别(P>0.05).而HbeAg阳性组和HbsAg阳性组之间前S1抗原阳性率则存在显著差别(P<0.01),后者阳性率较高.结论前S1抗原与HBV血清标志物之间有一定关系,临床上宜将两者结合起来检测,综合判断.     

S1不变扩张解及S1不变G扩张解的显式构造

研究了从单连通区域Ω≌R2{∞}到酉群及其实形式的调和映射的S1不变扩张解,证明了S1-不变扩张解既是KerAQZ~一可交换的又是ImAQZ-可交换的;给出了S1不变扩张解的另一种代数构造方法,并且证明了经过旗变换得到的扩张解仍然是S1不变的.随后给出了S1不变G-扩张解的显式构造.     

有毒气体检测报警监控系统设计

介绍了一种基于STC89C52单片机和气体传感器,设计出对空气中的一些有毒气体进行检测,并传输到PC上位机的监控系统。上位机监控软件采用Lab VIEW制作,实现系统的浓度显示、报警以及与上位机串口通信等功能。MQ135和MQ-7两个气体传感器通过ADC0809模数转换器将数据传输到单片机,经处理后显示到现场的LCD1602显示屏中,并将数据传输到监控PC。当空气中监测的气体含量超过预先设定的允许范围时,现场警报声响起,PC机上也会告警提示浓度超标,以提醒人们做好防护措施以及采取应对的方法。     

链霉菌S1的抑菌活性及其对植物病害的防治

摘要： 为了探明链霉菌S1的抑菌活性及其对植物病害的防控作用,通过抑菌圈法研究了链霉菌S1对不同病原菌的抑制作用并分析了菌株S1是否合成几丁质酶和葡聚糖酶,筛选了菌株S1的最佳发酵培养基、发酵时间和最佳接种量,进一步优化发酵培养条件。通过温室防效实验,研究了链霉菌S1发酵液对桃核腐病和番茄根结线虫的防治作用。结果表明：链霉菌S1对多种病原菌有较好的抑菌作用,其中对桃褐腐病原真菌（Monilinia fructicola）和平菇褐斑病原细菌（Pseudomonas tolaasii）的抑制效果最佳。菌株S1能够合成几丁质酶,不能合成葡聚糖酶。链霉菌S1的最佳发酵培养基为G117,最佳发酵时间为3 d,最佳接种量为8%。链霉菌S1的发酵上清液和发酵液对桃核腐病具有显著的防治作用,防效可到达80.66%。发酵代谢产物对番茄根结线虫的杀线活性最高可达90%,发酵原液对番茄根结线虫的防治效果最高到达71.02%。可见链霉菌S1具有较好的防治作用,为植物病害生物防治提供了优良的菌种资源。     

分枝杆菌Mycobacterium sp.M1甾酮C1,2位脱氢酶活性的研究

分枝杆菌Mycobacterium sp．M1可以有效降解大豆甾醇侧链得到雄甾-4-烯-3，17-二酮（AD）和雄甾-1，4-二烯-3，17-二酮（ADD）。通过该菌株细胞和细胞裂解液对底物AD的转化，表明了该菌株中存在甾酮C1．2位脱氢酶。利用酶活测定中活力高的细胞裂解液可以有效地降解大豆甾醇生成ADD。     

南、北五味子抑菌活性差异比较研究

用牛津杯法和平板二倍稀释法检测了2种五味子水提取物对8种细菌和1种真菌的抑菌活性差异.结果表明2种五味子提取物对8种供试细菌大肠杆菌ATCC25922和ATCC35218、普通变形杆菌CMCC49027、沙门氏菌CMCC50094、铜绿假单胞菌ATCC27853、枯草芽孢杆菌CMCC63501、粪肠球菌CMCC32219和金黄色葡萄球菌ATCC25923都有明显的抑制作用,对真菌白色念珠菌ATCC10231不具有抑制作用,对同一种供试细菌北五味子的抑菌圈直径显著大于南五味子,最小抑菌浓度比南五味子至少高1个稀释倍数.