雏番鸭细小病毒人工感染雏鸡体内带毒时间的测定

应用雏番鸭细小病毒(Muscovy Ducklling Parvovirus.MPV)南海里水株番鸭胚传代病毒人工感染7日龄石歧杂雏鸡,每只用本病毒原液经颈部皮下、口服及滴鼻共接种1.5ml/只.接种病毒的雏鸡隔离饲养,注意观察有无异常症状,并分别于接种后24小时、72小时、7天、14天、28天各随机迫杀5只雏鸡,每次迫杀鸡只收集心、肝、脾、肾、脑无菌处理成1:10悬浊液,反复冻融5～6次,3000rpm15分钟,离心取上清液速冻保存.所获无菌上清液分别在11天龄健康番鸭胚连传3代.每个样品重复1次.收集传代胚液作病毒鉴定.结果应用MPV人工感染雏鸡,不见任阿异常症状.于接种后24小时、72小时、7天追杀者可重复分离到本病毒,人工感染14天后,不能复分离病毒.复分离病毒经中和试验,琼脂扩散试验和电镜观察可确认为MPV.试验结果表明,雏鸡属于本病的非易感动物,但人工大剂量接种MPV,体内带毒时间最少可持续7天.     

雏番鸭细小病毒的理化特性测定

对首次从广东分离的雏番鸭传染性“三周病”病毒南海里水株MPLI进行理化特性的测定.试验表明本病毒株能耐热、酸、氯仿、乙醚,对紫外线敏感,将本病毒的番鸭胚液经差速离心浓缩,以Sepharose 4B柱层析纯化,用电镜观察,病毒是晶格排列,有实心和空心两种粒子,直径为20～24nm,无囊膜.经SDS—PAGE测定,病毒含有4种结构蛋白,即Vp1(85kd),Vp2(72kd),Vp3(56kd),Vp4(39kd),其中Vp3 为主要结构蛋白.病毒核酸经提取和酶切分析,证明为DNA,分子量约5.1kb.综合前期对本病毒进行的一系列实验室诊断和本次的理化特性测定结果,确认MPLI毒株为雏番鸭细小病毒.     

犬细小病毒单克隆抗体在治疗上的应用研究

本试验采用犬细小病毒单克隆抗体（ＣａｎｉｎｅＰａｒｖｏｖｉｒｕｓＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙ，ＣＰＶＭｃＡｂ）对２８７例患细小病毒性肠炎的病犬，经股内侧肌肉注射进行治疗，取得令人满意的结果。１．在收治的２８７例病犬中，治愈２７９例，治愈率高达９７．２１％，尤其是小于３月龄的幼犬，治愈率高达９７．９２％，显著高于其他治疗方法的治疗效果。２．在收冶的２８７例病犬中，６月龄以下幼犬占９３．７３％。冬季发病犬占９２．６８％，说明本病主要发生于６月龄以下幼犬，冬季发病较多，其次为初春或深秋，夏季发病较少。３．在临床治疗中发现，发病一天的病犬仅注射ＣＰＶＭｃＡｂ，而不采取其他对症措施，病犬即可在２天内完全康复。发病３天以内的病犬２４１只，在注射ＣＰＶＭ＿－ｃＡｂ同时，结合对症措施，治愈２４Ｏ只，仅死亡１只。随病程延长，治愈率下降。另外，８８．５３％的治愈犬在注射ＣＰＶＭｃＡｂ４天内完全康复，说明采用ＣＰＶＭｃＡｂ治疗还可缩短病程。４，注射ＣＰＶＭｃＡｂ后７ｈ以内死亡的病犬，主要是由于发病后期，全身性衰竭、肠道广泛性出血、坏死和严重脱水，注射的ＣＰＶＭｃＡｂ未能起作用。３天后死亡的病犬，可能是由于ＣＰＶＭｃＡｂ虽     

鸭疫里氏杆菌疫苗在雏鸭体内诱导细胞免疫的动态研究

本试验选用1日龄仙湖鸭48只,随机均分为6组,其中1～5组为试验组,第6组为对照组.各试验组按不同的免疫次数、首免龄期、接种剂量,用鸭疫里氏杆菌油乳剂灭活疫苗分别作免疫接种,对照组不作接种.各试验组（包括对照组）在免疫前及免疫后每周采血一次,涂片,用酸性α-醋酸荼酯酶（ANAE）反应方法进行染色,用油镜检测计算T、B淋巴细胞百分比值.研究结果表明：无论是2日龄、7日龄或14日龄首免,首次免疫1周后,雏鸭体内都能产生相应的免疫应答,但2日龄免疫应答能力弱,7日龄较强,14日龄最强.两次免疫的细胞免疫效果比一次免疫效果明显.     

猪细小病毒血清学检测方法的建立

目的建立猪细小病毒血清学检测方法。方法用抗猪细小病毒的猪源性血清,通过IFA和IEA两种方法,首先将阳性血清吸附PK-15细胞抗原,以排除非特异反应,通过对阳性血清及3种二抗(其中IFA以FITC标记的抗猪IgG抗体,IEA分别以HRP标记的抗猪IgG抗体和SPA-HRP作为二抗)进行浓度梯度滴定,确定最佳工作浓度,并比较三种反应体系的敏感性。结果IFA最高能检测出PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型中1个TCID50,而其它两种反应体系均只能检测100个TCID50。结论间接免疫荧光检测方法比其它两种方法敏感性更高。     

不同日龄呼肠孤病毒番鸭脾脏病理变化的动态观察

目的检测不同日龄呼肠孤病毒番鸭脾脏的动态病理变化。方法常规病理组织染色方法,对感染呼肠孤病毒3、5、7日龄的番鸭进行脾脏病理学观察,同时应用免疫组织化学方法对不同日龄中脾脏病变严重的进行Fas凋亡基因初步检测。结果感染呼肠孤病毒的不同日龄番鸭脾脏与正常组相比均有不同程度的变性、坏死,7日龄更重且Fas基因有表达与正常组相比表达数量增多。结论随着呼肠孤病毒感染番鸭日龄的增长,脾脏淋巴细胞坏死数量越多,7日龄脾脏Fas基因表达与正常组比数量增多,显示呼肠孤病毒对番鸭细胞免疫的破坏。     

水貂肠炎病毒疫苗免疫效力指标及动物模型研究

按正交及配对实验设计，将水貂病毒性肠炎（ＭＶＥ）细胞培养灭活矿油苗和铝胶苗接种于４８只水貂、１２只豚鼠、１２只家兔，检测三种动物免疫后６￣４０天的血清ＨＩ抗体水平和水貂免疫后１１￣３１天的ＳＮＩ，结果表明：（１）该两苗对水貂的体液免疫效力相同；（２）豚鼠、家兔、水貂接种疫苗后６￣４０天的ＨＩ抗体水平差异不显著，故豚鼠或家兔可作为水貂免后产生抗体水平的模型；（３）水貂免疫后１１￣３１天的ＨＩ抗体水平     

细小病毒抑瘤活性研究的历史与现状

细小病毒（PV）（包括自主性的及依存性的）有抗肿瘤活性。本文在介绍PV绵结构及理化性质、病毒复制后，阐述了PV与肿瘤的关系，即其对自发肿瘤及诱发肿瘤的抑制作用，特别虽本实验室多年来利用离体细胞培养系统广泛地测试了PVH－1及MVM抑制转化细胞及癌细胞活性得到的结果，对33株细胞及人癌（肝、肾）与癌周组织原代培养的细胞测得的抑瘤效应亦列于表内。PV抑瘤机理仍在分子水平上研讨之中，文中强调了非结构蛋白NS／rep的细胞毒作用，它可部分地阐明了PV的抗肿瘤机制。     

大蒜素对蛋公雏免疫指标的影响

探讨了不同添加剂量的大蒜素对蛋公雏免疫指标的影响。将120只14日龄蛋公雏随机分为4组,第Ⅰ组为对照组,Ⅱ~Ⅳ组为试验组,分别在基础日粮中添加0,50,150,250 mg.kg-1大蒜素,试验期35 d,测定了在35,42,49日龄时蛋公雏血清中白蛋白和总蛋白含量,主要免疫器官的重量及器官指数以及新城疫抗体水平。结果显示:在42,49日龄时,150 mg.kg-1和250 mg.kg-1添加组血清白蛋白、总蛋白质量浓度与对照组相比差异极显著(P<0.01);150 mg.kg-1添加组的胸腺重量及器官指数在42,49日龄时较对照组明显增加(P<0.05)。饲料中添加的大蒜素对蛋公雏的免疫指标均有显著的影响。     

两种细小病毒MVM宿主细胞的比较研究

ＭＶＭ属自主性细小病毒，对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用，本文对ＮＢＫ细胞的软琼脂克隆形成率和以体进行了分析，确认ＮＢＫ细胞为转化细胞，且对ＭＶＭ敏感。在此基础上，比较了两种细小病毒ＭＶＭ宿主细胞ＮＢＫ和Ａ９的细胞存活率、单位体积培养液中的细胞产量和病毒产量，认为Ａ９细胞更适合于作为细小病毒ＭＶＭ的宿主细胞进行病毒的制备和生产。     

中草药"禽促免"液对雏鸡的免疫作用

研究了在母源抗体水平相同的条件下饮服“禽促免”液Ａ方和Ｂ方，然后分别６次颈静脉采血，测定其ＨＩ抗体水平。结果表明：在检测期内的抗体水平，Ａ方试验组与对照组比较，差异均显著，Ｂ广度一与对照组比较，并异不显著。抗体峰值期，Ａ主试验组，显著高于Ｂ方试验组，在不同时期的检测，均可说明中药方剂“禽促免”液具有提高抗体滴度，延长抗体持续时间的作用。     

小翅雏蝗种群动态的研究

在甘肃省夏河县对小翅雏蝗的种群结构、数量变动、空间格局及动态进行了研究 .结果表明 ,该虫每年 6月上、中旬蝗蝻开始孵化 ,6月下旬达到高峰 ;7月是 1～ 4龄蝗蝻混合发生时期 ;8月为蝗蝻与成虫的过渡时期 ,此期蝗蝻占总量的 5 4 .6 1% ,成虫占 4 5 .39% ;9月中旬后全部羽化为成虫 .小翅雏蝗在草地是以个体群为基本分布成分 ,个体群间的分布属聚集分布 ,其聚集强度随种群密度的升高而增加 .聚集表现主要是由草地的环境因素作用所致     

1 型鸭肝炎病毒强毒株在雏鸭体内分布情况研究

摘要: 目的 利用建立的 Taq 荧光定量 ＲT-PCＲ 检测方法研究鸭肝炎病毒( DHV-1) 强毒株在感染雏鸭体内早期的动态分布规律。方法 本研究采用鸭肝炎病毒强毒株人工感染 3 日龄雏鸭,利用已建立的 Taq 荧光定量 ＲT-PCＲ方法,对接种 24 h 内 DHV-1 强毒株感染雏鸭的组织脏器进行了定量检测。结果 接种后 4 h 即可在雏鸭心、肝、脑、肺、胰腺、回肠、盲肠、直肠、法氏囊和脾脏组织中检测到一定水平的病毒 ＲNA,随着病程发展,ＲNA 拷贝数持续升高,接种 24 h 后,肝脏中的病毒 ＲNA 拷贝数为最高,达到 108. 81 copies/g,心、肺、肾、脾次之,约 107copies /g。结论DHV-1 强毒在雏鸭的早期感染雏鸭的实质器官、免疫器官和消化系统等均具有广泛的嗜性。     

猫细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用

摘要: 目的 建立猫细小病毒 PCR 检测方法,应用于猫临床样本中 FPV 的快速检测。方法 根据已发表的 FPV VP2 基因序列设计合成引物,并以此建立 FPV 的 PCR 检测方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。 用建立的方法对 33 份猫临床样品进行检测。结果 建立的 FPV PCR 检测方法与猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)、猫冠 状病毒(FeCV)、猫合胞体病毒(FeSFV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为 5lgTCID50 / mL,相应的 DNA 模板浓度为 4. 9 × 102 拷贝/μL;FPV DNA 在 － 30℃冰箱放置 12 个月仍可检测出目的条带。应用 该方法从 33 份猫临床样本中检测出 21 份 FPV 核酸阳性。结论 建立的 FPV PCR 检测方法具有特异、敏感及稳定 的特点,适合于临床 FPV 的感染检测。     

鸭肝宁防治雏鸭病毒性肝炎的试验研究

中药口服制剂“鸭肝宁”防治雏鸭病毒性肝炎的结果表明：在实验室攻毒试验只保护率达84％,在临床试用中保护率达85％,仅次于鸭传染性肝炎卵黄抗体的防治水平,具有临床应用价值。     

犬细小病毒(CPV-2)的分子生物学特性与进化

对犬细小病毒的分子生物学特点和进化规律进行了综述,阐述了犬细小病毒分子生物学特点和进化两者之间的关系,对我国在犬细小病毒方面的未来研究工作进行了展望。     

CDV,CPV,CAV三联DNA疫苗的实验免疫研究

 犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)是引起犬传染病的主要病原体,严重危害犬的健康,基因疫苗具有安全和克服幼犬母源抗体对主动免疫干扰的优点.根据CDV的H基因、CPV的VP1基因、犬2型腺病毒(CAV-2)F基因的核苷酸序列,用PCR或RT-PCR方法扩增克隆目的基因,分别构建了pIRCDV-H,pIRESVP1和pcCAV-F 3个真核表达质粒并进行了序列验证,用3种免疫质粒经纯化后混合对15只犬进行免疫,所有接种混合基因疫苗的犬,2次免疫后即可产生较高的抗体水平,攻毒后大部分犬能抵抗3种强毒的攻击,对照犬发病严重,证明所构建的核酸疫苗在一定程度上可抵抗强毒的攻击.     

犬细小病毒新抗原变异株VP2基因的克隆与序列分析

目的鉴定犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)新抗原变异株的病毒型,为研究CPV变异及制备CPV特异性诊断和治疗试剂奠定基础。方法从病毒细胞培养物中提取基因组DNA,设计合成针对VP2基因的1对特异引物,PCR扩增出VP2基因片段,克隆后测序,应用DNAstar进行序列分析。结果得到CPV-VP-2基因序列15份,其中CPV-2a 10份,CPV-2b 5份;FPV-VP-2基因1份。结论各序列与已发表的标准序列比较,同源性在98%以上,未形成明显分支。     

醛化猪红细胞在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用

本文试验摸索了猪红细胞(PRBC)用戊二醛醛化的条件,并将新鲜PRBC与醛化PRBC在犬细小病毒HA和HI试验中作了对比。结果发现:用5％PRBC与5％戊二醛,按4:1的比例,在16—18℃作用1.5h或用5％PRBC与2％戊二醛,按5:1的比例,在4℃作用2.5h后的PRBC对犬细小病毒均保持有一定的血疑敏感性。在4℃冰箱中保存6个月,仍可用于犬细小病毒HA和HI试验。因此,可减少试验时的采血次数。