菠萝DNA导入黄瓜的初步研究

以菠萝为供体,黄瓜为受体,应用花粉管通道导入外源ＤＮＡ技术,在黄瓜自花授粉后直接导入菠萝ＤＮＡ,导入后代在产量、糖分含量等性状上产生了变异。结果表明：利用花粉管通道直接导入外源ＤＮＡ是改良黄瓜品种的有效技术,这一技术将在作物品种改良及远缘杂交方面起着非常重要的作用。     

青菜花粉管通道法导入外源DNA的研究初报

采用花粉管通道法，将青菜株系７５Ｆ５、１４号大白菜、紫阳等三个品种的总ＤＮＡ及质粒ｐＡｃｔ１－Ｄ ＤＮＡ导入青菜６０５品系，收获青菜种子。种子发芽后分别提取约两周苗龄的小苗总ＤＮＡ，并经ＥｃｏＲⅠ酶切，以ｇｕｓ基因片段为探针做子杂交，证实了外源ｇｕｓ基因已整合到青菜６０５品系中；田间观察还获得了一株与供体大白菜花形相似的变异株。     

基因工程与外源DNA导入技术

基因工程是把目的基因与适当的载体相连接形成重组ＤＮＡ, 并引入到适当的寄主细胞中进行复制和表达; 外源ＤＮＡ 导入技术是将供体总ＤＮＡ的片段, 在自花受粉后一定时期内, 使其沿着花粉管通道或其他方法进入胚囊, 转化受精卵或其前后的细胞． 基因工程方法思路清晰、原理清楚、目的明确, 但操作繁琐, 费用高; 外源ＤＮＡ导入技术简便易行, 费用低, 但目的性不强, 工作量大． 如将两种方法结合使用, 可降低费用, 提高整合率． 综述了两种方法的研究进展情况及在实际应用中所取得的成果     

外源DNA导入麦类作物结实率的研究

以普通小麦和硬粒小麦为受体、以亲缘关系不同的7个材料作供体，研究了花粉管通道法转化植株的当代结实率。结果表明：（1）受体为普通小麦时，在授粉后4-8h转化植株的结实率较高；受体为硬粒小麦时，时间上较为分散。（2）不同供体的转化植株的结实率差异较大；不同浓度的外源DNA导入后的当代结实率也存在较大的差异。（3）在不同的缓冲系统中，PBS系统的转化植株的结实率高于SSC和TE系统。由此可知，在不同条件下，利用花粉管通道法转化植株，其结实率受到一定的影响。     

作物外源总体DNA导入技术及研究概况

对国内外作物外源总体ＤＮＡ导入技术及研究进展进行了综述。介绍了ＤＮＡ的制备，ＤＮＡ浓度、纯度及活性的鉴定，外源总体ＤＮＡ导入的方法及后代鉴定等主要技术环节。总结了该项技术所取得的成就及应用前景。     

外源DNA导入技术在小麦改良中的应用研究

研究表明:(1)外源 DNA 导入技术应用于转移抗病基因是有效的;(2)外源DNA 导入后代常常会产生意想不到的特殊类型,为新种质创造开辟了一条新途径.     

大豆自花授粉后外源DNA导入技术的验证

以花生DNA为供体,大豆为受体,在大豆自花授粉后,采用液滴法和注射法导入花生DNA,在受体大豆植株后代中获得了多种变异类型。为探讨外源DNA 导入技术的可靠性,将具有卡那霉素抗性基因的质粒pCaMVneo 用同法导入大豆。所收获的种子发芽后培养于一定浓度的卡那霉素溶液中,其中部分植株对卡那霉素表现抗性,可继续生长发育。分株提取这些植株的DNA,以质粒DNA 为探针,进行斑点杂交.供试的14个植株中出现了13个阳性斑。实验结果证明质粒DNA 已整合到大豆基因组中并获表达,从而间接地证实了授粉后通过花粉管通道导入外源DNA 的技术是可靠的。     

Construction of a genetic map with SRAP markers and localization of the gene responsible for the first-flower-node trait in cucumber (Cucumis sativus L.)

Cucumber (Cucumis sativus L.) is an annualclimber originated from the tropic rain forest area inthe south of Himalayas, which belongs to the Cucur bitaceae family. Cucumber is one of the importantvegetables in the world, and its planting area is sec ond only to that of tomato[1]. However genetics re search on cucumber obviously drops behind that of thelatter. The classic genetic map of cucumber, with sixlinkage groups, is composed of more than 100 genesfor color, morphology, and dise…     

黄瓜随机扩增多态DNA(RAPD)研究初报

以异丙醇沉淀法提取的10个黄瓜亲本叶片的总DNA为模板,进行28个10-mer随机引物的RAPD分析,共产生252条带,其中10个引物共产生出21条多态性带,其它18个引物无多态性指纹     

Localization of genes for lateral branch and female sex expression and construction of a molecular linkage map in cucumber (Cucumis sativus L. ) with RAPD markers

A cucumber ( Cucumis sativus L. ) molecular linkage map, including 79 random-amplified polymorphic DNAs (RAPD)and two genes , lb for lateral branch and f for female sex expression, is constructed from a cross between a line, S52, with weak lateral growing ability and staminate from Dabieshan Mountains area in China and another line, S06, with strong lateral growing ability and gynoecious from Europe. The map contains nine linkage groups and spans 1110.0 cM with an average distance of 13.7 cM between loci. The lb locus is located in a longer linkage group LG-2 and flanked by two markers, OP-Q5-1 and OP-M-2-2, at 9.3 cM and 15.9 cM, respectively. In the meantime, the RAPD loci, OP-Q5-2 and BC151, in a short linkage group were found to flank f at 13.7 cM and 13.4 cM,respectively. The construction of RAPD map has paved a way for further study of the genes for lateral branch, female sex expression and other agronomic traits in cucumber.     

黄瓜亲本间分子遗传距离与杂种优势的相关性

选用10个黄瓜亲本,通过RAPD分析计算其分子遗传距离,然后配制遗传距离大,中,小的杂交组合15个,田间测定它们的16个园艺性状,对所得园艺性状数据进行统计分析,并计算园艺性状与分子遗传距离间各种相关曲线的相关系数,结果发现,黄瓜园艺性状与分子遗传距离间的各种相关曲线中,以抛物线的相关系数最优,其中座瓜率,收获始期与分子遗传距离的抛物线相关系数存在着显著相关性。     

黄瓜杂交种子纯度的RAPD鉴定

鉴定和分析了黄瓜品种真实性，并建立了应用于鉴定亲本及其杂交种子的RAPD指纹图谱。从102条引物中筛选出了应用于黄瓜种子纯度鉴定的引物32条：13条偏母型引物，9条偏父型引物，5条互补型引物，2条特异型引物及3条缺失型引物。利用4条引物S293，SS87，S297，S300鉴定3份黄瓜种子的纯度，在94粒种子中有父本混杂2粒，母本混杂1粒及6粒其它种子混杂，从而表明该份黄瓜种子的纯度为90．04％。建立了黄瓜早青二号父本T03雄性系、早青二号母本B35雌性系以及其杂交种子的RAPD的指纹图谱。     

导入野生大豆DNA小麦后代的农艺性状研究

用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦，获得了转基因小麦，其后代的农艺性状有较大的变化。田间实验分析了变异系小麦植株与对照植株在叶片的光合速率、蒸腾速率、叶面积及株高、穗粒、穗重等性状上的差异。t检验结果显示，变异系小麦在叶面性状及产量性状上的差异是显著的，外源DNA的导入改善了植物的农艺性状，并在后代中表达，为选育高产、优质的新小麦品种提供了依据。     

黄瓜全雌性状相关的RAPD分子标记筛选

用CTAB法提取黄瓜总基因组DNA,采用RAPD技术探寻与黄瓜全雌性相关的分子标记.共筛选39条随机引物,其中有12条引物显示多态性.进一步筛选表明：S10引物能在全雌系黄瓜中扩增出一条约2000 bp的稳定、清晰的特异条带,而在雌雄同株的单株中不存在.经回收、克隆并测序,获得全长2003 bp的序列.在NCBI上进行Blast分析,表明为新发现序列,含有编码62个氨基酸的开放阅读框.其编码短肽的功能尚不确定.