中国对虾一种杆状病毒的超微结构

应用电镜超薄切片技术,发现中国对虾(Penaeus chinensis)肝胰腺上皮、肠上皮和甲壳下表皮细胞质中1种杆状病毒粒子,为中国对虾杆状病毒(CBV)．该病毒直径44～45nm,长度170～200nm,中央是高电子密度的核心,外裹的衣壳不明显,但囊膜清晰可辨,在囊膜与核心之间有一个中宽端窄的间隙,本病毒仅在胞质中增殖,不形成包涵体,但形成封人体,它们所造成的靶细胞病理变化不明显．     

对虾一种杆状病毒的分离纯化及超微结构

从市售的甲壳上带有白斑的冷冻斑节对虾(Penaeus monod on)中提取到一种杆状病毒,并用它感染了活体的中国对虾(Penaeus chinensis) 幼虾和日本对虾(Penaeus japonicus).这2种对虾均发病死亡.从死亡的对虾中再次提纯出此杆状病毒.此种杆状病毒的核酸为DNA,衣壳的主要结构多肽的相对分子质量为49 .8 kDa.通过对此杆状病毒悬液负染片的电镜观察,对其超微结构进行了研究并提出了一种对虾杆状病毒衣壳超微结构的模式图.     

利用WSBV的引物扩增对虾的杆状病毒DNA

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物，成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段，与预计的产物长度吻合，该引物对经初步离心处理的病虾组织出能扩增出特异性ＤＮＡ条带，而在对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒ＤＮＡ进行了扩增，均获得阴性结果，说明该引物的特异性较高，对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状有同源序列存在，具有一定的保守性，     

中国对虾暴发性流行病杆状病毒的提取纯化及病原性实验

通过病毒纯化技术及电镜检测 ,发现患病的中国对虾体内有带囊膜的杆状病毒 .该病毒粒子大小为 (3 0 0～ 4 0 0 )nm× (1 60～ 1 80 )nm ,囊膜 2 0～4 0nm ,无包涵体 .人工回接实验表明 ,病虾的肝胰脏、中肠、胃、心肌组织内均分布有大量的病毒粒子 ,该病毒粒子在形态、大小、囊膜的有无及包涵体的有无等诸方面均与感染前部分纯化的病毒粒子一致 .根据柯氏法则 ,患病的中国对虾是由杆状病毒的侵袭所致 .     

中国对虾肝胰腺上皮细胞质中杆状病毒增殖的电镜观察

对中国对虾肝胰腺上皮细胞进行透射电镜观察。指出：对虾杆状病毒可在肝胰腺上皮细胞的胞质内增殖，与以细胞核内形成包涵体为特征的增殖方式明显不同。溶酶体在增殖过程中内吞濒临解体的线粒体和病原体，利用线粒体内嵴提供的能量，有规律地组装成杆状病毒的包涵体。这一结果为探讨对虾暴发大面积死亡的病因分析提供了新的途径。     

斑节对虾杆状病毒与肝胰腺细小样病毒在三种对虾中的感染率

应用石蜡切片技术对斑节对虾杆状病毒（ Ｍ Ｂ Ｖ） 和肝胰腺细小样病毒（ Ｈ Ｐ Ｖ） 在斑节对虾、日本对虾和中国对虾中的感染情况进行了研究结果表明： Ｍ Ｂ Ｖ 在斑节对虾的仔虾、稚虾及养成期虾中的感染率均接近１００ ％ ;在日本对虾养成期虾中平均感染率为７５０ ％ ;中国对虾仔虾未检出 Ｍ Ｂ Ｖ 包涵体 Ｈ Ｐ Ｖ 在中国对虾仔虾中感染率为５６００ ％ ;在斑节对虾仔虾中感染率为２８７５ ％ ,稚虾为３６１１ ％ ,养成期虾平均为６５２５ ％ ;日本对虾养成期虾的平均感染率为２０００ ％  Ｍ Ｂ Ｖ 与 Ｈ Ｐ Ｖ 在斑节对虾中可出现合并感染的情况,其合并感染率为：仔虾２８５７ ％ ,稚虾３５６８ ％ ,养成期虾６４５４ ％ 日本对虾和中国对虾中未发现 Ｍ Ｂ Ｖ 与 Ｈ Ｐ Ｖ 合并感染的现象结果表明, Ｍ Ｂ Ｖ 是斑节对虾的主要病原体,而 Ｈ Ｐ Ｖ 是中国对虾的主要病原体     

万氏对虾感染白斑杆状病毒的试验

用取自发病虾塘的患白斑病斑节对虾为材料,对健康的万氏对虾(Penaeusran-namei)进行人工投喂和注射感染．结果显示白斑病的病原白斑杆状病毒可以通过投喂和注射感染健康的万氏对虾,在3～5d内使受试对虾发生大量死亡,虾体出现典型的甲壳白斑症状和白斑病特征性组织理变化,从病变细胞观察到白斑杆状病毒．     

中国对虾杆状病毒病的初步研究

１９９３～１９９５年中国对虾发生暴发性流行病,经对患病对虾作组织病理学研究和电镜观察,发现此病以消化系统病变更为严重,肝胰腺,胃及肠道上皮层发生变性和坏死,上皮细胞破坏,细胞核肿大;结缔组织发生水肿,血淋巴细胞浸润,在电镜下,病变组织的细胞核内充满一种杆状病毒,大小为２６０～３１０ｎｍ×９０～１１０ｎｍ外被双层囊膜,不形成包涵体,纯化的病毒经负染后在电镜下见到的大多数是病毒核衣壳,大小为２８６ｎｍ     

斑节对虾杆状病毒感染率与感染度的动态变化

应用石蜡切片法调查了不同龄期养殖斑节对虾(Penaeus monodon)的斑节对虾杆状病毒(Penaeus monodon baculovirus,MBV)感染率和感染度．结果表明各龄期养殖斑节对虾的MBV感染率达100％或接近100％．MBV感染度以养殖早期较高(最高可达142．317‰),养殖中期下降(最低为11．334‰),养殖后期又呈上升趋势．这与对虾的免疫状况及环境的改变有关．     

菜青虫体内颗粒体病毒的早期检测

用ＥＬＩＳＡ从感染１６ｈ后的菜青虫血淋巴中检出颗粒体病毒，检出率为４８％，检出率随感染时间延长而递增，感染后２４ｈ高达８０％以上，远早于感染病症出现的时间，用血淋巴检测优于组织提取液，阳性滴度高，以１头虫检测较多头虫好，试验证明ＥＬＩＳＡ比对流免疫电泳灵敏。     

茶刺蛾[Darna trima(more)]颗粒体病毒鉴定及核酸与蛋白质特性的初步研究

1985年从四川珙县分离到的茶刺蛾病原物,经感染试验,组织病理研究,包涵体及病毒粒子超微结构研究,核酸类型鉴别等,定名该病原物为茶刺蛾颗粒体病毒.另对该病毒核酸作了限制性内切酶分析和热变性试验,测得该病毒核酸为双链DNA分子,分子量为64.11×10~6d,93.87kb,Tm值为67.3℃,(G+C)含量为32.7％,包涵体蛋白的氨基酸组分中Asp、Glu和Arg含量高,占氨基酸总量的34.12％,His,Cys和Met含量很少。该病毒对茶刺蛾幼虫有很强的感染力,氨基酸在生物防治上有潜在应用前景.     

中国对虾养成早期几种生态因子的研究

在我国人工养殖对虾过程中,必须对池水进行经常性的监视监测,以免水质恶化,造成重大损失。本文探讨了对虾养成早期池水温度、溶氧和pH值三个重要生态因子的昼夜变化规律和月变化趋势,以及溶氧与气压的关系,从而为科学养虾提供了较重要的理论依据。     

危害新疆西瓜的一种线状病毒的研究

从新疆染病的西瓜分离到一种线状病毒,该病毒可经汁液传播侵染属于６个科的１７种草本植物;染病的西瓜、哈密瓜和西葫芦引起植株生长阻滞、叶片皱缩、褪绿、泡斑、黄花叶以至坏死等系统侵染症状;该病毒可经桃蚜以非持久性方式传播;该病毒的病毒粒子为长约７５０ｍｍ的线形病毒粒子,在染病组织中形成风轮状内含体,证明该病毒属于马铃薯Ｙ病毒组;染病组织粗汁液提纯病毒制备物在ＳＤＳ双向免疫扩散试验中与小西葫芦黄花叶病毒抗     

后黄卷叶蛾(Homona magnanima Diaknoff)颗粒体病毒的研究

<正>本文报道了后黄卷叶蛾颗粒体病毒野生型毒株(NJHmGV)形态特征、组织病理、感染试验及人工增殖等方面的研究成果。该病毒包含体为卵形、椭圆形,大小平均为210nm×330nm,病毒粒子为杆状,大小平均为45nm×210nm。主要侵染寄主昆虫的脂肪体和体壁真皮细胞;有较强的致病力,对后黄卷叶蛾3龄幼虫的LC_(50)为3.42×10~(-5)mg·mL~(-1)。     

中国对虾慢性亚硝酸盐和氨中毒的组织病理学研究

采用投喂鲜蛤肉、吸底、换入适量的沙滤水等常规的饲养方法,使试验水体的亚硝酸盐含量逐渐上升,氨浓度也高出洁净海水数倍,从而造成对虾中毒。结果表明：高浓度的亚硝酸盐和氨使得试验虾肝胰腺、胃、中肠和鳃等组织产生异常变化,出现从细胞肿胀到空泡化、坏死等一系列的组织病理学变化。     

Genetic diversity in Penaeus chinensis shrimp as revealed by RAPD technique

The random amplified polymorphic DNA analysis was used to estimate genetic diversity in one successively cultivated stock and three wild stocks of Penaeus chinensis shrimp, two of which were collected from the spawning and wintering grounds in the west coast of Korean Peninsula, and one from the feeding ground in the China coast of the Yellow Sea. A random primer kit was employed to scan the genomic DNA in 20 individuals of each index stock. A total of 110 reproducible RAPD markers were obtained, 68.2 % of which showed a sound eonformability within all the individuals detected, implying that the genetic variability in P. chinensis is relatively low. The proportions of polymorphic loci among these four stocks ranged from 20% to 33.3%, while the degrees of genetic polymorphisms varied from 0.0093 to 0.0307. The genetic variability of inter-stocks was higher than that of intra-stock. The genetic diversity in different stocks differed from each other; that is, a less genetic differentiation in the spawning and wintering stocks from the west coast of Korean Peninsula was revealed and their genetic diversities were higher than that of the spawning stock in the Bohai Sea and the China coast of the Yellow Sea. As detected, the genetic diversity in the successively cultivated stock was the lowest among these four stocks. Through genetic distance analysis between a random pair of individuals, a dendrogram of the above-mentioned four stocks was constructed by unweighted pair group method with arithmetic mean. The results based on cluster analysis well fitted with the geographical distribution of P. chinensis in the Bohai and Yellow Seas.     

我国新城疫病毒疫苗通过重组影响病毒进化

许多商业新城疫活疫苗被广泛用来阻止我国新城疫病毒的感染.然而,疫苗在我国新城疫病毒群进化过程中所起的作用鲜为人知.为了确定在我国广泛应用的新城疫疫苗是否对该病毒进化进程产生影响,在本研究中,我们对在我国流行的新城疫病毒进行了系统发生和重组分析,获得了一系列NDV株间同源重组的证据.一些重组株的部分遗传物质被发现可能来自疫苗株,这些结果证实疫苗可能通过同源重组影响我国新城疫病毒的进程.由于疫苗与流行株之间的重组可能导致出现疫苗接种失败的后果,因此,在临床上应当尽可能避免疫苗与野生株之间的重组.故在NDV防治过程中,应该采用合适的免疫程序避免这种重组的发生.     

成熟中国对虾(Penaeus chinensis)卵巢中卵黄蛋白的纯化

用层析(SephadexG-150, DEAE-Cellulose-52)和电泳洗脱2种方法分别从成熟中国对虾卵巢中纯化得到了一种卵黄蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测表明,卵黄蛋白出现在SephadexG-150的第1个洗脱峰和DEAE-Cellulose-52的0.4 mol/L和0.5 mol/L NaCl洗脱峰处.比较了这2种方法的优缺点:层析法可用于蛋白的大量制备,电泳洗脱能够得到高纯度的蛋白.并对与其结合的类胡萝卜素的稳定性进行了讨论.