NBT光还原法、邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活性的比较(简报)

超氧化物歧化酶(ＳＯＤ)是催化Ｏ-2歧化反应的酶类,它催化的反应是Ｏ-2 Ｏ-2 2Ｈ Ｈ2Ｏ Ｏ2。由于Ｏ-2是一种极不稳定的氧自由基,因此,检验ＳＯＤ活性一直采用间接的方法。笔者针对目前较普遍采用的邻苯三酚自氧化法和ＮＢＴ光还原法,从灵敏度、精确度、反应特异性三个方面对两方法进行比较,以确定提纯过程中非纯品ＳＯＤ及纯品ＳＯＤ两种材料酶活测定的适用方法。1　材料与方法11　材料纯品牛红细胞ＳＯＤ、玉米ＳＯＤ粗提液(自制)、超滤液(超滤膜ＭＷ=4000)、透析液(体积分数为04～09的硫铵分步沉淀后)。本实验所用药品牛红细胞ＳＯＤ为电…     

邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的研究

目前超氧化物歧化酶(SOD)活性测定结果混乱,为提高测定结果的可比性,对邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的方法进行了研究,就该活力测定体系中缓冲溶液的介质组成、浓度、pH及所含的EDTA量等因素对测定结果的影响进行了探讨,根据实验结果,提出了新的改良方法.     

四种邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性方法的比较

邻苯三酚自氧化法(420nm法)与邻苯三酚/DTT终止法测定SOD酶活力,结果基本一致,其转换系数(CC)为1.03;改进的邻苯三酚自氧化法(325nm法)、微量邻苯三酚/Vc终止法测定SOD酶活力与420nm法差别较大,其转换系数分别为2.51、5.51.在测定SOD酶活力时,可根据不同的测定方法采用转换系数进行校正;实验表明:终止剂维生素C(Vc)和二硫苏糖醇(DTT)对SOD酶活力的测定无影响;325nm法与Vc法灵敏度较高,可用于SOD活力较低的样品.     

超氧化物歧化酶—邻苯三酚自氧化测活方法的改进

本文对邻苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活力的方法做了部分改进,使其操作更简便省时,节省试剂;并对该实验条件下反应的动力学做了初步研究,表明该法比较适合经部分纯化的酶活测定,结果比较稳定,认为是柱层析中大批量活性跟踪的首选方法,可作为自动分析的基础。     

保健食品中SOD活性测定改良Marklund法及检测条件的研究

目的：建立保健食品SOD活性检测的标准。方法：利用改良Marklund方法测定保健食品（花粉、茶等）中SOD活性。结果：研究pH、温度、邻苯三酚和操作程序等对SOD活性的影响，选择检测条件，其回收率、变异系数（花粉和茶）分别为104％、97％和2．7％、5％。结论：方法简便、稳定、准确，仪器试剂价廉，易于推广。     

超氧化物歧化酶活性的测定

主要采用光谱法研究测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及不同实验条件对其活性的影响,找出最优的测活条件,为实际工作提供一些有意义的指导,并且为下一步的酶促反应动力学研究提供实验和理论依据.实验结果表明,测定SOD活性的最优条件为:实验温度为25℃,0.1mol.L-1 Tris-HCl缓冲溶液,pH值为8.20,内含2.0mmol.L-1 EDTA,邻苯三酚浓度为2.5mmol.L-1,控制酶的加入量为0.30mL.     

蛹虫草SOD酶活力的测定与分析

文章采用改良的邻苯三酚自氧化法，比较了不同种类的蛹虫草样品及相同种类的蛹虫草不同部位之间的SOD酶活力，结果表明不同种类的蛹虫草发酵菌丝体和发酵液之间的SOD酶活力有较大的不同，蛹虫。草发酵液具有良好的发展前景，为蛹虫草SOD的开发和利用提供了科学依据。     

超氧化物岐化酶磁效应的研究

用不同强度的静磁场作用于超氧化物歧化酶溶液后,通过测定其活性表明,ＳＯＤ的活力随磁感应强度和作用时间不同而波动性升高并最终趋于稳定。２００ｍＴ磁场作用２ｈ,ＳＯＤ对自氧化的抑制率增加１７％《实验还首次发现ＳＯＤ的磁效应具有一定的可逆性。     

邻苯三酚自氧化法在SOD活性测定中的应用

为了验证邻苯三酚自氧化法的准确性和实用性,对邻苯三酚在Tris-HCl和磷酸盐2种不同反应体系(缓冲液)中的自氧化产物进行UV-Vis吸收光谱扫描,确定其最适吸收峰;同时研究了tcv Cu,ZnSOD(简称tcvSOD)和Bovine Cu,Zn-SOD(简称Bovine SOD)分别在2种缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制模式.波长扫描显示,终浓度为0.225mmol/L的邻苯三酚在50mmol/L Tris-HCl pH 8.2缓冲液中于320nm处30s出现明显吸收峰,30min吸收峰达到最高值;30min后440nm附近出现吸收峰;A320处的自氧化速率为0.139/min.同样浓度邻苯三酚在0.2 mol/L pH8.0磷酸缓冲液中除了A320的自氧化速率稍高(A3200.152/min)外,其他性质与50mmol/L Tris-HCl相同.tcvSOD和Bovine SOD在Tris-HCl缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制作用较磷酸盐缓冲液为强.研究结果确认320nm可作为检测邻苯三酚自氧化、SOD对其产生抑制及SOD活性间接测定的特定波长.     

中华猕猴桃营养生物学效应研究——Ⅲ.浓缩果汁对家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应

采用邻苯三酚自氧化抑制法,对口服中华猕猴桃浓缩果汁家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应的试验表明,按50kg体重人体,每日食用0.5kg果汁剂量,持续5周服用中华猕猴桃浓缩果汁的家免,其血液红细胞邻苯三酚自氧化反应抑制率明显升高。与服用前正常值73.7％对比,1—5周依次为129.1％,153.1％,133.4％,154.9％和150.8％。停服果汁2周和4周的测定值为111.8％和114.8％。结果提示,口服中华猕猴桃浓缩果汁有明显增强家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应,抑制率比正常值提高1倍。猕猴桃果汁与同等剂量试剂抗坏血酸平行抑制试验结果,猕猴桃果汁的自氧化抑制率较试剂抗坏血酸高2个剂量级。     

藻胆蛋白提取分离及抗氧化活性的测定

藻胆蛋白是一种多功能细胞色素蛋白。从条斑紫菜藻中提取藻胆蛋白,用饱和硫酸铵沉淀法、DEAE-纤维素离子交换层析对提取的藻胆蛋白进行纯化,并首次采用邻苯三酚自氧化法来测定藻胆蛋白的抗氧化活性。从而得出:从红藻中提取分离出具有一定纯度、较高抗氧化活力的藻胆蛋白提取品。