浅谈细胞核移植的两种技术

本文着重概述了细胞移植的两各技术。国内外科学家对细胞核移植的研究情况，说明了细胞核移植技术在生物学中的重要地位和在医学方面的作用及其经济价值。     

客观地认识动物克隆问题

要获得遗传物质完全相同的生物体,必须应用克隆技术。克隆（ｃｌｏｎｅ）即无性繁殖系,指单一的亲代细胞通过无性繁殖而产生的一组细胞。克隆动物是把动物的细胞核转移到成熟的去核卵细胞质内而发育成的动物个体,它可分为胚型克隆和无性克隆两种。胚型克隆动物是指用早期胚胎细胞核作供体移植、克隆所形成的动物。其主要克隆方式有胚胎分割,胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移植和胚胎嵌合。目前世界上已经完成了对小鼠、家兔、山羊、绵羊、猪、牛、马等动物的胚胎分割克隆;用胚胎细胞核移植技术克隆成功了小鼠、家兔…     

哺乳动物核移植研究进展

核移植技术具有重大的生物学的意义，特别是体细胞核移植技术的成功表明动物分化的体细胞核可再程序化，哺乳动物核移植的研究虽然还存在许多问题需要解决，但在挽救濒危动物，转基因动物研究，人类器官移植等许多方面展现了广阔的应用前景．     

体细胞核移植技术和诱导多功能干细胞技术的研究比较

本文主要对体细胞核移植技术和诱导多功能干细胞技术的具体操作过程、两种技术当前面临的问题以及他们的应用前景进行了简要说明.     

异种核移植技术与线粒体遗传

线粒体具有自身的遗传物质,在细胞生长发育过程中起着重要作用,但同时自身的增殖又受到细胞核的严格调控．克隆动物的线粒体遗传牵涉到治疗性克隆中干细胞的线粒体来源与组成,对干细胞在临床医学的应用有着重要影响．文中综述了线粒体遗传学的研究和异种细胞核移植中的线粒体遗传问题上,提出了异种细胞核移植研究的策略．     

用细胞核移植的方法研究黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus)早期内胚层细胞核的分化

本研究以移植细胞核的方法,探讨黑眶蟾蜍胚胎发育过程中胚胎层细胞核的早期分化。以囊胚期动物半球细胞核的移植为对照:当原肠早期囊胚腔底内胚层细胞核,与原肠晚期原肠腔底内胚层细胞核,移入去核的未受精卵后;移核卵发育到各期胚胎的百分率,与对照组基本相似。这表明以上两个时期的内胚层细胞核与囊胚期动物半球的细胞核一样,是尚未分化的,它们仍有发育的全能性。在以神经板期内胚层细胞核为供体的移植过程中,虽有一半以上的全囊胚发育到原肠期,但是胚胎进一步发育的能力受到较明显的阻抑。由此得出结论:黑眶蟾蜍内胚层细胞核从神经期开始,出现了较明显的分化,使卵子发育到游泳蝌蚪的能力显著下降。这结果表明黑眶蟾蜍内胚层细胞核的功能变化迟于豹蛙,而与非洲爪蟾相似。     

移植不同发育时期的黑眶蟾蜍细胞核到成熟卵后其早期DNA合成的研究

本研究采用细胞核移植技术及同位素标记法测定不同发育时期的胚胎细胞核移入经针刺激活的成熟黑眶蟾蜍的卵中后,测定其早期胚胎DNA合成的情况。结果表明其第一次DNA合成的高峰期具有随供核胚胎发育时间的增加而推迟出现的趋势。据此说明分化程度越高的细胞核移入成熟的卵子后,在卵细胞质中进行调整和适应所需的时间越长。     

花背蟾蜍早期发育中内胚层细胞核的分化

以细胞核移植的方法,探讨花背蟾蜍早期发育中内胚层细胞核的分化。实验按供体胚胎的不同发育时期分7组,并以囊胚期动物极区细胞核的移植作对照。结果表明:原肠晚期以前的内胚层细胞核与囊胚期动物极区细胞核一样,是尚未分化的,它们仍具有发育的全能性。从神经胚期开始,细胞核有了明显的分化,但这种分化是渐进的,至摄食期的蝌蚪仍有部分细胞核保持着促使卵子发育的功能。     

影响体细胞核移植重构胚发育的因素

目前已有多种动物被成功克隆,但存在着诸多未知因素,使体细胞核移植重构胚发育至囊胚阶段的比例过低,克隆动物存在早衰等异常现象.该文围绕这产生这些现象的根本原因、高度分化的体细胞核移入卵质后所发生的分子事件以及其影响因素如体细胞的来源和培养代数、细胞周期、核质相互作用、细胞核再程序化、线粒体等方面对体细胞核移植重构胚发育的影响等进行综述.     

鱼类转基因早期胚胎细胞的核移植研究

像许多转基因高等生物一样,用显微注射方法研制的转基因鱼均为转植基因嵌合体,培育纯合转基因品系已成为研究者们向往和追求的目标.以澎泽鲫(Carassius auratus,Pengze var.)和黄河鲤(Cyprinus carpio,Huanghe var.)为实验材料,以转基因囊胚细胞核或原肠胚细胞核为供体,进行了细胞核移植.检测了转植基因在所获得的移核胚胎和5尾澎泽鲫移核鱼及1尾黄河鲤移核鱼中的存在状况,分析了用转基因早期胚胎细胞核移植方法研制纯合转基因鱼的可能性.     

Hep-2细胞的PCC研究

以Ｈｅｐ＿２ 细胞为材料研究早熟染色体浓集技术（ＰＣＣ） 结果表明：诱导细胞融合的条件包括使用ＰＥＧ作融合剂，并使用高ｐＨ 值的培养基。得到了Ｇ１ 期、Ｓ期、Ｇ２ 期的ＰＣ染色体。     

一种游仆虫无性生殖周期中大核及其DNA含量的变化

应用光学显微镜、显微光度计和定量细胞化学技术研究了一种游仆虫无性生殖周期中大核及其 DNA 含量的变化特征,获得如下结果:(1)游仆虫细胞周期分成 G_1期、S 期和 D 期,各个时期在整个细胞周期中所占的时间速率分别为36%、59%和5%。(2)游仆虫细胞周期中,G_1期大核迅速增大,但此时大核无 DNA 合成现象,DNA 分布密度随大核增大而降低;S 期大核前期增大,此后变小,大核 DNA 含量连续增加,大核 DNA 分布密度也随着增高。8期结束后,大核 DNA 含量相当于 G_1大核的两倍;D期大核又显著增大,DNA 分布密度稍高于 G_1期大核的水平。(3)由游仆虫孚尔根反应大核的形态,大核 DNA 三维吸收图像和显微光度术定量分析数据表明,游仆虫大核 DNA 含量的变化仅发生在 S 期,S 期大核中 DNA 合成与大核改组带相联系。     

五唇兰受精过程中卵细胞的响应

五唇兰Doritis pulcherrima Lindl．受精过程中超微结构观察结果显示：精子到达胚囊前。卵细胞呈梨形；精子到达胚囊时，卵细胞呈典型的倒梨形；精核和卵核融合时，卵细胞坐长圆型。卯核凹陷，整个精核被卵核包围着。由此可见：五唇兰受精过程的顺利进行，不仅需要精细胞的主动参与，还要卵细胞的积极响应。     

一种游仆虫无性生殖周期中大核及其 DNA 含量的变化

应用光学显微镜、显微光度计和定量细胞化学技术研究了一种游仆虫无性生殖周期中大核及其DNA含量的变化特征,获得如下结果:(1)游仆虫细胞周期分成G_1期、S期和D期,各个时期在整个细胞周期中所占的时间速率分别为36%、59%和5%。(2)游仆虫细胞周期中,G_1期大核迅速增大,但此时大核无DNA合成现象,DNA分布密度随大核增大而降低;S期大核前期增大,此后变小,大核DNA含量连续增加,大核DNA分布密度也随着增高。S期结束后,大核DNA含量相当于G_1大核的两倍;D期大核又显著增大,DNA分布密度稍高于G_1期大核的水平。(3)由游仆虫孚尔根反应大核的形态,大核DNA三维吸收图像和显微光度术定量分析数据表明,游仆虫大核DNA含量的变化仅发生在S期,S期大核中DNA合成与大核改组带相联系。     

银杏( Ginkgo biloba L. ) 大孢子的发生和形成

研究观察银杏（Ginkgo bilobaL.）大孢子母细胞发生和大孢子的形成过程,结果表明银杏大孢子发生在4月中旬,从孢原细胞到雌配子体游离核时期,要经历几个不同的发育阶段,未成熟的大孢子母细胞近菱形的,并被一层较厚的细胞壁近围绕,初期一个大细胞核位地细胞的中央,各种细胞器散布在细胞质中,将要成熟时,大孢子母细胞以胚珠纵轴的方向伸长,当大孢子母细胞的长度宽度的3－4倍时,即进入成熟阶段,并出现较大的液泡,随后大孢子母细胞开始发生减数分裂,形成一纵列四分体大孢子,但到后来只有合点端的一个是具功能的,珠孔端的3个大孢子逐渐退化消失,具功能的大孢子进行有丝分裂,形成众多雌配子体游离核。     

莲子贮存蛋白基因的表达与子叶叶肉细胞的变构

莲子贮存蛋白基因（ＳＰＧ）的表达受发育调控。子叶叶肉细胞变构早于ＳＰＧ的开始表达,随发育过程加剧。在贮存组织中细胞变构的发生有严格的时空顺序性。变构主要表现在细胞核体积增大,外形变不规则,染色质分布不均匀化,核膜局部消失。     

蚕豆在粉发育的细胞形态学研究

1、小孢子核从中央位移至一端后,花粉开始第一次有丝分裂。2、分裂末期出现成膜体、细胞板而形成分隔营养细胞和生殖细胞的细胞壁。生殖细胞壁含纤维素物质。3、生殖细胞壁在和花粉内壁连接处向内生长,直到二末端相遇而被掐掉,生殖细胞脱离花粉壁并进入营养细胞,而后壁消失。4 营养核和生殖细胞在花粉粒内互相贴近。然后,生殖细胞处于分裂前期并经变形变化和运动而发育成熟;营养核形状不规则。     

中国鹅掌楸雄性生殖单位的二维结构

中国鹅掌楸花粉属二细胞型，观察了６枚在异己－北美鹅掌楸柱头沟中的花粉管。在花粉管进入柱头沟时，管长为花粉直径的４－１０倍期间，生殖细胞分裂形成两精细胞，同一花粉管的两精子在大小、形态上有明显差异、精子两形，两精细胞相互邻接，位于管的先端，两精子被营养细胞内质膜包围，大的精细胞通过细胞延伸乌黑营养核，同时部分地被营养核的裂片所包围，两精子和营养核形成的共同包装即为雄性生殖单位。败育花粉管中，精细胞几     

科尔沁细毛羊滑车神经核与动眼神经核的形态及细胞构筑

用组织学方法对7只成年健康科尔沁细毛羊滑车神经核与动眼神经核的形态、位置和细胞构筑进行了研究。结果表明:滑车神经核核长1.4 mm,细胞密度为515个/mm3,主要由椭圆和多极细胞构成;动眼神经核核长为6.2 mm,细胞密度为1 056个/mm3,主要由大中型多极神经细胞构成。     

水稻精细胞的超微结构

在稻成熟花粉粒中，精细胞被不连续的电子透明的周质空间所包围，纵切面上显示的精细胞显著的由细胞质延伸形成的尾状结构，主要为长圆形的细胞核所占据的一端为头部，精细胞中具有一般的细胞器，其中线粒体主要位于头部，微丝成束与细胞纵轴平行排列，观察表明，在水稻成熟花粉中具有雄性生殖单位，两个精细胞以尾部紧密连接，其中一个精细胞深入到营养细胞核中。