高效催化3-氰基吡啶腈水解酶新菌株的筛选

通过富集培养技术,从土壤中筛选出1株具有较高3-氰基吡啶催化活力的产腈水解酶新微生物。实验主要通过让微生物在以甘油为碳源、腈类化合物为氮源的培养基中生长,达到筛选的目的。当以乙腈为氮源时,从土壤中筛选出具有芳基乙腈水解酶活力的菌株8株,其中2株表现出了对3-氰基吡啶的催化活力;当以3-氰基吡啶为氮源时,从土壤中筛选出具有芳香腈水解酶活力的菌株2株,它们对3-氰基吡啶具有较专一催化活力,其中活力最高的菌株被鉴定属于红细菌属(Rhodobacter),本文首次报道该种属菌株中具有腈水解酶。     

Rhodococcus rhodochrous tg1-A6腈水解酶催化3-氰基吡啶合成烟酸的研究

利用高产腈水解酶的菌株Rhodococcus rhodochrous tg1-A6催化3-氰基吡啶合成烟酸,实验结果表明,腈水解酶的最适底物浓度为130mmol/L,最适催化温度为55℃,最适pH值为pH7.0.经过15h连续补加底物3-氰基吡啶,反应体系中产物烟酸的浓度可达到165.2g/L.在产物浓度累积不高的情况下,菌体经过7批次(共67h)的催化,烟酸的最终质量浓度累计可达到529g/L.     

环氧化物水解酶产生菌的筛选及其发酵条件的研究

以邻甲氧基苯基缩水甘油醚为唯一碳源,从土壤中筛选具有立体选择性的环氧化物水解酶的真菌,得到一目的菌株层出镰刀菌ZJUZQ010.对其发酵条件进行优化,结果表明:最佳碳、氮源分别是2.0%蔗糖和2.0%黄豆粉,初始pH为4.O;该酶不是诱导酶,2 mmol/L的Zn2+对其细胞生长和酶的诱导激活作用显著;当转化率为59.2%时,剩余R型环氧化物的ee值为93.8%.     

利用TLC筛选苯乙醇产生菌株

以底物诱导方法,从成都市某化工厂的污水处理池及其附近土壤中分离、纯化出224株菌.以摇瓶培养配合薄层色谱(TLC)检测法,对α-苯乙醇产生菌株进行高通量初筛.复筛利用气相色谱(GC)检测初筛所获得的8株菌对底物苯乙酮的转化率及产物α-苯乙醇的对映体过量值(e.e.%).经过初筛、复筛,最终获得2株遗传性质稳定、转化能力强的菌株.其中菌株bs5-1催化底物苯乙酮不对称还原成(S)-苯乙醇;菌株cmq6-8则不对称合成(R)-苯乙醇.实验证明,将TLC应用到菌株筛选工作,大大提高了菌株的筛选效率.     

对δ－酮腈异构化成吡啶酮反应中催化剂的筛选

使用３０种化含物尝试催化δ－酮腈异构化成吡啶酮反应，发现其中１０种化合物对该反应有催化活性；初步总结了有效催化该反应的催化剂应具备的初步条件。     

交联型聚磷腈基类高分子的合成与性能研究

为了获得较好性能的聚磷腈弹性体,用聚二氯磷腈为亲核取代基,三乙胺作为缚酸剂合成了交联型的聚磷腈无机高分子,利用红外光谱和元素分析对聚(苯氧基—缩二乙二醇氧基磷腈)(聚合物Ⅰ)、聚(苯氧基-二缩三乙二醇氧基磷腈)(聚合物Ⅱ)进行了结构表征.结果表明,苯氧基和缩醇氧基都已经接入聚磷腈骨架,并形成含有氯原子的二维网状稳定结构...     

淀粉酶产生菌的分离筛选

从大米厂、淀粉厂周边环境土壤中筛选到三株产淀粉酶能力较强的菌株Jz1、Jz2、Jz3。经形态特征及染色等初步鉴定,菌株Jz1和Jz3为芽孢杆菌属（Bacillus）,菌株Jz2为短小杆菌属（Curtobacterium）。采用YoungJ.Y00改良法测定此三株菌株的淀粉酶活力分别为47.29 U/mL、48.48 U/mL、49.74 U/mL,具有较好的应用潜力。     

一株腈水合酶产生菌的筛选、鉴定及培养条件研究

以葡萄糖为碳源,逐步增大培养基中丙烯腈浓度进行重复续代培养,从土样中筛选到一株腈水合酶活力较高的菌株.经形态观察和16S rDNA序列分析,该菌株鉴定为红球菌属(Rhodococcus)菌株,命名为Rhodococcus sp.TCCC 28001.对菌株TCCC 28001培养条件进行了初步研究,确定培养基为葡萄糖15 g/L,酵母粉5 g/L,尿素7g/L,Coz+10x10-5mol/L.28℃,180r/min培养72 h,腈水合酶活力达892 U/mL.     

立体选择性羧酸酯酶产生菌的筛选及发酵优化

从多地区采集的土样中筛选得到了一株产羧酸酯水解酶的菌株,它能够高立体选择性水解乙拉西坦中间体甲酯(α-乙基-2-氧合-1-吡咯烷乙酸甲酯).通过观察该菌株的菌落形态、生理生化特征,结合16SrDNA测序分析,该菌株被鉴定为鞘氨醇杆菌SIT102.通过该菌种发酵条件的优化,得到其最佳的发酵培养条件.利用鞘氨醇杆菌整细胞催化拆分外消旋乙拉西坦中间体甲酯的转化率、产物的对映体过量值(ee_p)及对映体选择率(E值)分别达到48.3%、96.5%和176.     

微生物絮凝剂产生菌的筛选

从含有大量微生物菌群的土壤和活性污泥中筛选获得性能稳定、对高岭土悬浮液的絮凝率达90%以上的菌株8株。其中编号为LA6的菌株培养液对高岭土悬浮液的絮凝率达99%以上。该菌在实验室培养条件下,以接种量0.5ml/50ml,种龄8h,温度30℃,摇床转速为160r/min,培养时间72h可达最高絮凝活性。以高岭土和CaCl2作为助凝剂的LA6培养液对含亚甲基蓝10mg/l的溶液的脱色率10min可达到90.32%。     

D-对羟基苯甘氨酸生产菌株的选育方法探讨

利用国际上通用的以底物--对羟基苯海因(HPH)为惟一氮源的培养基从69个土壤样品和3个水样中初步分离出238个菌株,然后利用双层琼脂法和微孔快速筛选法对分离到的菌株和实验室保藏的220多株茵进行反复筛选,最终获得D-海因酶阳性菌株54株.用茚三酮显色法及纸层析法从这54株茵中筛选到2株产N-氨甲酰水解酶的阳性菌株,从而获得了可同时产生D-海因酶(DHase)和D-氨甲酰水解酶(DCase)的菌株.     

L-谷氨酸氧化酶高产菌株的快速筛选及诱变育种

用谷氨酸氧化酶测试液浸湿白卷纸置于菌落上,根据白卷纸上显示红色快慢、深浅,就能大致测得该菌落菌株产酶能力高低。该法可靠性大、工作量小、操作简便,显示结果快。利用该法,配合亚硝酸诱变,在短暂三个月内,将L-谷氨酸氧化酶产生菌株产酶能力提高了约25倍。     

产生埃博霉素的纤维堆囊菌的分子筛选

为寻找潜在的产生埃博霉素(epothilone)的纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum),以埃博霉素生物合成基因簇中的epoA,epoC和epoK基因为探针,分别对60株不同土壤样品来源的纤维堆囊菌的DNA样品进行PCR筛选.筛选结果得到了7株阳性菌株,进一步对其进行发酵和粗提物的HPLC-MS分析,检测结果显示3株菌XMU-Nc-03,XMU-So-64和XMU-So-112能产生埃博霉素B,其中XMU-So-112的产量最高.本实验在筛选产埃博霉素活性菌株的同时,还建立了一个快速可靠的发现埃博霉素产生菌的方法.     

产分泌蛋白酶酵母菌株的筛选

用含有脱脂奶粉平板上点种培养的方法,从分属９３个属,４９２个种的２１２９０个酵母菌株中进行筛选,发现有分属２７个属,８７个种的１６５个酵母菌株可产一不同程度的分泌蛋白酶,并对其中３株产酶较高的菌株进行培养基对产酶量的研究。     

黄曲霉毒素产毒菌株的快速筛选法

运用花生察氏培养基、花生葡萄糖硝酸铵培养基、筛选培养基,这三种培养基对从谷物、食品、饲料等环境中分离出的１２株黄曲霉菌株的产毒能力进行了筛选试验．根据黄曲霉毒素在紫外灯下能发出强烈荧光的特点进行试验,筛选出４株黄曲霉毒素产毒菌株．经过菌株产毒培养、毒素的抽提、薄层层析等一系列试验证明,这三种荧光筛选培养基能够对黄曲霉毒素产毒菌株进行快速有效的筛选．     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其鉴定

采用稀释法和划线纯培养法,从土壤、湖水及湖底淤泥样品中培养分离出16株细菌,筛选获得2株高效微生物絮凝剂的生产菌株,利用其发酵液进行絮凝实验并进行菌种鉴定。结果表明,两株高效生产微生物絮凝剂的絮凝率均达到90%以上,两菌株初步鉴定为氮单胞菌(Azomonas sp.)和动胶菌属(Zoogloea ramigera)。     

用于生产低聚木糖的木聚糖酶菌株筛选

比较分别属于木霉属(Trichoderma)、毛壳属(Chaetomium)、黑曲霉属(Asperjgillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)的12个菌株的木聚糖酶活性,以蔗渣木聚糖为底物,分析不同菌株木聚糖酶水解产物中的糖类组成,考察木聚糖酶系的稳定性。结果表明,毛壳属菌株所产木聚糖酶的水解产物中,低聚木糖的比例普遍高于其它类型菌株,其中球毛壳AS3．3601不仅木聚糖酶的活性较高,而且酶系稳定性最好,水解液中木二糖、木三糖占总糖含量的76％以上。球毛壳AS3,3601的发酵液按最大剂量0．4ml／10g给小鼠灌胃,每天1次,连续7d,所有受试小鼠均无中毒反应,初步认为球毛壳AS3．3601对于口服是安全的。     

利用牛蒡菊糖筛选产菊糖酶菌株的研究

筛选出一株能分解牛蒡菊糖并产生低聚糖的菌株，经鉴定为黑曲霉AC1．正交设计法优化摇瓶发酵产菊糖酶的条件，实验结果表明：最佳发酵条件为基质菊糖质量浓度为0．03g／mL，pH为6．0，磷酸氢二钾质量浓度为0．006g／mL，酶活力可达26．41U／mL．利用高效液相色谱检测AC1产生的菊糖酶粗酶液分解牛蒡菊糖后的产物，结果表明：经分解后检测出低聚糖的存在．对AC1产生的菊糖酶粗酶液的酶学性质分析，结果表明：pH5．5，50℃反应温度下表现出最大且稳定的酶活力．     

脲酶高产菌的筛选和产酶条件的研究

从红壤稻田分离产胞外脲酶活性高的细菌、放线菌和真菌各20株.细菌、放线菌、真菌产脲酶活力的平均值分别为0.764,1.104,0.847μmol/min.产脲酶能力大小为:放线菌>真菌>细菌.我们研究了一株放线菌Dactylosprangiumaurantiacum产胞外脲酶的条件.结果表明:该菌产酶的最佳培养时间为42h;产酶的最佳培养温度为28℃;产酶的最佳起始pH为7;葡萄糖、鼠李糖和甘露糖等碳源对产酶有利;硝酸铵、氯化铵和硫酸铵对产酶有利;钙、镁等金属离子能促进产酶.     

产蛋白酶和淀粉酶菌株的筛选及其发酵产酶特性研究

利用酪蛋白固体平板分离培养基、淀粉平板分离固体培养基初筛,液体发酵产酶培养基摇瓶复筛相结合,从实验室保藏的真菌茵株中筛选出一株产蛋白酶的真茵菌株和一株产淀粉酶的真茵茵株,对其固态发酵特性进行了研究．结果表明：蛋白酶产酶高峰为24h,酶活力达到3760tJ／g;淀粉酶产酶高峰为32h,酶活力达到0．405u／g．