伴刀豆球蛋白A诱导小鼠腹水肝癌细胞膜糖蛋白构象变化的自旋标记研究

近年来,人们发现某些转化细胞株膜表面的糖蛋白能同植物凝集素反应,而在同样条件下正常细胞株则不发生凝聚。当膜糖蛋白受体与植物凝集素交链以后,转化细胞株的恶性增殖便暂时受到中止。已有文献报道凝集反应与细胞膜的流动性有关。然而,在凝集作用过程中膜糖蛋白分子构象的动态变化如何则尚未见有报道。因此,进一步探讨膜糖蛋白受体与植物凝集素之间的相互作用将有助于了解癌变的分子机理。本工作使用顺丁烯二酰亚胺氮     

伴刀豆球蛋白A诱导小鼠腹水肝癌细胞膜流动性降低的ESR波谱研究

肿瘤细抱的特性与细胞膜结构的改变有密切的关系。嵌入到细胞膜类脂双层中的糖蛋白和糖脂参与了细胞多种重要的生理活动,这些多糖链能够特异地与植物凝集素结合产生凝集作用,并可暂时中止转化细胞的恶性增生。然而有关植物凝集素作用的分子机理还不十分清楚,有人报道促细胞分裂凝集素可诱导人外周淋巴细胞、鼠肾淋巴细胞膜流动性增     

小鼠腹水肝癌细胞膜中类脂和蛋白质相互作用的ESR波谱研究

膜的一切正常功能都有赖于膜类脂和膜蛋白结构的完整性.肿瘤细胞的恶性行为与糖蛋白和膜脂结构的变异有密切的关系。据报道,用植物凝集素覆盖肿瘤细胞表面裸露的糖链分子,就可以阻止其恶性生长。但这种作用的机理还不十分清楚。由于完整癌变细胞膜中类脂和蛋白质相互作用的报道比较少。因此我们合成了能与膜蛋白-SH基共价连接的顺丁烯二     

文蛤血蓝旦白标记红细胞表面刀豆球旦白A受体的扫描电镜观察

已经知道细胞膜上的大分子有多种基团和残基暴露在细胞表面上,其中有些起着“天线”和“受体”等功能。人们用生化和细胞电泳等方法测定它们在细胞表面上的数量及其变化,以探讨它们的功能。近年来也开始用电镜等方法观察它们在细胞表面上的分布。由于受体的这些基团和残基太小,用电镜也难以直接看到。故需采用“搭桥”的方式:选择适当的能与细胞     

自旋标记分析法研究——具抗癌活性鬼桕毒自旋标记衍生物的合成和顺磁共振测定

自旋标记分析法(SLA)作为分析药物在体内代谢和动力学过程的手段具有突出优点:灵敏度高,ESR检出限度一般可达10~(-11)M;特征性强,具有与待测组份有相同ESR讯号以致可能引起干扰的共存物质很少。这两项特点与放射性标记分析法(RLA)相似。但SLA比RLA操作较安全而简便;尤其重要的是,SLA能给出更多的关于药物与生物大分子间作用的有价值的信息。所以看来SLA可能成为研究分子药理学的极有希望的手段之一。当然,在这     

金属硫蛋白对大鼠心肌细胞羟自由基损伤保护作用的自旋标记研究

心肌缺血后再灌注损伤是当前医学生物学界的一大课题,其发生机制并不清楚。但许多实验揭示,这类损伤与组织中生成的氧自由基密切相关。金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸残基和金属离子的非酶蛋白,遍存于生物体中。许多应激因素均可诱发MT合成,提示该蛋白参与机体防御功能。Thonally等曾发现MT具有清除羟自由基功能。本工作以成年大鼠心肌细胞为对象,用电子自旋共振(ESR)自旋标记方法,研究羟自由基发生系统产生的羟自由基对心肌细胞膜脂、膜蛋白的损伤及MT抗羟自由基、保护心肌细胞膜的功能。     

抗癌药物几种新的鬼桕毒自旋标记衍生物的研究

近年来的研究表明,给某些已知抗癌药物分子中引入稳定氮氧自由基后,所得自旋标记衍生物的抗癌活性保持甚至有所提高,而毒性显著降低,同时还可用ESR波谱研究药物动力学。鬼桕毒及其衍生物具有抗癌活性,其中的一些(如SP-1.VP-16和VM-26等)已成为临床上有效的抗癌药物。在前文中我们报道了三个SP-1的自旋标记类似物GP-1、     

小鼠正常肝和H_(22a)腹水型肝癌细胞细胞核酪氨酸蛋白激酶的研究

蛋白质的酪氨酸磷酸化与脱磷酸化对细胞的重要调控作用已被确认。然而,迄今为止对酪氨酸蛋白激酶(TPK)的研究还仅集中在细胞的质膜与胞浆区域,对细胞核TPK的系统研究还未见报道。本实验以小鼠正常肝和H_(22a)腹水型肝癌细胞为材料,从中分离得到     

用自旋标记ESR波谱研究光照血卟啉同脂质体膜的相互作用

激光照血卟啉可以用于诊断和治疗肿瘤,将血卟啉注入体内之后,它可以较快地集中到肿瘤组织,在肿瘤中有较高的浓度和较长的滞留时间,当用一定波长的光照射时,它发射出一定颜色的荧光,因而可以诊断肿瘤的范围和大小;当用一定波长的激光照射含血卟啉的肿瘤时,它可以提高激光对肿瘤的杀伤力,因而它     

用抗坏血酸还原自旋标记动力学研究——抗癌药物对脂质体膜通透性的影响

我们曾用脂肪酸自旋标记化合物I(10,3)研究过抗癌药物硫杂脯氨酸(THIPRO),阿糖胞苷(CYTO)、放线菌素D(ACTI)和5-氟-2′-脱氧尿嘧啶(5-F-U)对中国地鼠肺正常细胞V_(79)和癌变细胞V_(79)-B_1膜脂流动性的影响,发现这几种药物都使细胞膜脂有序度变大,流动性变小,其中以硫杂脯氨酸对细胞膜表层作用最明显。为了弄清这几种抗癌药物对膜的作用机理,我们采用一种卵磷脂人工膜体系,用抗坏血酸(V_c)还原自旋标记动力学探讨了这几种抗癌药物对膜的通透性的影响,并且观察了加入白蛋白对上述影响的作用。     

马来酰亚胺氮氧自由基标记细胞膜和活细胞的电子自旋共振波谱的研究

近年来由于自旋标记技术的引入,大大地扩大了电子自旋共振(ESR)技术在生物物理学方面的应用。 自旋标记方法就是把一个理化特性已十分清楚的顺磁体,例如稳定的有机氮氧自由基嵌到或接到生物大分子上去,通过有关ESR参数的变化可以探测生物大分子的空间构象,小分子与生物大分子体系相互作用等,还可以研究活细胞中的分子结构的变化。     

气功信息治疗仪对艾氏腹水癌小鼠免疫功能影响的动态研究

现代科学研究表明,气功师从经络穴位发放的“外气”包括受调制的红外辐射、静电荷富集、磁信息及某种微粒流。国内用模拟气功“外气”制成的气功信息治疗仪(简称气功仪)虽在临床应用不长,但它的作用正引起医学界广泛的兴趣。文献报道,艾氏腹水癌小鼠可导致小鼠的免疫抑制现象。本实验通过用气功仪治疗     

含脲β-乳球蛋白A冷、热变性的DSC法研究

在蛋白质溶液热力学研究领域,有两种温度变化诱发的变性。一种是最常见的温度增加诱发的热变性,它的进行伴有热量吸收和焓、熵增加。另一种是30多年前由Brandts用间接数据长程外推所预言的冷变性,也就是说,随着温度降低,蛋白质分子从天然态的紧密有序结构诱变成无序结构。冷变性的进行伴有热量放出和焓、熵减少。变成无序结构将增加混乱度,但熵反而减少。这一切使得冷变性现象似乎不可理解。这个热力学上的佯谬引起学术界的极大兴趣。和NMR,CD,UV等波谱法不同,量热法可直接地、不依赖模型地测定变性焓。因     

北京鸭红细胞膜β-肾上腺素能受体的纯化及其与Gs和AC在脂质体上的重建

儿茶酚胺类物质如肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素等通过与细胞膜上特异的肾上腺素能受体的结合,调节机体的一系列生理反应.肾上腺素受体可分为α和β两型,β-肾上腺素能受体(β-Adrenergic receptor,β-AR)与配基结合后,通过定位于细胞膜内侧的激活型G-蛋白(Stimulatory GTP-binding Protein,Gs)的偶联,激活腺苷酸环化酶(Adenylate cyclase,AC),促进细胞内第二信使cAMP的形成,从而调节细胞的多种功能如物质代谢、离子交换、突触传递、基因转录、蛋白质生物合成和细胞的分裂、分化等.迄今,β-AR的纯化已在火鸡和蛙红细胞、仓鼠肺等组织中获得成功.本文用亲和层析法从北京鸭红细胞中纯化到β-AR     

表达血管内皮生长因子受体2胞外全长片段的重组鼠沙门氏菌对小鼠肿瘤的预防作用

研究目的基因在减毒鼠伤寒沙门菌中的稳定表达及以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的口服基因疫苗体内代谢情况, 并探讨重组疫苗菌防治小鼠肿瘤的可行性. 将真核表达载体pcDNA3.1+/VEGFR2_(n1-7)导入鼠减毒伤寒沙门氏菌SL3261中构建口服重组疫苗菌疫苗SL3261-pcDNA3.1+/VEGFR2_(n1-7). 通过PCR扩增检测真核表达载体中真核启动子CMV; 通过透射电子显微镜下检测重组疫苗菌形态和鞭毛结构, 观察连续传代后重组疫苗菌内目的基因能够稳定表达且不影响重组疫苗菌的生长特性. 重组疫苗菌经由灌胃对小鼠进行基因免疫后, 透射电子显微镜下在小鼠的肝、脾、小肠、大肠组织中可检测到减毒沙门氏菌的分布. 2周后用CT-26小鼠结肠腺癌细胞进行攻击, 疫苗组小鼠肿瘤生长明显受抑制, 且生存期远远超过对照组小鼠(P<0.05), 免疫组化显示免疫组小鼠肿瘤组织内CD4⁺及CD8⁺ T细胞浸润. 肿瘤组织超微结构显示疫苗组小鼠肿瘤细胞分化较两对照组为好. 本研究证实外源性目的基因能够在鼠减毒沙门氏菌中长期稳定表达, 且不影响沙门氏菌的生长特性; 并且该重组疫苗菌可将具有治疗性目的基因带入机体并产生抗瘤效应而本身对机体无明显的毒性效应, 为减毒沙门氏菌作为口服基因疫苗的载体及其在体内的分布代谢提供了理论依据, 为肿瘤的预防和治疗提供一条简便、安全、有效的途径.     

黄酮类化合物与雌激素受体作用的三维定量构效关系

黄酮类化合物是一种普遍存在于食物和植物中的内分泌干扰物. 选取20个典型的黄酮类化合物, 采用基于分子对接(docking)的比较分子场分析法(CoMFA)和比较分子相似性指数(CoMSIA)方法, 研究它们与雌激素受体(ER?)的相互作用, 建立了这些黄酮类化合物和雌激素受体之间的三维定量构效关系(QSAR)模型, 得到CoMFA模型的最佳交互验证相关系数Q²_LOO为0.845, 非交互验证相关系数R²为0.988, 相应的CoMSIA模型的交互验证相关系数Q²_LOO为0.670, 非交互验证相关系数R²为0.990, 说明模型具有很强的稳定性和预测能力. 此外, 分子对接结果揭示了受体腔中的关键残基及其与黄酮类化合物作用的具体方式.     

21世纪的癌症与肝癌研究的启迪

我国是发展中国家,但疾病谱却很接近发达国家,特别是城市,癌症与心脑血管疾病已成为死亡的首要原因。因此,癌症的防治与研究在我国迈入21世纪之际,有十分重要的意义。 一、21世纪的癌症 未来全球癌症趋势 1985年全球有760万新病人,500万人死于癌症,其中发达国家与发展中国家各占50％;预期2000年将有1030万新病人,其中有710万人死于癌症;至2010年的病例数——欧洲将增加27％,北美增加44％,拉美增加101％,非洲增加116％;发展中国家     

用自旋捕捉法对没食子酸丙酯在水溶液中抗DNA辐射损伤作用的研究

在放射生物学中,关于DNA辐射损伤以及化学物质对这种损伤的防护作用机制的研究,历来是引人注目的课题。自从1959年有三位作者首次用ESR方法观察到γ射线或电子脉冲辐照的固态DNA中的自由基以来,至今绝大多数关于DNA辐射损伤及其化学防护作用的ESR研究,都是用固态或冷冻水溶液状态的样品进行的。这是因为所产生的自由基在