结晶胰岛素的全合成 Ⅰ.序言

世界上第一次用人工方法合成的蛋白质已经于1965年在中华人民共和国诞生了。这是我国科学工作者高举毛泽东思想伟大红旗,在奋力攀登世界科学高峯、赶超世界先进科学水平的伟大进军中,为祖国人民在理论科学研究方面爭得的一项世界冠军。人工合成胰岛素的成功,是人类在认识生命、揭开生命奥秘的伟大历程中又迈进了一大步,它标志着人工合成蛋白质的时代已经开始。胰岛素人工合成工作,是大跃进的产物。1958年全国轰轰烈烈、热火朝天的大跃进形势,激发了我们全体同志的革命干劲,大家     

结晶牛胰岛素的全合成

在这篇简报中,我们将初步报告由于我们三个单位五年以来的通力协作最近获得有关全合成结晶牛胰岛素的研究成果。胰岛素的壹级结构是在十年前由Sanger等搞清楚的。近两年来有关胰岛素合成方面,已有不少报导。Katsoyannis等报导了羊胰岛秦A及B锭的合成,并按Dixon和Wardlaw的重组合方法,将所合成的A及B链进行组合,只能观察到微弱的胰岛素活力。Zahn、Meienhofer等从他们所合成的羊胰岛素的A及B链衍生物经钠氨处理脱去保护基因     

Ⅱ.从天然胰岛素A及B链重合成结晶胰岛素

天然胰岛素的拆合(以下简称拆合)就是指:用化学办法将天然胰岛素分子的三个硫硫键打开,将胰岛素分子分为沒有生物活力的A、B两条肽链,然后,经过适当处理使此两条链在试管內,重新通过硫硫键接合起来,成为与天然胰岛素生物活力相同的分子。这一工作的过程简单表示如下(图1):     

Ⅲ.胰岛素A链的合成及其与天然B链组合成结晶胰岛素

牛胰岛素A链是由廿一个氨基酸所组成的一条肽链。它共合四个半胱氨酸,其中二个与其它四个氨基酸通过硫硫键形成一个廿员环,另外两个与B链中的二个半胱氨酸通过两个硫硫键连结(图1)。一般胰岛素的种属差异性主要表现在A链中第8,9,10上的氨基酸有所不同,例如牛胰岛素A链第9位是丝氨酸,而在羊胰岛素则为甘氨酸。     

Ⅳ.胰岛素B链的合成及其与天然A链组合成结晶胰岛素

自从天然胰岛素的A及B链重合成结晶胰岛素成功以后,接着又证明天然胰岛素先经钠-液氨处理,再经过S-磺酸化、还原及重氧化等步骤也有约5％的胰岛素活力恢复。因此,人工合成胰岛素的工作就有可能从化学合成A及B链入手。胰岛素B链是由三十个氨基酸基按下列次序排列的三十肽(包括十六种不同的氨基酸):     

Cembrene-C的全合成

Cembrene-C(1)是一个具有14元碳环结构的天然大环二萜类化合物,通过Cembrene-A(2)的异构化可以检测到微量的1,但转化率极低。全合成的工作尚未见报道。     

胰岛素B链的合成及其与天然A链重合成结晶胰岛素

前文中报导,我们曾经合成出和Sanger所提出的胰岛素B链氨基酸顺序相同的卅肽S-磺酸化衍生物,它与天然A链重组合后,能表现最高达4％的胰岛素活力。现在,我们又在合成方面作了一些改进,所得的B链S-磺酸化衍生物与天然A链进行重组合,能表现出较高的生物活力,而且此氧化粗产物经仲丁醇-醋酸抽提后,已经获得形状与天然胰岛素完全相同的结晶(图1)。重结晶产物的活力为25个国际单位/毫克(表1)。根据此结果,加上其它的一些分析数据,可以充分说明我们已经完成了胰岛素的半合成工作。     

山莨菪碱的全合成研究

山莨菪碱(Anisodamine)是从唐古特山莨菪植物[Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher]地上部分提取分离出来的一个茛菪类生物碱,为6(S)羟基莨菪碱(Ⅷ)。其氢溴酸盐在无水乙醇中结晶,可得二种晶形:针     

高稳定性人胰岛素的晶体学研究——Ⅰ.A21-Ser突变体的结晶和初步晶体学分析

早就发现,胰岛素在酸性溶液中是不稳定的。其主要不稳定因素,是A链C末端残基Asn对酸水解特别敏感,极易发生脱酰胺反应并形成共价连接的二聚体。由于医用胰岛素制剂的重要部分是酸性溶液,因此这构成在临床应用上药剂纯度和保存中的重要问题。特别是近年来,通过蛋白质工程途径获得了一些可溶性长效胰岛素,它们都是酸性条件下的制剂,在过渡到实际应用时都需要解决A21-Asn脱酰胺反应所产生的不稳定问题。丹麦Novo研究所的Markussen等人运用基因定点诱变方法研究了一系列A21位残基取代的突变体人     

dl—喜树碱的全合成

喜树(Camptotheca acuminata)是珙桐科(Nyssaceae)乔木,为我国所特有.华南各省分布较广,资源丰富.1966年Wall等从喜树中分离得抗肿瘤有效成分喜树碱(Campto-thecin,I),并确定其化学结构.喜树碱是一种含有五个环的化合物,结构较为特殊,具有明显的抗肿瘤活性.因此引起许多合成工     

美登醇的全合成

美登醇(1)是美登素类化合物(Maytansinoids)(2)的共同母体,后者为前者的酯类,普遍显示抗癌作用。美登醇已由日本学者经发酵途径大量获得并转变成美登素类化合物。美登醇的复杂结构是对有机合成化学家的挑战,Corey和Meyers二研究集团首先完成了全     

自合成的A链与天然B链合成结晶牛胰岛素

本文扼要报导自合成的A链S-磺酸衍生物与天然B链S-磺酸衍生物给合而获得结晶牛胰岛素。前文报导后,我们在A链的合成以及最后半合成产物的纯化方面都作了改进。牛胰岛素A链羧端十二肽Ⅰ,即:N-苄氧羰基缬氨酰-S-苄基半胱氨酰-丝氨酰-亮氨酰-酪氨酰-谷氨酰胺酰-亮氨酰-谷氨酰-天门冬酰胺酰-酪氨酰-S-苄基半胱氨酰-天门冬酰胺,曾从下述两种合成途径获得:(1)已知的三肽酰肼     

铂族元素的分析 Ⅴ.铂族元素的离子交换纤维素纸层析

有关铂族的阴离子交换行为的工作是很多的等进行过阳离子交换柱层析的研究,据报导,只有Stevenson的工作解决了非挥发性铂族的多元混合物的分离问题。本文利用国产新华牌(1号,快速)经磷酸化滤纸(铵型),以希矿酸和盐类作展开剂,试液为0.5N矿酸,采用上行法研究了铂族的交换行为。结果证明,很容易分离三元以上混合物,而且斑点集中,展开迅速。实验结果:展开剂酸度、氯离子浓度以及盐类     

电子酸性催化剂双重性的研究 Ⅴ.不同金属组份的影响

前报报导了担体酸性对三类催化剂的影响。本报旨在研究不同金属组份(以下简称金属)的影响。以共胶球硅铝为担体,用浸渍法制备了六种催化剂(相应金属含量同前报,因皆为工业上常用的含量,故不予统一);并比较其性能及性质,然后结合前几报结果进行讨论与总结。实验方法与前报相同。结果如表1及图1所示,可见各种催化剂的表面积相差不大,故便于比较其性能。以下分五方     

肉芝软珊瑚素的全合成

肉芝软珊瑚素(Sarcophine,1)是一个具有14元碳环结构的天然大环二萜内酯类化合物,毒性很大,并有多种生理活性,是珊瑚本身一种有效的化学保护剂。作者首次成功地进行肉芝软珊瑚素的全合成。     

(±)-Echinodol的全合成

Echinodol(l)是1993年由Hartmann等从生长于巴西的一种药用植物(Echinodorusgrandiflorus)的叶子中分离鉴定出的含羟基的西松烷(Cembrane)型大环二萜天然产物.它是具有显著抗肿瘤活性的大环二萜天然产物Sarcophytol-A(2)的异构体.有关1的生物活性试验及其全合成尚未见文献报道.文献[3]中我们曾报道了1的前体化合物的合成,本文报道其全合成.我们以全反式     

酵母丙氨酸转移核糖核酸的全合成

自1979年10月在上海举行的中、西德核酸和蛋白质学术讨论会上报道酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA~(ala))3′端半分子中三个寡核苷酸片段(36—45、46—57和58—76)的合成,以及1980年5月在西德汉堡埃格斯道夫召开的化学合成核酸国际讨论会上报道3′端半分子(36—76核苷酸)的合成以来我们又相继合成了5′端半分子的寡核苷酸片段(1—13、14—22和23—35)(图1).此后,根据合成3′端半分子的经验,仍采用T_4—RNA连接酶逐个连接大     

长效胰岛素研究——(Lys-B_(31)-NH_2)-胰岛素的结晶和初步晶体学分析

天然胰岛素在酸性溶液中是一种短时效制剂,直接用于糖尿病患者需一天注射几次。因此,寻求长效制剂从一开始就是胰岛素临床应用提出的实际课题。经过相当时间的探索,已有一些长效制剂成功地用于临床。但目前广泛使用的长效胰岛素大多是通过引入外源蛋白和有机化合物(如鱼精蛋白胰岛素),或改变胰岛素的物理状态(如结晶Zn-胰岛素)来产生长效效应。由于含有外源因素,这类制剂在实际应用中有明显的缺点,如产生免疫反应、过敏反应、毒性等。蛋白质工程的出现,促使研究者努力通过胰岛分子本身的改造去寻求新型长效制剂,其主要特点是通过分子内在因素制导产生长效性,而无需外源物。为此目的,我们从1987     

碱性氮化合物在裂化催化剂上的吸附 Ⅴ.吸附与中毒作用

本工作針对我国頁岩油催化裂化时催化剂中毒問題,根据以往工作的綫索,通过研究吸附作用力与中毒原因,以及催化剂的抗氮性能,来寻找解决这个問題的途径。主要研究了各种五碳、六碳的氮化合物,以及几种胺类化合物;苏联制共胶球状硅鋁(簡称共胶球)、自制氧化鋁含量30％(簡称BM-30)和50％(簡称BM-50)的混合法硅鋁,以及其他催化剂的吸附与中毒作用及其間的关系;此外,也研究了     

质谱中的立体化学效应——Ⅴ.用反应质谱法检测有机化合物的手性

近十年来,应用质谱法研究立体化学已成为热门课题。然而,在通常条件下,对映体的质谱无差别(如图1所示)。迄今为止,尚无一种令人满意的途径借质谱法区别旋光异构体。在本文中,我们报道一种新方法——反应质谱法(简称RMS法)用于检测有机化合物的手性。