胞二磷胆碱抑制贮存红细胞溶血作用的研究

贮存红细胞溶血的主要原因,现认为与能量代谢障碍和膜结构功能有密切关系.前文曾报导胞二磷胆碱(简称CDP胆碱)能抑制贮存红细胞的溶血,而且其作用主要不是通过能量代谢.本文试从CDP胆碱与红细胞膜磷脂的关系等方面作一些探索. 将去除血浆的红细胞贮存于代血浆中,看到CDP胆碱仍能抑制溶血.经测定血浆磷脂的含量,也没有发现CDP胆碱血和对照之间有明显差别.此结果提示CDP胆碱抑制红细胞溶血的作用与血浆并无联系,排除了通过与血浆进行磷脂交换来更新红细胞磷脂,从而抑制溶血的可能性.此外,还测定了CDP胆碱血和对照的红细胞膜磷脂含量,并用薄板层析法测定了卵磷脂和神经鞘磷脂的百分含量.结果显示,实验组并不比对照有所增高,这也表明CDP胆碱对红细胞膜磷脂含量没有显著增进作用. 除CDP胆碱以外,CMP也具有抑制贮存红细胞溶血的作用,其意义值得作进一步研究.     

胞二磷胆碱对贮存红细胞溶血的抑制作用是否与能量代谢有关?

前文曾报导胞二磷胆碱(Cytidine Diphosphocholine,简称CDP-胆碱)有显著抑制贮存红细胞溶血的作用.为探讨CDP-胆碱的作用是否与嘌呤核苷类相同,也参与了细胞内的能量代谢,本文就红细胞贮存过程中的某些生化指标作了分析.我们将含有CDP-胆碱、并以酸性柠檬酸葡萄糖(简称ACD)抗凝的正常人血(CDP-胆碱最终浓度约为13mM)贮存于4℃,历8～10周.测定贮存过程中全血葡萄糖、乳酸和红细胞内酸溶性有机磷及无机磷的含量变化,并与对照比较.结果显示,CDP-胆碱在抑制红细胞溶血的同时,却对全血的葡萄糖消耗、乳酸生成及贮存过程中红细胞内酸溶性有机磷含量的下降、无机磷含量的上升均无影响,表明CDP胆碱抑制溶血的作用与能量代谢基本无关.此外,经测定贮存过程中红细胞去蛋白滤液的紫外光吸收图谱,也看到实验组与对照组完全一致,提示在本实验条件下,CDP-胆碱基本不进入红细胞内部.所有以上结果表明,CDP-胆碱抑制溶血主要不是通过参与细胞内的能量代谢而起作用,因此与嘌呤核苷类物质是完全不同的.根据以上结果,我们认为对CDP-胆碱抑制贮存红细胞溶血机理的研究应着重于细胞膜的结构和功能方面.     

胞二磷胆碱对贮存红细胞溶血的抑制作用是否与能量代谢有关?

前文曾报导胞二磷胆碱(Cytidine Diphosphocholine,简称CDP-胆碱)有显著抑制贮存红细胞溶血的作用。为探讨CDP-胆碱的作用是否与嘌呤核苷类相同,也参与了细胞内的能量代谢,本文就红细胞贮存过程中的某些生化指标作了分析。我们将含有CDP-胆碱、并以酸性柠檬酸葡萄糖(简称ACD)抗凝的正常人血(CDP-胆碱最终浓度约为13mM)贮存于4℃,历8～10周。测定贮存过程中全血葡萄糖、乳酸和红细胞内酸溶性有机磷及无机磷的含量变化,并与对照比较。结果显示,CDP-胆碱在抑制红细胞溶血的同时,却对全血的葡萄糖消耗、乳酸生成及贮存过程中红细胞内酸溶性有机磷含量的下降、无机磷含量的上升均无影响,表明CDP-胆碱抑制溶血的作用与能量代谢基本无关。此外,经测定贮存过程中红细胞去蛋白滤液的紫外光吸收图谱,也看到实验组与对照组完全一致,提示在本实验条件下,CDP-胆碱基本不进入红细胞内部。所有以上结果表明,CDP-胆碱抑制溶血主要不是通过参与细胞内的能量代谢而起作用,因此与嘌呤核苷类物质是完全不同的。根据以上结果,我们认为对CDP-胆碱抑制贮存红细胞溶血机理的研究应着重于细胞膜的结构和功能方面。     

胞嘧啶核苷二磷酸胆碱对贮存红细胞溶血作用的影响

为探讨红细胞溶血的机理,研究减少贮存红细胞溶血的方法,我们从红细胞膜结构功能的角度出发,设想在全血中添加一种与磷脂结构及磷脂代谢有关的物质——胞嘧啶核苷二磷酸胆碱(CDP-胆碱),观察它是否能对溶血产生影响,并进一步研究其作用机理.结果证明:CDP-胆碱的存在可显著减少贮存过程中红细胞的溶血,并可增强贮存红细胞对保温及低渗的抵抗能力.此事实为研究红细胞溶血提供了一条新的途径,而且也提示了CDP-胆碱在血液保存中实际应用的可能性.     

灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响

采用家兔红细胞和血小板，以薄层色谱扫描法和显微（细胞）电泳法，探讨灵芝对家兔红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响。结果显示：实验组红细胞膜磷脂成分中磷脂酰胆碱显著增多（P＜0．01），而鞘磷脂类，磷脂酰乙醇胺都程度不同的减少（P＜0．05），特别是磷脂酰丝氨酸含量，鞘磷脂类／磷脂酰胆碱及磷脂酰丝氨酸／磷脂酰胆碱比值显著减小（P＜0．01）。血小板及红细胞的电泳率显著高于对照组。表明灵芝对维持细胞膜的稳态有重要作用。     

大豆磷脂脂质体与绵羊红细胞膜相互作用的研究(Ⅱ)

用超声法制备大豆磷脂小单层脂质体，低渗溶血法制备绵羊红细胞膜。在一定条件下，将脂质体与红细胞膜温育一定时间后，离心去掉脂质体，用正己烷－异丙醇，提取膜总脂质，用高效液相色谱法分离测定温育前后膜脂组成。结果表明，温育后红细胞膜的磷脂酰胆碱与鞘磷脂物质的量之比（ｎｐｃ／ｎｓＭ）明显增加，这是影响膜流动性的重要参数。上述结果与作者以前用ＤＰＨ荧光偏振技术测定的同样条件下膜流动性变化完全一致。因此，很好地从分子水平上解释了与大豆磷脂脂质体温育后，红细胞膜流动性的增加。     

石榴皮提取物体外抗氧化作用的研究

为研究石榴皮提取物的体外抗氧化作用。将石榴皮提取物分别配制成0.1、0.5、1、2、4 mg/m L不同浓度的溶液,用DPPH法进行体外抗氧化活性检测;用比色法测定抑制红细胞自氧化溶血,H2O2所致红细胞氧化溶血的作用。结果显示石榴皮提取物各剂量组均对DPPH自由基有抑制作用,且随剂量的增大抑制作用从52.4%到70.6%逐渐增强;各剂量组均能明显抑制红细胞自氧化溶血和H2O2诱导所致红细胞溶血,从0.5 mg/m L开始随剂量增大效应逐渐增强,有显著性差异。由此可知,石榴皮提取物具有良好的体外抗氧化作用,并对红细胞膜具有保护作用。     

过度训练对红细胞膜结构和功能影响的实验研究

为进一步探讨过度训练的发生机制,采用建立一般训练和过度训练动物模型,应用荧光法和比色法分别测定了过度训练后红细胞膜MDA含量、红细胞变形性、Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-ATPase活性以及红细胞膜总磷脂、胆固醇含量及其比值.结果显示:与对照组相比,MDA含量在运动后即刻显著升高(P<0.01);红细胞变形性显著下降(<0.05;P<0.01),Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活性显著下降(P<0.05),红细胞膜总磷脂显著下降(P<0.05),红细胞膜上胆固醇在运动后即刻显著低于对照组(P<0.01),红细胞膜上胆固醇/磷脂比值在运动后即刻显著低于对照组(P<0.05),相关分析表明,红细胞的变形性与红细胞膜上MDA含量呈显著负相关(P<0.05).结果揭示:过度训练运动引发的自由基产生的脂质过氧化对红细胞膜结构有损害,使Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活性下降,红细胞膜上的磷脂和胆固醇含量以及其比值降低,致使红细胞变形性下降,可能是造成过度训练后红细胞功能下降的重要原因之一.     

蜂毒肽Melittin对小鼠红细胞溶血效应及影响机制分析

蜂毒肽Melittin是一种具有高效抗细菌、真菌、肿瘤细胞等多种生物学活性的抗菌肽,然而其溶血活性限制了其发展为高效抗菌抗癌药物的应用.本文深入分析了Melittin对小鼠红细胞的作用机制,探讨影响Melittin溶血活性的细胞机制.结果表明,Melittin可以引起红细胞膜上形成空洞,抑制细胞内ATPase的活性.红细胞膜中糖蛋白或糖脂糖链中的唾液酸参与Melittin的相互作用,介导Melittin的溶血活性.质膜胆固醇也影响Melittin与红细胞膜相互作用,降低溶血活性.研究还发现,外源添加D-葡萄糖和D-蔗糖能显著抑制Melittin的溶血活性.研究结果为降低抗菌肽溶血性以及推动抗菌肽的药物应用提供了重要理论基础.     

pH对人红细胞溶血速率的影响

一、引言在生物膜的研究中,人红细胞膜是最常用的材料之一.由于它与医学的密切关系,因此这方面的研究一直很活跃.近十年来,对其组成和结构已有了相当多的了解.在文献[3]中,我们报导了一种研究红细胞膜动态结构的方法——“渗透休克”法,通过测定低渗下的红细胞溶血速率,了解到溶血速率和细胞膜流动性有着一定的关系,但溶血速率的温度效应却显示出和膜流动性参数之间不一样的结果,表明这种溶血速率和红细胞的其他结构因子有关系.本文进一步研究了pH对红细胞溶血速率的影响,认为血红蛋白和红细胞膜的结合可能属于这种结构因子.     

Calcium-dependent phospholipid scrambling by TMEM16F

In all animal cells, phospholipids are asymmetrically distributed between the outer and inner leaflets of the plasma membrane. This asymmetrical phospholipid distribution is disrupted in various biological systems. For example, when blood platelets are activated, they expose phosphatidylserine (PtdSer) to trigger the clotting system. The PtdSer exposure is believed to be mediated by Ca(2+)-dependent phospholipid scramblases that transport phospholipids bidirectionally, but its molecular mechanism is still unknown. Here we show that TMEM16F (transmembrane protein 16F) is an essential component for the Ca(2+)-dependent exposure of PtdSer on the cell surface. When a mouse B-cell line, Ba/F3, was treated with a Ca(2+) ionophore under low-Ca(2+) conditions, it reversibly exposed PtdSer. Using this property, we established a Ba/F3 subline that strongly exposed PtdSer by repetitive fluorescence-activated cell sorting. A complementary DNA library was constructed from the subline, and a cDNA that caused Ba/F3 to expose PtdSer spontaneously was identified by expression cloning. The cDNA encoded a constitutively active mutant of TMEM16F, a protein with eight transmembrane segments. Wild-type TMEM16F was localized on the plasma membrane and conferred Ca(2+)-dependent scrambling of phospholipids. A patient with Scott syndrome, which results from a defect in phospholipid scrambling activity, was found to carry a mutation at a splice-acceptor site of the gene encoding TMEM16F, causing the premature termination of the protein.     

Reconstitution of a phospholipid flippase from rat liver microsomes

The endoplasmic reticulum is the principal site of synthesis and initial incorporation of membrane lipids in eukaryotic cells; the enzymes of glycerolipid biosynthesis are exclusively located on its cytoplasmic surface. To maintain a phospholipid bilayer in this organelle, newly synthesized phospholipids must be translocated to the lumenal surface. Consistent with this are measurements indicating that movement of phospholipids across microsomal membranes is rapid, with a half-time less than 5 min (refs 3 and 4). Rapid movement of phospholipids has also been detected across the plasma membrane of Bacillus megaterium, another site of de novo lipid biosynthesis. The rapid transmembrane movement of phosphatidylcholine has not been detected, however, in vesicles prepared from microsomal lipids. These latter data suggest involvement in the endoplasmic reticulum of a phospholipid-translocating protein, as was first proposed by Bretscher who called it 'flippase'. Here we report reconstitution of a phospholipid flippase from rat liver microsomes into lipid vesicles.     

硒葡聚精对小鼠红细胞膜的保护作用

以外源性Ｈ２Ｏ２和羟自由基（·ＯＨ）为氧化诱导剂，观察了硒葡聚糖（Ｓｅｌｅｎｉｕｍ—ＧｌｕｃｏｓａｎＳｅ—Ｇｎ）对小鼠红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明，硒葡聚糖可明显降低Ｈ２Ｏ２诱导的氧化溶血作用，下降率为１１％～２６％。红细胞内脂质过氧化物含量在Ｓｅ—Ｇｎ作用下明显降低。红细胞膜的荧光偏振度（Ｐ）也呈下降趋势，表明红细胞膜流动性增加。实验表明Ｓｅ—Ｇｎ对红细胞的保护作用可能与其参与抗氧化过程有关。     

大鼠肝大部分切除对血及肝组织中cAMP、ATP含量变化的影响

目的：观察大鼠大部分肝切除后3天时血浆及肝组织中cAMP、ATP含量变化与肝再生的影响。方法：用液体闪烁计数仪和高效液相色谱仪分别测定cAMP及ATP含量。结果：大鼠大部分肝切除后血中和肝组织中cAMP含量明显高于正常对照组,肝组织ATP含量也明显增高,与肝重增长呈明显正相关关系。结论：肝再生时许多物质参与调控,可能与cAMP的传递密切相关,同时与能量代谢也有一定的关系。     

Functional genomic screen reveals genes involved in lipid-droplet formation and utilization

Eukaryotic cells store neutral lipids in cytoplasmic lipid droplets enclosed in a monolayer of phospholipids and associated proteins. These dynamic organelles serve as the principal reservoirs for storing cellular energy and for the building blocks for membrane lipids. Excessive lipid accumulation in cells is a central feature of obesity, diabetes and atherosclerosis, yet remarkably little is known about lipid-droplet cell biology. Here we show, by means of a genome-wide RNA interference (RNAi) screen in Drosophila S2 cells that about 1.5% of all genes function in lipid-droplet formation and regulation. The phenotypes of the gene knockdowns sorted into five distinct phenotypic classes. Genes encoding enzymes of phospholipid biosynthesis proved to be determinants of lipid-droplet size and number, suggesting that the phospholipid composition of the monolayer profoundly affects droplet morphology and lipid utilization. A subset of the Arf1-COPI vesicular transport proteins also regulated droplet morphology and lipid utilization, thereby identifying a previously unrecognized function for this machinery. These phenotypes are conserved in mammalian cells, suggesting that insights from these studies are likely to be central to our understanding of human diseases involving excessive lipid storage.     

含水层储能地下温度场模拟

采用Kipp K L推出的地下水流动和热运移方程,对热泵耦合含水层储能系统连续运行3年的储能井温及地下温度场进行了模拟计算．根据地下温度场的分布,对该系统的储能效果进行了分析研究．结果表明,该系统能够在供热和供冷的同时分别向地下储存冷量和热量,起到反季节储能的作用,提高热泵效率;但由于系统的冷、热负荷不均匀,造成了储能井周围区域温度的逐年降低,这对地下生态是不利的．因此,在设计热泵耦合含水层储能系统时,应保证系统的冷热负荷均衡,这样才能既提高热泵的效率又避免对地下生态平衡的破坏．     

运动与瘦素的研究进展

瘦素（ leptin）是脂肪组织分泌的一种蛋白质类激素,主要作用在下丘脑,具有调节体脂代谢、能量平衡等功能,瘦素水平的高低对肥胖、2-型糖尿病等疾病起到调节作用。血清瘦素可通过血脑屏障与下丘脑的瘦素受体结合,激活 JAK2-STAT3等信号转导通路,进而改变中枢神经系统中一系列神经肽的表达。通过收集大量近年来关于不同运动形式、运动强度、运动时间等情况对血浆瘦素水平影响的文献,总结分析出一次性运动、非一次性运动对血浆瘦素水平和能量代谢的影响,以及目前研究存在的问题,加深对瘦素功能和机理的分子水平认知,并展望了今后的研究前景。     

北部湾金黄水母Chrysaora helvola Brandt刺细胞毒液溶血活性

【目的】探讨金黄水母Chrysaora helvolaBrandt刺细胞毒液(nematocysts venom,NV)的红细胞溶血活性特征及可能机制。【方法】通过分光光度法测定红细胞溶解释放血红蛋白的量来确认不同条件和药物对NV诱导红细胞溶血行为的影响。【结果】NV诱导的红细胞溶血与其总蛋白浓度存在依赖关系。溶液pH值、大分子非电解质渗透压保护剂PEGs均能显著影响其溶血活性;非电解质小分子糖类渗透压保护剂D-甘油和D-半乳糖对溶血活性影响很小,但D-葡萄糖能显著延缓溶血。NV同时具有Ca~(2+)依赖的弱磷酸酯酶A2(PLA_2)活性,且受组氨酸烷基化试剂p-BPB抑制。这一PLA2活性可能对其红细胞溶血活性也有贡献。【结论】NV的红细胞溶血活性可能由膜穿孔机制和所含PLA_2酶成分造成,并受到含葡萄糖单元结构的糖受体调节。     

Effects of ultradry storage on fluidity of plasma membrane of seed

The effects of ultradry seed storage on the fluidity of plasma membrane have been investigated using the DPH fluorescent probe (1, 6-diphenyi-1, 3, 5,-hexatriene). The results demonstrated that the micro-viscosity of plasma membrane of ultradried seeds has no significant changes compared with the seeds which were stored under - 20℃ condition. However, there is a little adverse effect on the seeds with extreme dehydration. The results were consistent with higher vigor level of ultradried seed. It indicated that ultradry seed storage could maintain the physiological function of seed, protect the integrity of the membrane and improve the storability of seed. Furthermore, the results also revealed that sugar has the effect on protecting membrane structure and preserving the fluidity of the plasma membrane under seed dehydration. In the meantime, some mechanism about ultradry seed storage and the tolerance of dehydration of seed have been discussed.