药用植物种质资源超低温保存研究

针对我国药用植物资源因过度采挖导致产量逐年递减的现状,从超低温保存原理、超低温保存基本程序、超低温保存后材料细胞相对存活率测定及其遗传稳定性检测等方面对药用植物种质资源超低温保存技术的研究现状进行了分析与总结.     

微藻的保种技术及其应用

本文介绍了微藻保种的几种常用方法，包括继代保存，固定和超低温保存，结果表明；继代保存简便易行，在生产和科研实践中比较实用；而固定化保存可用于较长期保存；超低温保存则可用于长期保存，另外，还对这几种保种技术的研究及应用现状进行了简单概述，以期能对微藻保种工作的开展有所裨益。     

玻璃化法优化保存川贝母组织培养物研究

为筛选出川贝母组织培养物中最适于用玻璃化法进行超低温保存的材料及其最适的玻璃化溶液脱水处理时间,将继代15 d的优质川贝母芽、愈伤组织和鳞茎接入MS+30 g/L蔗糖+5%二甲基亚砜的固体培养基中预培养6 d后,用60%玻璃化溶液II常温装载25 min,再于2℃下用100%玻璃化溶液II分别进行不同时间的脱水处理后投入液氮中保存.结果显示,在玻璃化超低温保存过程中,川贝母芽、愈伤组织和鳞茎的最佳脱水处理时间均为60 min,其中愈伤组织细胞保存后的相对存活率最高为80.08%.     

植物种质资源的保存--离体保存

植物种质资源的保存研究对于生物多样性保护和植物生物技术均具有十分重要的意义．文章综述了利用组培技术对不同植物组织器官进行限制生长与低温保存、超低温保存(玻璃化法、包埋脱水法、干燥法、预冻法、两步法)等离体保存技术．同时，列述了对保存种质存活率的鉴定及遗传稳定性分析的主要方法。     

高山红景天花粉的超低温保存

对来自大兴安岭、长白山的高山红景天花粉进行了超低温保存研究。结果表明:不同的干燥时间对超低温保存后花粉萌发力有明显影响,12 h干燥处理的花粉萌发力明显高于8 h、24 h干燥处理的;用0℃(8 h)→-10℃(8 h)→-20℃(8 h)变温预冻处理能大幅提升超低温保存后花粉的萌发力;超低温保存后的解冻方式以-20℃(8 h)→4℃(8 h)→25℃(8 h)为最佳。     

七叶树种子离体胚的超低温保存

通过对七叶树种子离体胚超低温(-196 ℃)保存后生活力、相对电导率和脱氢酶活性的测定分析,初 步研究其长期保存的可行性。结果表明：含水率是影响七叶树种子离体胚超低温保存的重要因素,超低温 保存时应对种子进行适度脱水。超低温保存后,七叶树离体胚生活力最高为93 %,其处理组合中57.3 %含 水率+缓速冷冻+快速解冻+10 %二甲基亚砜+10 %蔗糖+20 %聚乙二醇为最佳处理方案。     

太平洋牡蛎精液的超低温保存

利用解剖法采集太平洋牡蛎精液，用自然海水做基础溶液，配制不同浓度的DMSO（二甲亚砜）作为超低温保护剂，在液氮（LN2）面上不同高度进行预处理,投入LN2内保存，升温解冻后，检测精子成活率。结果表明，DMSO处理浓度、预处理温度及时间和升温方式对超低温保存成活率均具有显著影响。其中，用10％DMSO在LN2面上17cm预处理6min，采用16－17℃流水不完全解冻，效果最好，超低温保存精子成活率可达70％。与新鲜精子相比，在LN2内保存一天的精子，授精能力没有明显变化。     

红皮云杉体胚发生体系优化和超低温保存技术研究

[目的]通过对红皮云杉(Picea koraiensis)体细胞胚胎发生条件的筛选和超低温保存技术研究,建立其完整的体胚发生体系及超低温保存条件,为红皮云杉优良种质资源的大量繁殖及保存提供基础.[方法]以红皮云杉合子胚为外植体,以两种基本培养基、6种植物生长调节剂组合为培养条件,筛选胚性愈伤组织诱导的适宜条件.并将获得...     

大枣组织培养中外植体预处理的研究

本文给出了大枣组织培养中外植体预处理的优化方法。灭菌程序是：外植体→修剪→洗衣粉水洗净→蒸馏水冲洗滤干→７５％乙醇１０－１２利→饱和漂白粉上清波加２滴吐温－３０的混合液２０－２５钟分→无菌水冲洗４－５次→切段接种。保存方法是；外值体经蒸馏水冲净后插入蒸馏水（或保鲜液）中，于４±１℃的条件下保存，在５天内接种。这些方法对植物组织培养有普遍的参考意义。文中还讨论了外植体低温保存的有关机理。     

植物种质超低温保存研究进展

本文概述了植物种质资源超低温保存技术发展的历史和现状，总结了该技术的基本操作步骤，影响因素和关键技术，并对其研究前景和应用前景进行了展望。     

低温保存与低温固定——低温生物学的两个重要课题

本文讨论了低温保存的含义和现状、慢速冷却低温保存方法的研究手段、关于慢速冷却造成损伤的机理的争论、玻璃化低温保存方法、低温技术在电子显微技术中的应用、电镜样品的低温固定及低温固定快速降温速率的提高与测量等问题,并着重阐述了上海机械学院低温生物工程研究室在这些方面的研究。     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

低温在医学上的应用

介绍了低温在医学上的应用，它包括冷冻外科、低温保存、低度体温、低温干燥4个方面，冷冻医疗主要用液氮作低温制剂，它价廉、简便、易行。已广泛应用于临床各科治疗良性及恶性肿瘤，疗效确切，另在低温保存血液、精液、组织、器官方面成绩可，有待于进一步研究发展。     

突破生物材料低温保存技术瓶颈的仿生学途径评价

低温冷冻是实现生物材料长期保存的重要方法,但迄今已有的低温技术途径对于复杂的细胞、组织、器官乃至生命个体等生物学对象的保存仍无能为力.借鉴冬眠动物天然的耐寒机理,有望建立起崭新的生物材料低温冻存技术.对动物抗寒机理中与低温保存密切相关的若干重要问题进行了剖析,指出其中对低温保存具有重要参考价值的研究方向,并提出了发展新型低温保存策略的一些设想.可以预见的是,效法自然,发展仿生型低温保存技术,将成为今后突破传统技术瓶颈最有前景的方向之一.     

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

目的 对 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢 冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。 方法 采用 DAP213 方法冷冻保存了 C57BL / 6 J 及 SCARB2、PSGL1、IGB3S 三 个遗传工程小鼠 10 日龄幼鼠的卵巢,将四个品系 10 日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到 4 周龄 C57BL / 6 J 及 C57BL / 6 J( Cg) —Tyrc- 2 J / J( B6 albino)受体雌鼠,术后饲养 5 周与 10 周龄性成熟 C57BL / 6 J 雄鼠交 配,观察移植出生幼仔。 结果 C57BL / 6 J 新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino 受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。 结论 采用 DAP213 方法冻存 C57BL / 6 J 及以 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方 式是小鼠资源库保存的一个重要补充。     

血管低温保存全过程的热应力分析

计算机模拟了横观各向同性血管模型在低温保存全过程中的热应力分布 .结果表明 ,血管在复温刚开始阶段 ,血管外表面处出现一个显著的大应力峰 ,此时血管为理想线弹性体 ,容易导致沿截面的脆断 .而在降温阶段 ,血管虽然也出现大的应力峰 ,但此时血管为粘弹性体 ,并不一定会发生断裂 .数值模拟的结果与有关实验现象比较吻合     

冷冻保护剂葡聚糖-聚赖氨酸对冷冻皇冠梨品质的影响

为了解冷冻保护剂葡聚糖、聚赖氨酸对冷冻皇冠梨品质的影响,以氯化钙、氯化钙-葡聚糖、氯化钙-聚赖氨酸、氯化钙-葡聚糖-聚赖氨酸为冷冻浸渍液对皇冠梨进行冷冻处理。用无纸化温度记录仪测定冻结时间,分析样品冻结过程中温度随时间的变化,并对冻融后样品进行汁液损失、质构、水分分布等指标测定。结果表明:氯化钙、氯化钙-葡聚糖、氯化钙-聚赖氨酸、氯化钙-葡聚糖-聚赖氨酸浸渍冷冻处理样品通过最大冰晶生成带所需时间分别为12.87、10.12、10.20、7.50min,加入冷冻保护剂浸渍冷冻的样品解冻后汁液损失显著降低(P＜0.05)。冷冻保护剂浸渍冷冻处理组抗坏血酸含量、硬度较氯化钙浸渍冷冻对照组均有所提高,样品液泡水(T₂₃)所对应的峰面积S₂₃也有一定程度的提高。研究结果表明,与氯化钙浸渍冷冻相比,加入冷冻保护剂葡聚糖和聚赖氨酸后能有效降低冷冻对梨细胞结构的损害,减少营养物质的流失,有利于维持产品品质。     

小鼠胎儿成纤维细胞的冷冻保存研究

为了摸索小鼠胎儿成纤维细胞冷冻保存的简易方法,采用常规冷冻和玻璃化冷冻2种模式,探讨了不同的冷冻方法、不同的冷冻前平衡时间、不同的冷冻保护液的配比等因素对成纤维细胞冷冻效果的影响。实验结果表明:常规冷冻采用含10%(体积分数)甘油的DMEM液作保护剂,可将0~5℃下平衡时间缩短至45~60 min,细胞活力可达0.87。玻璃化冷冻采用10%(体积分数)NBS+1.8 mol/L乙二醇+0.1 mol/L蔗糖的PBS冷冻小鼠胎儿成纤维细胞效果好于其他组合,细胞活力可达到0.86。玻璃化冷冻法与常规冷冻法的冷冻效果差异不显著。     

Cryogenic Thermophysical Studies for Clinical Medicine

1　Introduction of Cell Injury DuringFreezing and ThawingAs biological cells and tissues contain much water,they can be analyzed as aqueous systems.Twosub- processes occur during freezing:heat transferand mass transfer.Heat is removed to thesurroundings s…     

在生物样品冷冻中具有移动边界的传热研究

当冷却介质的降温速率为常数时,本文用摄动法求解了相交界面随时间的移动及生物组织内的温度场;讨论了各种因素对此的影响。其结果显示,这些解在第三类边界条件和在第一类边界条件下具有较大的差异。