蛹虫草中活性成分虫草素的研究进展

虫草素具有多重的药理功效,在现代医学中发挥着越来越重要的作用,本研究以蛹虫草为例,详细介绍了提高其虫草素含量的方法 ,以适应强大的市场需求.     

野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基作用的对比研究

采用分光光度法对野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基的作用进行对比 .结果表明培植蛹虫草子座对·OH自由基的清除能力丝毫不弱于野生蛹虫草子座 ,而培植蛹虫草发酵菌丝体对·OH自由基的清除能力要高于野生蛹虫草 .     

蛹虫草的研究Ⅳ．蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草．蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用     

蛹虫草功效成分研究进展

蛹虫草除了含有蛋白质、脂类、糖类、维生素、微量元素等生命基本元素外,还含有虫草酸、虫草素、虫草多糖、超氧化物歧化酶等多种生物活性物质.综述了近些年来对蛹虫草功效成分的相关研究进展.     

HPLC法测定人工蛹虫草子实体中虫草素

为测定人工蛹虫草子实体及培养基中的虫草素，采用高效液相色谱法(HPLC)，以十八烷基硅烷键合相硅胶为固定相；磷酸盐缓冲溶液(pH6．5)-甲醇(85：15)为流动相；检测波长260nm；其流速为lmL／min。结果是人工蛹虫草子实体中虫革素含量在1．1l％～1．44％之间，平均值为1．29％，RSD为9．6％。天然冬虫夏草中仅测得痕量虫草素。结果表明：不同的人工蛹虫草样品中虫草素含量有一定差异，且高于天然冬虫夏草。     

蛹虫草的研究：IV.蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草。蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用。     

硒对蛹虫草生长发育的影响

以蛹虫草作为富集硒的载体，用不同浓度的含硒培养基分别对蛹虫草的子实体进行培养，以研究蛹虫草的耐硒能力．结果表明：采用固体培养基培养蛹虫草子实体，在含硒0．5—20mg／kg的固体培养基上，菌丝均能生长；在含硒0．5—5．0mg／kg范围内，子实体生长速度较其他浓度明显提高；在含硒10．0—20．0mg／kg范围内，子实体生长受到抑制；在含硒30mg／kg以上的培养基上，菌丝不能生长。     

蛹虫草虫草素和虫草多糖综合提取工艺的研究

蛹虫草（Cordyceps militaris）在我国本草文献中已有记载。近年来的研究更进一步证实了蛹虫草与冬虫夏草C.sinensis有相同或相似的化学成分和药理作用,是可供开发的新产品,并可以之作为冬虫夏草的替代品。现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值,而且有明显的药用价值。其中尤以虫草素、虫草多糖等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质,对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录 mRNA过程中使mRNA成熟障碍,抑制癌细胞的生长。并有降血糖的作用。虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖,它能促进淋巴细胞转化,提高血清1gG的抗体含量和机体的免疫功能,增强机体自身抗癌抑癌的能力。因此分离纯化虫草素和虫草多糖,对此类抗癌药物的开发具有很大社会价值和意义。本次研究以蛹虫草粉末为原料,研究了蛹虫草中虫草素和虫草多糖的综合提取工艺技术,探讨了采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法,选择虫草素和虫草多糖的最优提取办法。并通过用正交试验方法研究考察了水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素和虫草多糖综合提取效率的影响。建立了从蛹虫草中综合提取虫草素和虫草多糖的最佳工艺。采用正交试验对蛹虫草中虫草素和虫草多糖综合提取工艺进行了研究,为进一步开发利用提供有价值的参考数据,也将会对今后产品开发研究具有重要的意义。     

野生蛹虫草与组培蛹虫草子实体的成分测定与分析

本文利用多种现代分析手段,对抚顺地区野生蛹虫草与组培蛹虫草子实体的主要成分进行了测定与分析,结果表明可以利用组培蛹虫草代替野生蛹虫草,即降低了成本,又能大规模生产,为抚顺地区蛹虫草的开发利用提供了诱人的前景。     

蛹虫草的代料栽培试验研究

通过对以小米，玉米渣代替大米进行蛹虫草栽培试验，同时进行大米加猪血培养基配方的改良试验：结果证明：小米，玉米渣完全可以代替大米栽培蛹虫草；大米加猪血培养基的改良更适宜蛹虫草菌丝的生长，使其产量有所提高.     

蛹虫草液体的深层发酵

以菌丝体质量浓度(干重)和发酵液中甘露醇浓度为指标,研究温度、初始pH值、培养时间等因素对蛹虫草液体培养的影响,得到蛹虫草摇瓶液体培养的最佳温度为25.0℃,初始pH值为6.10,培养时间为5 d;蛹虫草液体发酵最适培养基的组成为:20 g/L蔗糖+5 g/L蛋白胨+1 g/L MgSO4.7H2O。在此基础上进行小型分批式发酵罐实验,研究有利于蛹虫草生长及活性物质生成的pH控制策略。研究结果表明,pH分段控制的液体深层发酵对蛹虫草生长最为有利,菌丝体质量浓度为17.31 g/L,甘露醇质量浓度达43.47 g/L。     

蛹虫草菌丝对高血脂调节作用的研究

探讨蛹虫草菌丝对高血脂小鼠调节血脂的作用,135只KM小鼠随机分为9组(n=15只/组):正常对照组、高脂模型组、阳性对照组、加热和不加热蛹虫草菌丝液组(低0.14 g/kg·bw/d、中0.28 g/kg·bw/d、高0.56 g/kg·bw/d). 除正常对照组灌胃等容积的蒸馏水外,其它组均每天早上灌胃高脂乳剂16.5 mL/kg,晚上灌胃给予不同的受试物(33.0 mL/kg),实验持续21 d. 每7 d称量小鼠体质量1次,实验第0天、7天、14天剪尾取血检测血清胆固醇(TC),实验第21天摘眼球取血后解剖小鼠,检测血清TC、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并计算低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝指数. 结果表明:实验第21天,加热和不加热的蛹虫草菌丝液组和金水宝阳性对照组均显著降低高血脂小鼠血清TC和TG水平(P<0.05),并显著降低小鼠肝指数(P<0.01).     

1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取

冬虫夏草是一种名贵的强壮滋补中药,但由于其严格的寄生性和特殊的生长地理环境,天然虫草资源越来越少,冬虫夏草的开发利用只有走人工培养之路.经研究蛹虫草的培养时间与菌丝体生产量的关系,虫草多糖的提取以及虫草多糖的测定,结果显示培养6d的菌丝产量最高,发酵时间对菌丝生长量的研究有重要意义,它可以控制大规模发酵生产大周期.多糖含量的测定用硫酸-苯酚法.经实验显示2次浸提比1次浸提的得率要高,摇瓶菌丝体的粗多糖得率为25.0%,精多糖得率为10.15%,均比已报道的虫草多糖得率高,这为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据.     

蛹虫草子实体的人工培养研究

通过对蛹虫草子实体的人工培养研究发现：固体营养物以小米和高粱米的混合物是最佳的。人工培养基的最佳碳、氮源为可溶性淀粉和蛋白胨，最佳pH范围是5～6；VB1、2，4-D和无机元素K^ 、Mg^2 、Ca^2 对子实体的生长有促进作用。最佳培养条件是湿度80％。光照6001x(24L：0D)，15℃培养10d后转到25℃下培养．蚕蛹培养子实体的条件是10℃下培养到蚕蛹僵硬后转到25℃下培养，湿度80％．     

RSM优化蛹虫草菌产虫草素液体发酵培养基

文章采用响应曲面法(RSM)对蛹虫草液体发酵培养基成分葡萄糖、酵母粉、KH2PO4和MgSO4进行优化,并采用多元二次回归方程拟合4种因素与虫草素产量之间的函数关系。通过响应面回归分析,确定了培养基中4因素的最佳质量浓度分别为:葡萄糖30.16g/L,酵母粉10.00g/L,KH2PO42.040g/L,MgSO41.460g/L。在该条件下,响应面模型预测的虫草素产量为63.69mg/L,最佳培养基条件下的验证试验结果为64.15mg/L,与模型的预测值基本一致,表明模型可较好地预测虫草素的产量。     

蛹虫草废弃培养残基中虫草素的提取工艺研究

优化并比较了微波辅助和超声波辅助提取蛹虫草培养残基中虫草素的工艺方法.采用L 9(34)正交试验设计,考察了料液比(g:mL)、乙醇含量(%)、微波功率(微波法)或提取温度(超声波法)、提取时间等4个因素对虫草素提取率的影响.结果表明:微波提取以25倍料液比、40%乙醇、240 W下微波提取1.5 min,提取2次为最佳工艺,该条件下浸膏得率为28.33%,虫草素含量为0.378 mg/g;超声波提取在45 kHz功率下,以25倍料液比、40%乙醇、60℃下超声提取30 min,提取2次为最佳工艺,该条件下浸膏得率为38.24%,虫草素含量为0.362 mg/g.比较了超声波提取2次、微波提取2次、微波—超声波联合提取以及超声—微波联合提取等方式对虫草素的提取效率,最终确定微波提取2次为最佳工艺,该工艺适用于蛹虫草培养残基中虫草素的快速高效提取.     

蛹虫草发酵罐培养生产虫草多糖和虫草素条件的研究

采用摇瓶培养法通过单因素试验和正交设计试验初步拟定蛹虫草的发酵罐培养条件.基本上罐条件为初始pH6.5,温度21℃,转速150rpm,培养时间5d.在此基础上分别以菌量、多糖和虫草素为指标,调整通气量和装液量.当以获得菌量和多糖为目的时,通气量为0.9m3/h、装液量70%.若以得到虫草素为目的,通气量调整为0.7m3/h、装液量70%.     

蛹虫草菌丝体液体培养条件研究

研究蛹虫草液体发酵条件,以干菌体得率为指标,通过单因素试验确定适宜的碳源、氮源、培养温度和pH值。结果表明,最适液体培养基为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨5.0 g/L,最适pH=6.0,最适培养温度24℃。     

分子荧光测定蛹虫草中硒的含量

采用分子荧光法测定蛹虫草富硒前后硒的含量，优化了测定条件，研究不同的消解方法对测定的影响，为蛹虫草富硒培养条件的筛选提供了准确快速的测定方法．     

蛹虫草多糖分离纯化及性质的研究

以蛹虫草菌丝体粗多糖为材料进行分离纯化及性质的研究.提取液浓缩用3倍体积乙醇沉淀,等电点Sevag法除蛋白,10%H2O2脱色,得到的粗多糖经DEAE-DE52纤维素柱层析,用0～0.2mol/L的NaCl洗脱,可以得到未完全分离的多糖.将此多糖经Sephadex-G200柱层析,用蒸馏水洗脱.将多糖用Sepharose CL-6B柱层析进行纯度鉴定,经验证是单一多糖.对多糖进行纸层析,证明组分是D-葡萄糖和D-半乳糖.用高效液相色谱法测定多糖分子质量为3.76×104ku.以昆明种小鼠对多糖进行生物活性研究,多糖对小鼠S180肉瘤抑制率达到71.92%.