茴香胚性愈伤组织的诱导和再生植株

以茴香幼苗的茎和叶柄为外植体，在不同种类和浓度的植物激素处理下产生了愈伤组织，进一步诱导生成胚性愈伤组织，在分化培养基上，愈伤组织通过形态建成的两种基本方式：器官发生和胚状体发生，得到了茴香的再生植株。     

荔枝胚性愈伤组织制片方法的简化

采用酒精-HCI(1:1)解离液直接解离和丙酸-铁矾、苏木精染色液染色的简化制片方法,对继代3-20天的荔枝胚性愈伤组织进行染色体数目的检测。结果表明对具有较高有丝分裂指数的胚性愈伤组织,此制片效果好,同时可节省大量的时间和药品,是一种简单、可行的制片办法。     

芥菜原生质体培养和胚性愈伤组织的产生

以芥莱无菌苗下胚轴为材料游离获得原生质体,原生质体培养于含NAA1.5mg/l,6-BA0.6mg/l、和2.4-D0.5mg/l的DPD液体培养基中,约4—5周形成肉眼可见的小愈伤组织。转入MS固体培养基后,即可产生大量的愈伤组织,其中胚性愈伤组织约占50%以上。     

杂交粳稻3优18的胚性愈伤组织及胚悬浮细胞培养

杂交粳稻3优18是天津水稻研究所选育的强优粳型杂交新组合，品质好，产量高，但分蘖力不高，不能再留种栽培．杂交粳稻3优18成熟胚在MS1培养基上诱导形成的初始愈伤组织呈深黄色、瘤状，为非松脆型、初始愈伤组织MS2培养基上经3～4个月继代培养，转变为浅黄色、小颗粒状、松脆型胚性愈伤组织．将胚性愈伤组织置于悬浮培养基中培养，经4个多月可得分散性好、生长快的悬浮细胞培养物．     

冬小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体进行离体培养，研究了品种、不同激素组合以及不同预处理等因素对愈伤组织形成及分化的影响．结果表明，代表不同基因型的品种是影响离体培养的重要因素，成熟胚愈伤组织的诱导使用4mg／L的2，4-D浓度较为有利，在MS KT1mg／L 6-BA2mg／L培养基上分化率较高．低温及CaCl2预处理对成熟胚愈伤组织的影响与小麦品种有关．     

荔枝胚性愈伤组织制片方法的简化

采用酒精-HCI(1：1)解离液直接解离和丙酸-铁矾、苏木精染色液染色的简化制片方法，对继代3-20天的荔枝胚性愈伤组织进行染色体数目的检测。结果表明对具有较高有丝分裂指数的胚性愈伤组织，此制片效果好，同时可节省大量的时间和药品，是一种简单、可行的制片办法。     

不同染色剂对荔枝胚性愈伤组织酯酶同工酶显色的影响

以α-茶酯醋酸(α-NA)和β-茶醋醋酸(β-NA)为底物，以坚牢兰B盐和坚牢兰RR盐为偶联剂，用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术研究了荔枝离体培养物的电泳显色。结果为：少数酶带只能用α-NA显色；绝大多数酶带可用α-NA或β-NA显色；用混合底物同时显色，较一些单独用α-NA或β-NA能显色的酶带的相对染色强度降低；用坚牢兰B盐与坚牢兰RR盐为偶联剂相比，某些酶带的相对染色强度增加。表明，各电泳酶带染色强度的相对强弱不一定反应各酶本身活性的相对高低。     

皮燕麦胚性愈伤组织的形成及植株再生

本实验以皮燕麦２０７９ 成熟种子胚为外植体,其愈伤组织的诱导率最高,叶鞘愈伤组织诱导率为５ ％ ,叶片几乎不发生脱分化。在基本培养基比较中以改良Ｎ６ 培养基诱导效果为佳,愈伤组织出愈率在１－３ｍｇ／Ｌ,２ ,４—Ｄ浓度范围逐渐提高,继续增大时则出愈率降低。胚性愈伤组织形成率受脱分化培养基中２,４ —Ｄ浓度的影响。扫描电镜观察结果显示非胚性与胚性愈伤组织表面结构差异明显;组织切片表明形成的再生植株有胚胎发生与器官发生两种途径,形态上有区别。     

抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织的诱导及增殖

以抗松材线虫病赤松未成熟合子胚为外植体,研究了合子胚发育阶段、激素种类及浓度以及碳源等对胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:发育至2~4阶段的合子胚为胚性愈伤组织诱导的适宜外植体,2,4-D和6-BA是最优激素组合,麦芽糖比蔗糖、葡萄糖更有利于胚性愈伤组织的诱导。抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织诱导率总体较低,以DCR为基本培养基,添加2 mg/L 2,4-D和1 mg/L 6-BA时诱导率最高为5.0%,诱导的胚性愈伤组织在增殖培养基上能够稳定增殖。     

仙客来(Cyclamen Persicum Mill)胚性愈伤形态和组织结构的动态观察

用仙客来（Cyclamen persicum Mill)成苗叶柄作为外植体，培养在附加2，4－D和KT的1／2MS培养基上诱导体细胞胚性愈伤组织的发生，对体细胞胚性愈伤组织发生过程中外部形态和组织细胞学结构进行了 动态观察。结果表明，叶柄组织发化的起始部位在维管束的维管束鞘细胞，启动时间是培养后2d；叶柄外植体培养至20d左右，愈伤组织呈松散透明状态，胚性细胞出现，标志着进入胚性愈伤组织阶段，胚性细胞多发生在所形成的愈伤组织的表层或近表层细胞，细胞大而壁薄，与非胚性细胞联系疏松，细胞核大，并位于细胞中央，细胞质浓厚，分别观察有单细胞、二分体和四分体状态。     

棉花根总蛋白双向电泳方法的优化

以陆地棉(Gossypium hirsutumL.)根为材料,比较分析了三种总蛋白提取方法及电泳参数和上样量等因素对双向电泳结果的影响.结果表明:选择pH 4⁷IPG胶条,采用丙酮沉淀/2-D Clean-up Kit法提取总蛋白,电泳时设置合适的电压,上样量为250μg蛋白进行双向电泳能够检测到1 000多个清晰的蛋白点,适合做质谱分析.     

Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice (Oryza sativa L.) by Two-Dimensional Electrophoresis

0Introduction Malesterilityisacomplicatedphenomenoninhigherplants,whichestablishesthebiologicalbasisofhetero sisutilizationincropsbreeding,especiallyinrice(Oryzasati vaL.).Themolecularandphysiologicalresearchinplantmalesterility,especiallythediscoveryofth…     

拟南芥全细胞蛋白质样品制备及其双向电泳条件的优化

对双向电泳方法进行了改进, 包括对样品的制备、 双向电泳参数的选择等关键步骤进行优化. 实验发现, 采用乙酸铵 甲醇沉淀拟南芥全细胞蛋白质, 同时结合高伏时、 长时间的等电聚焦可以获得高分辨率、 重复性好的蛋白质双向电泳图谱. 银染后, 经Phoretix 2D v2004软件分析可分辨出1 000以上蛋白点.     

小鼠肾脏组织的双向电泳

对小鼠肾组织双向电泳(2-DE)实验中的样品保存、裂解液、胶条泡胀和染色等步骤研究发现：在-73℃，以液态保存的样品仍需尽量以相同的保存时间用于对比，或使用新处理的样品使2-DE图谱反映样品原先的蛋白质组成；优化的裂解液组成是尿素9．8mol／L、Tris 40mmol／L、CHAPS 40g／L、DTT 23mmol／L、CA 5g／L、PMSF 1mmol／L和EDTA 1mmol／L；胶条泡胀采用主动方式有利于大分子量蛋白质的2-DE分离；银染色过程中采用充分的水洗步骤使之获得背景鲜明的2-D图谱。在优化条件下，高分子区及碱性区蛋白质均得到理想分离，获得蛋白质点数达1491个，明显优于已有文献方法。     

花生(Arachis hypogea L.)体细胞胚胚性特异蛋白的研究

花生萌发３ｄ的胚叶在诱导培养基上出现高频率的体细胞胚发生．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析结果表明：在体细胞胚发生过程中，诱导第三天开始出现３条新的蛋白谱带，７ｄ后出现２条新带，１５ｄ后又出现３条；而在非胚性组织中检测到抑制性的特异蛋白条带．     

聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的“集成化”研究

聚丙烯酰胺凝胶电泳是生物类相关专业学生必须掌握的一项实验技术。该项实验技术可以分析蛋白质及各种同工酶。教学实验中往往只能涉及蛋白质电泳或者是某一种同工酶的分析。为使学生能全面地掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,本实验教学示范中心开展了聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的"集成化"研究与实践,并取得了满意的效果。     

莽山烙铁头蛇粗毒双向凝胶电泳分析

采用固相pH梯度等电点聚焦-SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对莽山烙铁头粗毒进行了分析,通过银染法显色,电脑软件识别出约40个蛋白质点.其中分子量超过130 kD的蛋白质点很少,分子量90 kD~10 kD的区域均有蛋白质点分布,分子量34 kD区域的蛋白质点较为密集,且它们的含量明显较高.从蛋白质点的等电点分布范围分析,偏于碱性端的蛋白质明显多于酸性端的蛋白质,且分布在中性偏碱(pH 7~8)的区域.质谱数据的数据库搜寻结果表明:莽山烙铁头蛇毒中含有类凝血酶组分、纤溶酶组分、血小板聚集蛋白、抗血小板聚集蛋白和平滑肌钙离子通道阻断剂等组分.     

诸葛菜花粉不同发育时期特异性蛋白多肽研究

对诸葛菜(Orychophagmus violaceus)花粉不同发育时期蛋白多肽进行双向电泳，结果发现花粉发育的3个时期出现蛋白多肽点的数量为：单核期121个，二核期192个，三核期275个,3个时期共有(指等电点和分子量相同)的蛋白多肽点有100个．各时期特有的蛋白多肽点分别为：单核期9个，二核期15个，三核期110个。三核期蛋白多肽点数量和特有蛋白多肽点数量的大量增加，说明诸葛菜花粉发育晚期蛋白表达异常活跃，为受精提供了物质上的准备，同时还发现不同发育时期的花粉，其相应蛋白多肽的含量有增有减。     

山茱萸作用鼠IgA肾病的肾组织差异蛋白质谱

通过小鼠肾组织的双向电泳(2DE),发现单味中药山茱萸醇提物(FCE)作用鼠IgA肾病的肾组织差异蛋白质表达谱发生显著变化.比较IgA肾病和正常小鼠肾组织的2DE图,在1267个蛋白点中有664个匹配蛋白点,其中表达量差异在2倍以上的有263个,另有3种蛋白在IgA肾病肾组织中未被表达和1种蛋白特异表达.比较FCE服用前后鼠IgA肾病肾组织的2DE图发现,在原先差异表达的263个蛋白质中,用药后有147个显著地恢复正常表达,在IgA肾病3种未表达和1种特异表达的蛋白都恢复了正常表达,同时用药后新出现1种特异表达蛋白.该方法提示,这些差异和特异表达的蛋白质可能是IgA肾病和FCE药物作用的靶蛋白,FCE能有效地纠正小鼠IgA肾病可能是通过影响这些靶蛋白而起作用的.     

电泳法检测肺癌实体瘤组织全蛋白的研究

用聚现烯酰胺凝胶电冰法对肺癌实体瘤试样及对照组试样进行检测，发现肺癌组织中存在一条特异的深染标记蛋白带，这对研究肺癌发生的机理及临床诊断有意义。