合浦珠母贝受精细胞学观察

用醋酸－地衣红染色制片的方法对合浦珠母贝卵子减数分裂和受精过程进行了详细的细胞学观察。精子入卵前，卵子停留于第一次减数分裂中期。精子入卵后，卵子开始成熟分裂，在海水温度２２℃的条件下，授精后２２ｍｉｎ及３９ｍｉｎ绝大部分卵子分别完成第一次减数分裂和第二次砬数分裂，排出第一极体和第二极体，雌雄原核分别形成，其染色体逐渐凝集，形成两组染色体，最后在卵裂的赤道板上联合，７１ｍｉｎ后，大部分卵子完成第一次     

斑马鱼受精过程中原核的时空规律

斑马鱼的成熟卵子处于第2次减数分裂中期,精子通过受精孔进入卵内,精子入卵后,卵子被激活;受精后3 min,精核位于卵质膜内侧边缘,处于凝集状态;受精后5 min精核开始解凝;受精后8 min,精核明显解凝,受精卵出现明显的精子星光.同时进入第2次减数分裂后期,之后排出第二极体;受精后10 min,雄原核形成,具有双星光,此时,雄原核已位于胚盘中部;受精后15 min雌原核已形成,雌、雄原核向胚盘中央靠近;受精后20 min,雌雄原核开始接触;受精后30 min,雌雄原核完全融合成为1个合子核;35 min时,受精卵开始第1次卵裂;45 min后分裂形成2个子核;50 min时分裂为2细胞,60 min时分裂为4细胞.     

弓獭蛤受精及早期卵裂过程核相变化的细胞学观察

采用Hoechst 33258染色和荧光显微镜技术,对弓獭蛤(Lutraria arcuata)受精和早期卵裂过程中的核相变化进行观察.其成熟未受精卵呈圆球形,卵径55~60μm,核相处于第1次成熟分裂前期;精子为鞭毛型,全长约50~55μm.精卵混合后,精子迅速附着于卵子表面;受精后10~30 min,精子入卵膨胀成球形;30~50 min进行第1次成熟分裂,排出第1极体;50~60 min进行第2次成熟分裂,排出第2极体;同时精核和卵核体积膨胀,形成雄原核和雌原核;70 min左右,雌、雄原核联合,形成第1次有丝分裂的中期分裂相;70~90 min受精卵进行第1次卵裂,形成2个卵裂球;90~110 min进行第2次卵裂,形成1大3小的4个卵裂球.     

锯缘青蟹受精过程核相变化的研究

用光镜和组织切片技术研究了锯缘青蟹受精过程核相变化的特征．锯缘青蟹刚排出的成熟卵子为初级卵母细胞．核相处于第1次成熟分裂的中期．在卵子产出后30min内第1极体排出并分裂成两个小极体;第2极体随着受精膜的形成和举起而排放。在卵子产出后50～60min内排出;第1．2极体分别位于受精膜的内外两侧．雄性原核形成早于雌性原核;雌雄原核形成后向卵子中央移动。最后发生联合形成联合核．排卵后的6～7h内。合子核才开始第1次核分裂．锯缘青蟹为数精人卵．单精受精．     

人工诱导盘鲍异源雌核发育多倍体的初步研究

通过预实验,观察和了解在24.8℃下九孔鲍精子与盘鲍卵子授精,及其受精卵第一极体和第二极体出现的时间.采用不同浓度的乙烯脲失活九孔鲍精子的遗传物质,确定其最佳处理浓度和处理时间.遗传物质失活的九孔鲍精子和盘鲍卵子授精,用CB进行不同持续处理时间抑制受精卵第一极体和第二极体出现的方法诱导多倍体.实验结果表明,在水温24.8℃下,作为失活九孔鲍精子遗传物质的乙烯脲,当其质量分数为0.5‰和处理时间为10 min是比较适宜的;用遗传物质失活的九孔鲍精子与盘鲍卵子授精,在授精后10 min,用浓度为1.0 mg.dm-3的CB持续处理受精卵24 min,表观三倍体率达65%以上,表观四倍体率达5%左右.稚鲍的倍性检查中,雌核发育多倍体占总多倍体数的80%,杂交多倍体占20%.盘鲍异源雌核发育的三倍体率达到93%,四倍体率为3%左右.     

蛋白激酶C在卵母细胞减数分裂成熟和受精中的作用

蛋白激酶C(PKC)是一类广泛分布在真核细胞中的单链丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,在卵母细胞成熟和受精的多个环节发挥着重要调节作用.在卵母细胞成熟过程中,PKC的作用决定于它存在的位置:卵丘细胞中PKC的激活能够促进卵母细胞恢复减数分裂,而卵母细胞中PKC的激活却抑制自身的生发泡破裂.PKC活性在卵母细胞成熟过程中逐渐升高,在第一次减数分裂中/后期转换时活性下降,使卵母细胞得以排出第一极体,进入第二次减数分裂.在哺乳动物卵子的受精过程中,PKC可能作为钙离子的下游靶分子,引发皮质颗粒的排放,并使卵子突破MII期阻滞,形成原核.PKC还参与调节其他重要蛋白激酶,如成熟促进因子(MPF)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性.目前已经在哺乳动物卵子中发现多种PKC亚型,其中经典型PKC可能在卵皮质反应中发挥最主要的作用.结合作者的工作,对目前已知的PKC在减数分裂与受精中的作用进行了评价和展望.     

冷藏于4℃的小鼠卵母细胞的受精能力研究

本研究探讨了冷藏于4℃的小鼠卵母细胞的受精能力，NIH雌鼠用10单位的PMSG和10单位的HCG进行超排。卵母细胞和卵丘细胞复合物（OCC）从小鼠输卵管收集，然后，OCC团块转移到Whittingham’s液进行体外受精，或移入Whitten’s液进行冷藏。精子从成熟的雄性小鼠的附睾尾挤出并孵育在37℃中获能。用于体外受精的卵子分为3组。新鲜的卵子是注射HCG后13h收集而得。19h的卵子是注射HCG后19h收集的。冷藏的卵子是在注射HCG后13h收集，并藏存于4℃水浴中6h。授精后观察卵子的结构形态、极体和卵裂情况。授精后次日卵发生卵裂作为受精发生…     

北京油葫芦卵子发生的观察

对北京油葫芦(Teleogryllus emma Ohmachi & Matsuura)卵子发生过程进行了系统观察和研究.结果表明,成虫期卵子发生可明显的分为卵母细胞分化、生长及卵黄形成三个时期,并可分为七个阶段.第一阶段,卵母细胞位于卵原区,进行第一次减数分裂的前期.第二阶段,卵母细胞核内核仁消失,滤泡上皮细胞开始分化.第三阶段,滤泡上皮细胞有丝分裂形成单细胞层包围在卵母细胞外,之后滤泡上皮细胞形成双核的柱状体.第四阶段,卵母细胞胞质的周缘有泡状小体出现,随后卵黄小颗粒开始在胞质周缘沉积.第五阶段,卵母细胞积累大量卵黄物质,胚泡膜界限变的模糊.第六阶段,卵黄积累完成,胚泡消失,滤泡上皮细胞又成为扁圆形.第七阶段,卵黄膜和卵壳形成,卵子发育成熟.     

大鲵精子入卵过程的扫描电镜观察

采用扫描电镜观察了大鲵精子的形状,受精过程中卵壳膜的变化,及精子入卵的过程。人工催产的精子头部具有棒状和辣椒状两种形状,卵壳膜随着受精时间的变化而出现皱褶,沟与嵴,受精完毕,皱褶消失。大鲵属于多精入卵,精,卵相遇６０ｓ,精子接触卵膜,受精７５ｓ精子头部一半进入卵内。授精９０ｓ精子头部和颈部完全进入卵内,但精子尾部留在卵外面,授精２ｍｉｎ,,受精完毕。     

静水压休克诱导近江牡蛎三倍体的发生

用静水压休克诱导近江牡蛎（Ｏｓｔｒｅａｒｉｖｕｌａｒｉｓ）三倍体的产生。静水压处理使受精卵的减数分裂纺缍体解体，处于中期Ⅰ和后期Ⅰ受处理的受精卵可恢复形成三、四极纺缍，之后产生两个单倍性雌原核而发育为３ｎ－１ｐｂ；处于未期Ⅰ和中期Ⅱ期与处一后期Ⅱ期和未期Ⅱ受处理的受精卵可不恢复形成纺缍体，分别产生一个二倍性雌原核或两个单倍性雌原核而发育为３ｎ－２ｐｂ．２７℃下受精卵减数分裂的同步性较高．在授精后２６ｍｉｎ或３６ｍｉｎ以２３０ｋｇ／ｃｍ２的静水压持续处理１５ｍｉｎ，分别得到３ｎ－１ｐｂ（４８％）和３ｎ－２ｐｂ（６２％）的诱导峰值．实验表明，压力的起始时间应选择在减数分裂后期Ⅰ或后期Ⅱ．本文还解释了四倍体和五倍体的形成机理。     

国外期刊亮点

正新技术有望阻断线粒体遗传病复旦大学医学神经生物学国家重点实验室沙红英、朱剑虹课题组,联合安徽医科大学曹云霞团队,在探索遗传性线粒体疾病治疗研究方面取得突破性进展。相关研究论文6月19日发表于Cell上。极体是卵子在减数分裂过程中排出卵包膜外的"小细胞"。沙红英等研究人员以极体的生物学特性为理论基础和出发点,用极体中的遗传物质代替胞浆内的遗传物质,在2种不同线粒体遗传背景的小鼠之间进行线粒体置换研究。研究结果显示第一极体置换产生的子一代小鼠及其衍生的子二代小鼠体内仅含卵胞浆供体小鼠的线粒体,在最大程度上避免了异质线粒体DNA。同时,研究人员在小鼠上将极体移植、原核     

中国对虾胚胎发育期卵的形态变化

通过对中国对虾胚胎发育时期卵的形态变化的观察，提出因受内分泌系统调节的启动作用，使卵的成熟、排卵、排精得到协调统一；精子入卵的时间是在卵的第二次成熟分裂中期，表现出第一极体位于受精膜之外，第二极体位于受精膜之内，与资料记载有差异。     

中华稻蝗卵子发生的观察

对直翅目蝗总科中华稻蝗[Oxya chinesis(Thunberg)]卵子发生过程进行细胞学观察及阶段划分，成虫期卵子发生可分为卵母细胞分化、卵母细胞营养及卵母细胞卵黄形成3个时期，并且可划分为8个阶段：第l阶段，卵母细胞位于卵原区，进行第一次减数分裂前期；第2阶段，卵母细胞增大，滤泡上皮细胞开始出现；第3阶段，滤泡上皮细胞呈扁平状排列为一层包围在卵母细胞外，卵室内有空隙；第4阶段，滤泡上皮细胞呈立方形，卵室内无空隙，胚泡向卵质周缘移动；第5阶段，卵母细胞体积增大，滤泡上皮细胞长柱状，细胞间开始出现空位；第6阶段，卵母细胞胞质周缘有泡状小体出现并有卵黄颗粒积累；第7阶段，卵母细胞胞质内充满了染色较深的卵黄球，卵黄物质逐渐被卵黄膜包被，胚泡膜消失；第8阶段，卵黄积累完成，滤泡上皮细胞分泌卵壳蛋白凝聚固化而成为卵壳。     

小鼠精子微注射受精卵的体外发育与移植的研究

用显微注射方法,将精子注入小鼠卵母细胞卵周隙中,使精卵体外受精获得受精卵。并对精子注射后卵母细胞的成活率、受精率和受精卵的发育率以及移植后受胎率等方面进行了系统的研究,结果表明:卵子存活率为75.36％(1309/1737),其中264枚卵裂,受精率为20·17％(264/1309),卵裂卵经体外培养后有192枚发育到桑椹胚及胚泡期,发育率为72.73％(192/264)。将其中73枚(桑椹胚10枚,肛泡63枚)胚胎移植到10只假孕受体子宫中,一只受体妊娠产仔9只,仔鼠发育正常。     

第一次减数分裂期小鼠卵母细胞的化学去核

过免疫荧光染色法确定了小鼠第一次减数分裂的进程,在此基础上分别用脱羧秋水仙碱和放线菌酮处理成熟培养的小鼠卵母细胞,抑制其纺锤体极间微管的延长和降低成熟促进因子的浓度,使其核物质随极体全部排出.结果表明:(1) 卵母细胞从有腔卵泡中分离时处于生发泡期,可见核仁;成熟2h内则全部发生生发泡破裂;培养5h,90%到达第一次减数分裂的前中期;培养8h,则33.3%处于中期;71.4%的细胞在成熟12h后发育为后期;第二次减数分裂的中期则于成熟培养15h发生.(2) 于成熟的不同时间取卵母细胞-卵丘细胞复合体进行去核处理后发现,体外成熟培养5h(即卵母细胞处于第一次减数分裂前中期时进行处理),其去核率最高,达85.6%;成熟5h之前各组随成熟培养时间的延长而去核率升高,之后各组则降低.(3) 比较卵母细胞-卵丘细胞复合体与自然裸卵去核率,后者效率为56%,显著低于前者(p＜0.05),因此该方法在卵母细胞-卵丘细胞复合体的完全去核率与传统的物理去核方法相当.     

合浦珠母贝卵子成熟的细胞学观察

用细胞学的方法对合浦珠母贝卵子在体内和体外的成熟过程进行了观察，结果发现：性腺内发育的卵子大多停留于第一次减数分裂的前期，处于排卵状态时，性腺内卵子进一步发育至第一次减数分裂的前中期，解剖性腺取出的卵子能在海水中继续发育达到第一次减数分裂中期，氨海水能够促进这一发育过程。自然排放的卵子在刚刚接触到海水时仍处于第一次减数分裂的前中期，它们的进一步成熟，即发育至第一次减数分裂中期是在海水中完成的，文中     

金鱼受精过程超微结构研究的快速半薄切片定位

介绍一种适于金鱼受精过程超微结构研究的快速半薄切片定位方法。经Ｅｐｏｎ８１２包理的受精卵，切０．１５～０．５μｍ厚的切片，用甲苯胺兰Ｏ－派若宁Ｂ染液在酒精灯上烤染后镜检，整个过程在５ｍｉｎ内完成。用此方法可将受精后至第一次卵裂前各时期的精子头、卵子染色体及雌雄原核找到并可进一步用于超微结构研究。     

滇池高背型鲫鱼雌核发育的研究

滇池高背型鲫鱼是三倍体的雌性种群。杂交实验证明,它的成熟卵球,能被不同亚科、不同属的鱼类以及种内二倍体鲫鱼、金鱼等的精子激活而进行雌核发育、並孵出正常的鱼苗。受精细胞学也证明,同种或不同种鱼的精子都能进入卵内;但入卵后不形成雄性原核,更没有与卵的雌性原核相结合,卵裂的核只是卵核本身,所以可以断定,滇池高背型鲫鱼的生殖方式是雌核发育。不过受精中,雌雄原核虽无结合,却出现两个雌性原核的结合,我们推测他们是极体融合的结果。这个现象,在他人有关鱼类雌核发育的报告中,都未见报道。这究竟是个必然现象还是个偶然现象,尚须进一步研究证实。     

入卵过程中太平洋牡蛎精子超微结构的变化

本文研究了精子入卵过程中太平洋牡蛎精子超微结构的变化规律。研究表明，精子入卵过程分为4个时期：顶体反应期、穿卵前期、穿卵期和融合期。顶体反应期，精子顶体物质释放，顶体致密部分向外延伸，形成1层保护膜，亚顶体腔开始向顶端突起；穿卵前期，亚顶体腔前突形成顶体锥，并向卵膜释放亚顶体物质，精子外膜后移；穿卵期，精子核及线粒体进入卵膜形成的受精锥，线粒体数量减少，顶体突消失，精子外膜和尾部脱落；融合期，精子核进入卵内与质膜融合，核解体。     

杂色鲍♀×盘鲍♂合杂交受精的细胞学研究

应用组织学方法。研究了杂色鲍♀×盘鲍♂舍种间杂交受精过程的核相变化。结果表明杂色鲍♀×盘鲍♂种间杂交受精主要表现出两性融合的特点．盘鲍精子进入杂色鲍卵子。9min后中心粒发育为星光；精子头部逐渐膨大、液化形成雄性原核，39min后与雌性原核会合，而后融合．约3．2％的受精卵中观察到1个受精卵中同时存在3个即将融合的原核，这可能是多精入卵或卵子染色体组自发加倍的结果．42min后开始第1次有丝分裂。此时在极个别发育卵中发现固缩的染色质小体、微核、或分离不同步的染色体．