植物胚拯救技术的影响因素及其应用

胚拯救技术在拯救败育胚、阻止胚早期退化和培育新三倍体及多倍体等种质资源方面具有重要作用。植物胚拯救方法主要有3种:胚的活体转移、胚的活体培养及胚的离体培养。在植物胚的离体培养过程中,依据需拯救的植物胚胎发育程度,建立了离体子房培养、胚珠培养和幼胚培养3种培养方式。大量研究结果表明,胚龄、培养基种类及相态、培养条件、渗透压、生长调节剂、外源添加剂和基因型等均会影响植物胚拯救的成败,因而胚拯救技术作为传统育种方法的辅助手段,在突破拯救的胚龄极限、提高植株再生率等方面还有进一步发展的空间。此外,结合胚拯救技术和分子生物学的研究手段,有望通过遗传转化稳定不同特性的新种质,创新植物种质资源。     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅱ)——接种时间及处理方法对胚培养的影响

选用花后35￣60d的巨峰、里扎马特和无核白葡萄,取其幼胚接种于不同激素水平M S培养基上,进行胚培养,以研究接种时间及处理方法对胚培养的影响.结果表明对花后60d的里扎玛特和巨峰的幼胚进行胚培养,其发芽率和成苗率显著高于层积处理后催芽播种的种子的发芽率与出苗率.低温和横切处理能有效地促进葡萄幼胚的萌发.花后60d的巨峰和里扎马特的发育率和成苗率最高;花后60d的无核白的幼胚发育率最高,花后50d的幼胚成苗率最高.     

秋葵幼胚培养试验初步研究

以秋葵幼胚为试材,筛选较适合幼胚萌发和成苗的培养基,并研究胚龄分别为开花后4 d、6 d、8 d、10 d的幼胚萌发率和成苗率.结果表明,秋葵幼胚萌发和成苗的适宜培养基分别为Qz(Ms+0.1 mg/mL BA+1.0 mg/mL GA3)和QG(Ms+0.5mg/mL GA3);开花后8 d的幼胚萌发率和成苗率最高.由此建立秋葵幼胚培养的方案.     

根癌农杆菌介导的水稻遗传转化

以粳稻、空育131、垦鉴稻7号成熟胚、幼胚诱导的愈伤组织为材料,将反义蜡质基因导入受体材料.经两次抗性筛选后,转入分化培养基中分化培养后获得转基因小苗.成熟胚和幼胚的转化效果比较,幼胚优于成熟胚.将转化植株进行PCR鉴定,证明外源目的基因已经整合到植株中.     

玉米幼胚的组织培养及其植株再生的研究

以成单１４,１５,１８三种基因型玉米为材料,对幼胚愈伤组织的诱导和继代培养,植株再生,再生苗的培养和移栽等方面进行了系统的研究,三种基因型玉米幼胚经诱导均可产生愈伤组织,但只有成单１５,１８两种基因型玉米幼胚产生的愈伤组织可继代培养下去。     

稻瘟病菌粗毒素对水稻幼胚愈伤组织的影响及抗性筛选

利用目前稻瘟病不同的优势小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻幼胚进行处理,稻瘟病菌粗毒素提取液对水稻幼胚的愈伤的诱导和分化的有明显的抑制效应。随着毒素浓度的增加,水稻胚性愈伤获得率和分化能力显著降低。在诱导培养基中加入毒素对幼胚的筛选取效果较好,可以获得较多的胚性愈伤和较多的分化苗。培养基中毒素的浓度处理以30%效果好。水稻幼胚的抗性筛选过程中胚性愈伤获得和分化苗数较高,是很好的培养材料;而且不同的水稻品种产生的耐性不同,并可以同时筛选出抗稻瘟病的突变体。     

桂花幼胚离体培养形成丛生苗

分别以不同品种桂花的幼胚为外植体进行组织培养,研究了不同激素条件对离体培养的桂花幼胚存活率、出芽率、幼苗平均株高以及平均丛生芽数等的影响.实验结果表明:籽银桂幼胚在1/2 MS+0.5mg·L-1 TDZ+0.1mg·L-1 NAA培养基上培养,幼胚存活率为100%、萌芽率为50%、幼苗平均株高度为3.9cm,丛生芽数达3个;莲子丹桂幼胚存活率高达100%,其幼苗平均高度为2.2cm;"庐州黄"籽银桂平均丛生芽数多达3个.此研究为桂花的大量离体繁殖提供了新的实验体系.     

稻瘟病菌粗毒素对水稻幼胚愈伤组织的影响及抗性筛选

利用目前稻瘟病不同的优势小种菌株的液体培养提取的粗毒素对水稻幼胚进行处理,稻瘟病菌粗毒素提取液对水稻幼胚的愈伤的诱导和分化的有明显的抑制效应.随着毒素浓度的增加,水稻胚性愈伤获得率和分化能力显著降低.在诱导培养基中加入毒素对幼胚的筛选取效果较好,可以获得较多的胚性愈伤和较多的分化苗.培养基中毒素的浓度处理以30%效果好.水稻幼胚的抗性筛选过程中胚性愈伤获得和分化苗数较高,是很好的培养材料;而且不同的水稻品种产生的耐性不同,并可以同时筛选出抗稻瘟病的突变体.     

玉米幼胚培养的研究

以20个基因型的玉米自交系幼胚为材料，通过培养均获得愈伤组织。研究结果表明，基因型、培养基成分、胚的大小、光等均影响培养效果。     

小麦离体培养研究进展及其器官建成特性

在小麦组织培养中,几乎各种器官、组织均曾被用作外植体进行离体培养,比如小麦根、幼叶、中胚轴、种子、顶端分生组织、花药、原生质体、幼穗、成熟胚以及幼胚等.本文对及其离体培养下营养器官和花器官建成与发育研究进行了综述,以期为小麦的组织发生学、胚胎学、细胞工程和遗传操作等研究与应用提供参考.     

多小穗小麦幼胚培养及其无性系变异

三种类型多小穗小麦经幼胚离体培养后，其无性系Ｒ２代的株高、穗长、旗叶长和宽、单株穗数等重要农艺性状发生了不同程度的变异。其中分枝穗类型的９２Ｄ０８６的Ｒ２代除上述各性状发生变异外，穗型、芒、千粒重等也发生了变异。     

银杏组织培养研究进展

为了全面了解银杏组织培养现状，找出银杏组织培养的规律，概述了利用银杏的器官培养、愈伤组织培养、细胞悬浮培养、花粉培养、胚及其发生的培养、毛状根培养等组织培养手段进行银杏种质保存及生理学研究的现状。并指出，弄清次生代谢物合成途径及其关键步骤的关键酶，利用原生质体、雌配子体细胞和花粉获得体细胞胚，建立起一个将胚长成植株的体系，是今后努力的方向。     

消毒剂对小麦组织培养的影响

通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.     

鹅掌楸属树种的胚胎学研究进展

目前,鹅掌楸属树种的胚胎学研究可以划分为3 个阶段,即描述胚胎学阶段、比较胚胎学阶段以及实验胚胎学阶段,研究内容涉及了雌、雄配子体的构建,传粉与受精作用的完成,胚与胚乳的发育及种子的形成,性细胞的分离以及未成熟胚的培养等方面。笔者概述了鹅掌楸属树种的一般胚胎学过程与杂交胚胎学的研究结果,以及实验胚胎学的研究进展,并针对鹅掌楸属树种生殖细胞工程和体细胞胚胎发生系统的建立等研究领域进行了展望性的讨论。     

丰抗8号小麦悬浮细胞系的建立及遗传转化的初步研究

以丰抗８号小麦的幼胚为起始材料,建立了胚性悬浮细胞系．幼胚的取材时期、培养基的成份和选择继代的方法有明显的影响．取开花后１２～１４ｄ的幼胚、增加无机盐离子和还原态氮的用量、挑选鲜黄致密及松脆类型的愈伤组织能显著地抑制空瘪型、长条型、弯弓形等不良细胞类型出现的频率,促进细胞向圆球型方向分裂生长．通过３个月的选择继代培养,获得了理想的松散状胚性愈伤组织;再经过ＭＳ２Ｌ和ＡＡ液体培养,约２个月后,建立起分散性好、颗粒小、增殖快的小麦悬浮细胞系．以新建立的胚性悬浮系为材料,进行基因枪转化,获得了ＧＵＳ报告基因的短暂表达,平均短暂表达频率为１７．１％．就如何筛选转基因小麦进行了讨论．     

虾蟹亲体生殖生态学的研究

凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹是我国海水养殖的重要种类．本文概述了作者近年来有关凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹亲体生殖生态学方面的部分研究结果．     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的影响因素

随着哺乳动物体外受精、细胞核移植和外源基因导入等高新技术的不断深入，人们对成熟卵母细胞以及哺乳动物胚胎需求量日益增加，卵巢内丰富的卵泡资源是胚胎工程迅速发展的基础。通过卵巢卵母细胞体外成熟获取大量成熟卵母细胞，然后进行体外受精、体外生产胚胎愈来愈引起人们的注视。对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了综述。