催化动力学光度法测定碱性磷酸酶的理论分析与条件优化

根据Michaelis-Menten（M-M）方程和朗伯-比尔定律,对检测碱性磷酸酶（ALP）的催化动力学紫外分光光度法进行了理论分析和条件优化．确定了反应的最适酸度条件为pH10．2,温度为25℃．在0．008-0．12U／mL范围内,ALP的浓度与反应速率呈良好的线性关系,线性方程为y=6．1349x＋0．0037（r=0．9997）,检测下限为4×10^-4U／mL．利用所研究的方法对某牛奶场的生鲜牛奶中的ALP进行了检测,其相对标准偏差在5％以内,符合微量分析测试的要求,结果令人满意．     

钒酸盐和脲对锯缘青蟹碱性磷酸酶的抑制作用

钒酸盐（偏钒酸钠、钒酸钠、偏钒酸铵、联吡啶过氧钒酸钠）和脲作为养殖环境的污染物对锯缘青蟹碱性磷酸酶的酶活力有明显的抑制作用,抑制程度随着抑制剂浓度的增大而增强。钒酸盐对酶的抑制类型均为竞争性抑制,而脲为非竞争性抑制;在脲浓度低于７．０ｍｏｌ／Ｌ时,２５℃与脲处理２．５ｈ的酶的抑制失活作用是可逆的。钒酸盐和脲对酶有协同抑制作用。     

碱性染料在催化光度法中的应用 Ⅰ催化光度法测定痕量锰的研究

本工作较系统地研究了在氨三乙酸存在下,锰(Ⅱ)对高碘酸钾氧化碱性三苯甲烷类、醌亚类染料的催化效应,初步探讨了催化反应的机理,发现了一系列高灵敏度指示反应、检出限为0.1～0.001ng/ml,列出了这些体系的分析特性和部分分析结果。     

氨基酸对鲍鱼碱性磷酸酶活力的影响

选用L Ala、L Val、L Leu等15种氨基酸为效应物,研究它们对杂色鲍(Haliotisdiversicolor)碱性磷酸酶(EC.3.1.3.1)催化pNPP水解反应的影响.结果表明:上述这些氨基酸对鲍鱼碱性磷酸酶均有一定程度的抑制作用,抑制程度随着试剂浓度增大而加剧.当浓度为10.0mmol/L时,分别可以使酶活力下降:7.77%、36.75%、22.79%、39.86%、16.16%、19.33%、94.77%、20.19%、17.02%、40.15%、31.08%、17.52%、30.56%、36.77%和12.59%.尤其以L Cys对酶的抑制作用最为显著(抑制率为94.77%),其次是L Ile和L His,它们均能使酶活力下降40%;对酶抑制率在30%以上的氨基酸还有L Val、L Trp、L Phe和L Lys,其它选用的氨基酸对酶的抑制率小于25%.选择对杂色鲍ALP具有较明显的抑制作用的氨基酸L Val、L Ile、L Trp和L Cys等氨基酸为研究对象,研究它们对酶催化pNPP水解反应的抑制作用机理,并测定其抑制常数.结果表明L Cys的抑制作用为混合型效应,其KI和KIS值分别为0.042mmol/L和0.139mmol/L;而L Val、L Ile、L Trp为反竞争性,其KIS分别为9.56、8.55、8.09mmol/L.     

催化动力学光度法测定痕量铁

在硫酸介质中 ,Fe(Ⅲ )离子在活化剂邻二氮菲的存在下可催化抗坏血酸还原 (2 .6_二溴_4_硝基苯 )_3_(4_硝基苯 )三氮烯的褪色反应 ,据此提出了测定痕量铁的新方法 ,该方法的线性范围为 0～ 33μg/ 2 5mL ,检测限为 6 .9× 10 -3 μg·mL-1,将本法用于人发与自来水中铁的测定 ,结果满意 .     

催化动力学光度法的原理与实验

铜对Ｈ２Ｏ２ 氧化乙基紫（ＥＶ）褪色的反应具有较强的催化作用, 在一定条件下该反应为零级反应． 本文以此为例对催化动力学光度法的原理与实验进行讨论．     

催化动力学光度法测定痕量亚硝酸根

基于在磷酸介质中,亚硝酸根对溴酸钾氧化氯酚红反应具有很高的催化活性,建立了测定痕量亚硝酸根的催化光度法,并讨论了其动力学条件。本方法的线性范围为０．０４－１４ｍｇ／Ｌ,检出限为０．００７ｍｇ／Ｌ,回收率为９８．７％－１０２％。方法简便,快速、选择性好用于地表水,食品及土壤样品中的亚硝酸根的测定,结果满意。     

催化动力学光度法测定痕量铋（Ⅲ）的研究

发现了痕量铋（Ⅲ）在氨性介质中能催化高碘酸钾与靛红之间的褪色反应，研究了反应的最优化条件和动力学参数，建立了测定痕量铋（Ⅲ）的新方法。方法的最低检测限为４．９×１０＾－１２ｇ Ｂｉ（Ⅲ）／ｍＬ，检测范围为０．００３￣０．２００μｇ Ｂｉ（Ⅲ）／２５ｍＬ，用于测定人发及其它生物样品中痕量铋（Ⅲ），获得了满意结果。     

催化动力学光度法测定痕量钼

以罗丹明Ｂ为光度指示剂检测受钼（Ⅵ）催化的过氧化氢氧化碘离子的反应速度，建立了催化动力学法测定痕量钼的新方法．采用磺基水杨酸作催化反应的活化剂，提高了测定钼的灵敏度和选择性．该法测定钼的线性范围为０～０．０８μｇ／２５ｍＬ，测定下限（△Ａ＝０．０１）为１×１０－１０ｇ／ｍＬ．采用α－安息香肟氯仿溶液草取分离，测定了水样和尿样中钼．     

Activation of Calf Intestinal Alkaline Phosphatase by Trifluoroethanol

IntroductionAlkaline phosphatase(EC3 .1 .3 .1 ) is a nonspecificphosphomonoesterase that is found in bothprocaryotes and eucaryotes as a dimer withidentical subunits[1] .It belongs to the group ofenzymes attached to the lipid bilayer of membranesby a glycosylphosphatidylinositol anchor[2 4] .Itis ametalloprotein that has two Zn2 +ions and oneMg2 +ion in each active site.Both its catalyticmechanism and structure have been thoroughlystudied and reviewed[5,6 ] .In mammals,alkalinephosphatase is…     

凡纳对虾体内ACP、AKP酶的细胞化学定位

运用电镜酶细胞化学技术对凡纳对虾体内肝脏(L)、肌肉(M)、心脏(H)和复眼(E)等四种组织的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)进行了细胞化学定位,并与感染病毒的凡纳对虾四种组织中ACP、AKP的细胞化学定位进行比较.结果显示,在健康的对虾体内,ACP依次出现在各组织中的溶酶体、细胞核、细胞内膜、线粒体、内质网以及肝脏组织中的部分脂滴周围及微绒毛中AKP依次出现在各组织中的细胞膜、细胞核、溶酶体、内质网以及肝脏组织中的脂滴周围及微绒毛中.感染病毒后,对虾体内组织细胞出现了明显的病理变化,各组织细胞内均出现大量的髓样小体;各组织中ACP,AKP的超微细胞化学定位也发生了明显的规律性变化,表现为相应细胞器内ACP,AKP酶活性均减弱或消失,并在多数组织的细胞质中检测到ACP,AKP酶活性的高电子密度颗粒,且大量出现的髓样小体均呈阳性反应.     

阻抑动力学光度法测定痕量尿素新方法研究

研究了在盐酸介质中,微量尿素对亚硝酸根催化过氧化氢氧化亚甲基蓝褪色的阻抑作用,通过测量660nm处吸光度的变化,建立了测定痕量尿素的阻抑动力学光度分析的新方法.在最佳实验条件下,测定尿素的线性范围为0.1～2.0μg/25mL,检出限5.4×10-10g/mL.此方法用于废水中痕量尿素的测定,结果满意.     

痕量钯的催化动力学光度法测定综述

按不同催化体系,从反应条件、灵敏度、测定范围和应用等方面综述了催化动力学光度法测定痕量钯（Ⅱ）的研究情况。     

EDTA对合浦珠母贝碱性磷酸酶活性的影响

以合浦珠母贝(Pinctada fucata)为实验材料,从其外套膜中分离提取碱性磷酸酶(ALP),分别用不同浓度的EDTA不同时间处理ALP,发现随着EDTA浓度的增大,酶的活力指数下降至完全消失,可见酶分子在脱除金属辅基后,活力完全丧失,它是一种金属酶,对酶活性中心金属离子替换实验中。发现分别加入Mg^2 、Mn^2 、Co^2 、Zn^2 后,酶活力可得到一定程度的恢复,而同时加入Mg^2 、Zn^2 ,可使酶活力恢复到92％．     

僧帽牡蛎碱性磷酸酶功能基团的研究

采用化学修饰法研究僧帽牡蛎碱性磷酸酶活性功能基团性质.酶经0.4mmol·L-1PCMB修饰30min后活力仍然保持不变,提示巯基与酶的活力无关;用二巯基苏糖醇(DTT)对酶进行修饰,当DTT浓度达到2.5mmol·L-1时,酶活力丧失98%,表明硫 硫键与酶活力有密切的关系;以N 溴代琥珀酰亚胺(NBS)修饰酶的色氨酸残基,酶的修饰失活呈一级反应,当NBS浓度达到0.65mmol·L-1时,酶活力丧失100%,并辅以紫外吸收光谱的变化分析,表明色氨酸残基是酶催化活力所必需的;醋酸酐、马来酸酐、甲醛等氨基试剂对酶的修饰作用显示氨基是酶的必需基团.