绵羊早期胚胎半数卵裂的活力

研究了埋入外源透明带的2—C期胚胎的单个卵裂球、4—c胚胎的双卵裂球、8—c胚胎的四卵裂球的发育能力。经过显微技术操作把半数卵裂球胚胎埋入微型的柱状琼脂中,移植到发情周期第2—8天,被结扎输卵管的母羊输卵管中。并在胎龄为51/2一61/2天时回收胚胎。     

哺乳动物胚胎干细胞的特性及利用

哺乳动物胚胎干细胞（ES细胞）是由动物早期胚胎发育的内细胞团（ICM）或原始生殖细胞（PGC）分离得到的。人们利用ES细胞所具有的全能性、体外分化以及稳定的遗传性能等特点，展示了ES细胞在建立哺乳动物的早期胚胎体外分化模型、转基因动物模型、器官和组织的修复和移植治疗、克隆动物的生产、发育生物学的研究等方面广阔的应用前景。但是，由于哺乳动物错综复杂的基因调控和环境因素的影响，对于胚胎干细胞的研究还存在诸多问题，还需作更深入细致的研究。     

哺乳动物胚胎心肌细胞间隙连接的超微结构研究

用超薄切片技术研究了家兔和大鼠胚胎心肌细胞间隙连接(GJ)的超微结构.发现与多种成熟和新生的哺乳动物心肌细胞中观察到的类同:在家兔和大鼠的胚胎心肌细胞中有一种被称为结合GJ小泡(GJAV)结构;已组装好的GJ有环状和线状2种,并有一些GJAV正连环组装环状的GJ.分析并探讨了心肌细胞GJ的组装特点.     

鱼类早期胚胎发生及环境影响

本文根据大量文献系统地综述了鱼类包括无颌类、古老硬骨鱼类、软骨鱼类和真口类的早期胚胎发生过程和理论,发育的生物化学,以及各种环境因子(氧、温度,盐度、pH、生殖隔离、微量元素、化学毒物和辐射线等)对鱼类胚胎发育的影响。文章强调了鱼类中胚层发育的后成论假说。同时指出,底锵胚胎通常可以作为监测异生化物对发育影响的适用模型系统。引用文献92篇,附图9幅。     

黄山松种子发芽率及活力的测定

采用综合逆境法、对采自安徽黄山风景区的黄山松种子进行发芽率及综合逆境活力的测定。结果表明：黄山松种子的发芽率为２１．６％,综合逆境活力为１５．５％,黄山松种子的发芽率及种子活力均较低,在一定程度上影响了黄山松的繁殖和更新能力。     

纤维素酶活力的测定

本实验是用改良梅尔茨法测定纤维素酶的活力,在ｐＨ＝５．２,Ｔ＝３０℃,ｔ＝１６ｈ的条件下,测得纤维素酶的活力为１０００－１２００ｕ／ｇ之间。     

奶牛胚胎早期死亡的预防

怀孕母牛流产原因很多，如习惯性流产、损伤性流产等，但多数属胚胎早期死亡，死亡率可达20％。30％．胚胎早期死亡大致可分为两个时期．一是在配种后的8一12天之间．另一个足在配种后40天左右。这是冈为母牛正常发情周期为20-21天，如果母牛配种后经30天左右和40天以上出现再发情现象的，这就可以认为这些母牛具有胚胎早期死亡的可能性。     

非极性表面活性剂对小鼠早期胚胎冷冻保护作用的初步研究

许多研究者报道了某些非极性表面活性剂在防止蛋白质低温冷冻变性方面有着明显的效果．本研究就某些非极性表面活性剂对胚胎的防冻作用作了初步探索．方法是分别将不同浓度的两种表面活性剂Ｐｏｌｙｓｔｅｎ２０（Ｐ２０）和ＳＹ－ｇｌｙｓｔｅｒＭＬ－７５０（ＭＬ７５０）添加于改进的磷酸缓冲液（ＰＢ１）和本研究采用的防冻液（ＦＳ：ＰＢ１＋３ｍｏｌ乙烯二醇＋０．２５ｍｏｌ乳糖）中，处理小鼠早期胚２０ｍｉｎ后培养并观察对胚胎发育的影响，以确定它们对胚胎的临界安全浓度（ＣＳＣ）．在ＰＢ１中，两种表面活性剂的ＣＳＣ值均为０．５％，而在ＦＳ中，则为０．０５％．然后将两种表面活性剂Ｐ２０和ＭＬ７５０分别以０．０５％和０．０３％两种浓度添加于ＦＳ中，以ＦＳ作为对照组．在室温下平衡处理小鼠桑椹胚和早期囊胚５ｍｉｎ后连同防冻液一起装入塑料冷冻细管中．在液氮蒸气（－１７０℃）中预冷冻１ｍｉｎ后即投入液氮内保存．在３８℃水浴中快速解冻并去除防冻剂后在Ｗｈｉｔｔｅｎ培养液中培养２４ｈ．分别观察和统计冷冻－解冻胚的形态正常率和发育率．结果表明：处理组与对照组在冷冻－解冻胚形态正常率方面无显著差异（Ｐ＞０．０５），而添加０．０３％Ｐ＿２Ｏ或ＭＬ７５０的两     

木聚糖酶的活力测定体系

木聚糖酶作为饲料添加剂可以提高畜禽生产的经济效益,但其活力的测定一直没有相应的国家标准。本文从测定体系方面对木聚糖酶活力的测定进行了研究。     

NestinCK19及PCNA在早期胚胎组织中的表达

目的：研究Nestin CK19及PCNA在胚胎早期组织器官的分布。方法：对6～10w的胚胎组织采用免疫组化SABC法染色观察。结果：胚胎6w时肝脏内血细胞前体细胞Nestin阳性；7w时肝、椎间盘及皮肤有Nestin的表达，导管上皮组织开始出SECK19阳性反应。PCNA的表达出现在肝脏，9w时表达达到高峰。结论：Nestin CK19及PCNA在胚胎早期发育过程中对肝、椎间盘、皮肤等器官组织的发育可能起着调控作用。     

配子及早期胚胎发育过程中的染色质高级结构

细胞核内染色质的空间高级构象影响基因的转录调控,进而影响基因功能.近年来,由3C技术衍生而来的"C"方法,结合二代测序技术,尤其是Hi-C技术的出现和发展,为我们研究细胞核内高分辨率的染色质高级结构提供了强有力的平台.在胚胎发育过程中,基因表达的时空调控是生命个体正常生长发育的关键,而染色质结构正是调控这一过程的基础.精子和卵子的染色质构象截然不同,精子染色质高度压缩,呈现高频率的染色体间相互作用和超长距离的染色体内相互作用.MII期卵母细胞处于分裂中期,没有明显的TAD和compartment之分.受精之后,全能性的受精卵结构松散,随着发育进程逐渐压紧,其染色质高级结构的建立不依赖于受精卵基因组转录的激活,而是依赖于基因组的复制.接下来,我们对早期胚胎发育过程中染色质三维结构的变化进行详细归纳总结.     

大肠杆菌的培养及L-天冬酰胺酶活力的测定

讨论了大肠杆菌L-天冬酰胺酶发酵液酶活力的影响因素，筛选了大肠杆菌产酶的优化条件。发现了发酵液酶活力的最适pH随缓冲介质的变化而变化；甘氨酸介质中，pH6．50～9．50均适于酶活测定，且pH8．00时酶活最高；硼酸、Tris、磷酸介质中，在pH8．50时，酶活力依次下降；酶反应的适宜温度40～50℃．对菌株培养的研究表明，葡萄糖对产酶有抑制作用，适当提高摇床转速可使发酵液酶活力由原来的136U／mL增至145U／mL，在确定的最优培养条件37℃，pH7．00，250r／min下，产酶稳定期可持续12h。     

泥鳅早期胚胎细胞的超微结构变化观察

泥鳅早期胚胎细胞的超微结构变化。卵裂期，有些线粒体内含有片层状类脂物，或者含有糖原颗粒，有些线性粒体嵴呈同心圆状。在胚胎细胞中也有片层状类的，其中有些片层体内含有黑色糖原颗粒，类似于次级溶酶体；外包一层单位膜的卵黄颗凿起始含无定形的卵黄物质然后卵黄中间出现空泡，不久卵黄颗粒中一粒体，膜性物质核糖体样颗粒，糖原颗粒和小的卵黄粒。     

玉米种子的低温活力测定研究

为探索简便有效的种子活力测定方法,本研究以五岳津北288玉米种子为实验材料,探索玉米种子低温活力测定方法.通过标准发芽试验,10℃7d～25℃3d、8℃6d～25℃3d和5℃4d～25℃6d3种低温发芽处理方法和田间播种试验测定了玉米种子的活力情况,以寻求测定玉米种子活力的最佳方法.结果表明:种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数在不同老化处理之间差异显著,3种低温活力测定方法得出的发芽率均与田间出苗率呈显著正相关,与种子发芽指数相关性显著.其中8℃6d～25℃3d处理与田间出苗率相关系数最高,为0.993.5℃4d～25℃6d处理与标准发芽试验的发芽指数相关系数最高,为0.937.以上结果表明低温活力测定方法可以用于玉米种子活力检测.5℃4d～25℃6d的抗冷测定方法更适合用来预测玉米田间出苗情况.     

鱼类转基因早期胚胎细胞的核移植研究

像许多转基因高等生物一样,用显微注射方法研制的转基因鱼均为转植基因嵌合体,培育纯合转基因品系已成为研究者们向往和追求的目标.以澎泽鲫(Carassius auratus,Pengze var.)和黄河鲤(Cyprinus carpio,Huanghe var.)为实验材料,以转基因囊胚细胞核或原肠胚细胞核为供体,进行了细胞核移植.检测了转植基因在所获得的移核胚胎和5尾澎泽鲫移核鱼及1尾黄河鲤移核鱼中的存在状况,分析了用转基因早期胚胎细胞核移植方法研制纯合转基因鱼的可能性.     

绵羊受精卵(早期胚胎)的移植

将56个良种羊(细毛羊及三北羔皮羊)的受精卵,移植到55只与供体发情同步(发情后1—4天)的蒙古羊及杂种母羊体内。除一只母羊接受2个2—4细胞的受精卵外,其它54只每只只接受一个2—16细胞的受精卵。在术后20天之内,用试情公羊试情,受体如不再返情可判断为已受胎。在55只受体中除一只因故死亡外,已受胎者41只,返情者13只,移植受胎率为76％。41只受体母羊中,除一只因病死亡(尸检子宫角内有一胎儿)外,其余40只中有37只按予产期先后产羔,共产羔38只(其中一只产双羔),经鉴定全部为移植卵所发育成者,另3只由于早期流产造成空怀。     

小鼠早期胚胎的全胚原位杂交技术

目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术.方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检.结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中.结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测.     

小鼠早期胚胎不同移植方法的建立

目的建立小鼠胚胎移植技术,探索小鼠胚胎输卵管伞部移植、输卵管剪口移植和子宫移植技术要点,为进一步将该项技术应用到生物净化等领域提供参考数据。方法对4周龄C57BL/6雌性小鼠采用腹腔注射7.5 IUPMSG(孕马血清促性腺激素),48 h后腹腔注射7.5 IU HCG(人绒毛膜促性腺激素)进行超数排卵处理,并与C57BL/6雄鼠合笼,分别在见栓0.5 d、1.5 d和3.5 d取出相应胚胎,对所得胚胎进行筛选,将质量较好的胚胎选出,并将相应胚胎阶段(单细胞、2细胞、囊胚)移入同期发情并经KM结扎雄鼠交配刺激后见栓的KM假孕小鼠输卵管或子宫内,待妊娠生产后得到移植小鼠。结果对88只4周龄雌性C57BL/6小鼠进行超数排卵处理,见栓62只,共取得单细胞胚胎510枚、2细胞期胚胎400枚、囊胚35枚,采用输卵管伞部移植、输卵管剪口和子宫移植,共移植假孕母鼠43只,妊娠生产39只,产仔361只。结论输卵管伞部移植与输卵管剪口移植比较无显著差异,输卵管伞部移植对动物伤害较小,但对术者要求较高;输卵管剪口移植操作较快捷,但对动物损伤较大;子宫移植的妊娠效果最好,处于这一阶段的胚胎极易着床。