红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展

综述了近年来红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展, 包括红豆杉细胞培养生产紫杉醇的代谢调节、无机盐、植物生长调节因子、糖分及其它因素对红豆杉细胞生长和紫杉醇生产的影响等.着重介绍了前体饲喂、添加抑制剂和添加诱导子对红豆杉细胞生长及紫杉醇生产的影响.     

红豆杉细胞培养生产紫杉醇粗品制备紫杉醇原料药的研究

通过考察紫杉醇提纯的多种方法,优化结晶析出法和柱层析法的工艺参数,首次将红豆杉细胞培养生产的65%的紫杉醇粗品分离纯化为符合美国药典USP标准的紫杉醇原料药.以红豆杉细胞培养生产的65%的紫杉醇粗品为原料提纯制备紫杉醇原料药的方法,重复性好、工艺合理、操作简单、绿色安全,有望解决紫杉醇原料药的药源供应严重不足的问题.     

云南红豆杉细胞培养和紫杉醇生产

研究了在固体和液体培养条件下云南红豆杉 (Taxusyunnanensis)细胞系TY6生长和紫杉醇积累的动态及培养基中无机氮源形式对其生长的紫杉醇形成的影响 .结果表明 ,在固体和液体培养条件下 ,云南红豆杉细胞的生长和紫杉醇积累动态相似 ,但液体培养时细胞生长周期缩短了 7d,紫杉醇含量降低了 1倍 ;新形成的细胞需要经过一段时间生长后才有较高的紫杉醇合成能力 ;培养基中硝态氮浓度高有利于细胞生长 ,铵态氮浓度高有利于紫杉醇形成 ;在培养第 1 2d时用铵态氮培养基更换硝态氮培养基可使悬浮细胞的紫杉醇产量达到 8.5mg·L- 1 ,比对照高 1 .6倍     

中国红豆杉悬浮细胞培养动力学的研究

考察了中国红豆杉悬浮细胞培养中细胞生长的动态变化，培养基中主要营养成分的消耗，细胞的氧消耗速率，以及次级代谢产物紫杉醇的生产状况。实验结果表明，细胞比生长速率为０．１２９／ｄ，紫杉醇的积累与细胞生长呈部分相关在，培养静止期达到高峰。     

细胞培养生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是红豆杉植物所含有的最为有效的抗癌药物．介绍了对当前国内外利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇的最新研究进展,其中着重介绍了提高紫杉醇含量的各种研究方法和研究技术,同时对细胞培养生产紫杉醇的规模化生产做出展望．     

南方红豆杉细胞培养中紫杉醇代谢调节的研究

对南方红豆杉悬浮培养细胞的生长动力学和紫杉烷类物质积累的动力学进行了探讨．紫杉醇合成途径中由巴卡亭Ⅲ生成紫杉醇的反应是受阻的．加入pH稳定剂MES可以减少巴卡亭Ⅲ向胞外的分泌，提高了紫杉醇总量和在细胞内的积累．     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０＾３ｇ／ｇ。建立了细胞生长动力学模型,结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成。     

连续灌注培养红豆杉细胞生产紫杉醇的研究

利用由一圆形柱和三角瓶组成的生物反应器对红豆杉细胞进行连续灌注培养，结果显示，培养基的pH值，糖和磷的变化幅度较平缓，细胞的生长期长，说明该反应器适于细胞生长，根据该反应器具有培养液提取简便的特点，首次提出诱导子可按照培养基中残糖和残磷的体积质量加入，而且发现高含量紫杉醇仅发生在特定的残糖和残磷体积质量下，结果还显示该反应器用于诱导和萃取结合处理细胞，与搅拌式和气升式反应器相比，得到较高的生物量和紫杉醇产量，这些结果表明该反应器可用于连续灌注培养红豆杉细胞生长紫杉醇。     

BR对红豆杉细胞的紫杉醇含量及PAL的影响

报道了油菜素内酯 (BR)对悬浮培养的中国红豆杉 (Taxuschinensis)细胞生长、紫杉醇合成及苯丙氨酸裂解酶 (PAL)活性的影响 .添加 1.7ng·L- 1 ,17ng·L- 1 和 170ng·L- 1 的BR分别使细胞的紫杉醇质量分数增加了 5 8.7% ,10 3 .9%和 86.9% .并且低浓度下油菜素内酯有轻微促进细胞生长的作用 .在 17ng·L- 1 BR诱导作用下 ,红豆杉细胞PAL在 40h内达到蜂值 ,并显著高于对照     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０－３ｇ／ｇ,建立了细胞生长动力学模型．结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成．     

氯化铜对滇紫草细胞色素形成的影响

滇紫草细胞于Ｍ－９培养液中悬浮培养以形成紫草色素。当Ｍ－９培养液中ＣｕＳＯ４·５Ｈ２０由相同浓度的ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ取代后，色素产量比对照提高了５８．７％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为３０μｍｏｌ／Ｌ。滇紫草细胞的继代培养基Ｂ—５中的ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ取代后，培养所得的细胞接种于Ｍ－９培养液中，色素产量比对照提高了３２．０８％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为０．６μｍｏｌ／Ｌ．ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ对细胞生长无不良影响。Ｍ—９培养液中，铜于色素形成的初期，可快速吸附于细胞上，这一现象为ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ促进紫草色素合成机制的深入研究提供参考。     

草珊瑚细胞悬浮培养之研究

报道了草珊瑚（Ｓａｒｃａｎｄｒａｇｌａｂｒａ）细胞悬浮培养的某些特性。细胞悬浮培养的摇床转速对草珊瑚细胞生长至关重要、培养物在１００ｒ／ｍｉｎ速度下振荡培养几乎难以存活，最佳的摇床转速为４０ｒ／ｍｉｎ（２３．５ｈ／ｄ＋８０ｒ／ｍｉｎ（０．５ｈ／ｄ），其生长可增加５倍左右。细胞悬浮培养的接种量以２．０ｇＦＷ／瓶合适，其培养物的月产率１３．２２ｇＦＷ／瓶（或１８．７３ｇＤＷ／１）。细胞生长的时间进程是，接种０－５ｄ，细胞增殖十分缓慢，１０－２０ｄ迅速生长，２０ｄ后基本停止生长。培养基的ｐＨ迅速下降时是细胞增殖缓慢的时期，当培养基ｐＨ值开始升高时，细胞增殖也显著加快。黄酮苷类物质的合成在０－２０ｄ迅速增加，２０ｄ左右达到高峰。     

悬浮培养红豆杉细胞团区域化与营养生理的关系

通过对悬浮培养的南方红豆杉（Ｔaxus chinensis var.Mairei)细胞团切片及胞内淀粉颗粒染色等形态学上的系统观察,发现细胞团从里向外呈现不同层次,淀粉颗粒主要分布在细胞外层。对胞内淀粉、可溶性蛋白、细胞生物量和紫杉醇产量进行动态测定,表明细胞干重与胞内淀 粉和蛋白量呈正相关,从对淀粉代谢情况看,可以初步认为细胞团不同层次细胞周围营养物质的浓度梯度是细胞形态与功能分化的重要原因。     

红豆杉植物愈伤组织的培养及其紫杉醇形成的初探

不同品种的红豆杉外植体及同一品种的不同外植体，其愈伤组织的发生率、发生速度、发生状况有所不同，激素种类及浓度对愈伤组织的诱导及生长有较大影响，适量的水解酪蛋白和抗坏血酸能促进愈伤组织生长，继代培养以２５～３０天为一代较好，接种量以０．７５～１．２５ｍ／５０ｍｌ培养基为宜，薄层层析结果表明，云南红豆杉细胞培养物中存在着紫杉醇（Ｔａｘｏｌ）。     

抗癌药物Taxol研究进展

本文就抗癌药物Ｔａｘｏｌ的化学成分，药理作用，临床等研究的历史，近况及其发展，予以综述。     

taxol对V79—8系细胞微核化机理的探讨

用多种方法探讨了 v_(79-8)系细胞在 taxol 作用下微核化的时期和机理.早熟染色体凝集(PCC)法发现此种 G_1 及 G_2 期缺陷的细胞株,在一定的生长条件下有相当数量的 G_1 和 G_2 细胞存在.taxol 作用后,首先是有丝分裂指数(I_m)的增加,然后随 I_m 的下降细胞微核化增加.秋水仙酰胺阻断的 M 期细胞,在释放的同时加入 taxol,细胞微核化速率增加迅速.微管的间接免疫荧光法显示,在 taxol 作用下,微管集合成不规则的束.微核化细胞可以继续合成 DNA.每个微核中含有可被抗着丝点抗体(ACA)血清荧光染色的着丝点.     

用HPLC对植物细胞培养液中紫杉醇的定量分析

以RP-HPLC对细胞培养液中紫杉醇的含量进行定量分析研究,并比较了2种不同的定量方法--标准曲线法和绝对分析法.实验结果表明:绝对分析法与标准曲线法测定的紫杉醇的摩尔吸光系数及样品中紫杉醇质量浓度结果的偏差在1.0%左右,验证了绝对分析法的可靠性. HPLC具有良好的线性关系(r=0.9999),加标回收率为97.9%～102.0%,相对标准偏差为2.1%,最低检出限为26.0μg·L-1。     

两种红豆杉离体细胞中紫杉醇含量的调节

以矮壮素、水杨酸和甘露醇为诱发子,研究了短叶红豆杉(Taxus brevifolia)和墨西哥红豆杉(Taxus globosa)离体细胞中紫杉醇含量的变化.实验结果表明:矮壮素、水杨酸和甘露醇不同程度地提高离体细胞中紫杉醇含量.短叶红豆杉的紫杉醇含量比墨西哥红豆杉的高,但诱发子诱导墨西哥红豆杉紫杉醇相对增加量大.0.5 mg*L-1水杨酸和0.5 mg·L-1矮壮素分别使短叶红豆杉和墨西哥红豆杉细胞中紫杉醇含量达到最高,分别是对照的1.8和15倍.还讨论了紫杉醇含量与愈伤组织生长的关系.     

磷限制培养中玫瑰茄细胞生长及花青素形成动力学

研究了在不同起始磷浓度下玫瑰茄细胞生长、主要营养物质（糖、铵离子及硝酸根、胞外磷）的消耗及产物花青素形成的动力学特性。结果表明该细胞的比生长速率与限制性底物磷浓度的关系符合Ｍｏｎｏｄ方程,最大比生长速率为０．２１６０ｄ＾－１。细胞比生长速率与产物花青素的形成呈负相关。     

人肺腺癌细胞的集落形成条件及过程的探讨

为使人肺腺癌细胞(SPC-A-1)成为探讨化疗、放疗等理化手段对于肿瘤疗效的理想实验模型,本文就获得较高集落形成率的最适条件作了详细研究,并观察其中单一细胞集落形成过程,讨论了影响集落形成的主要因素.实验结果表明,在26cm~2培养面积上,接种500个细胞,培养10天,其集落形成率为40%左右.