钙调素对肿瘤细胞周期的调节作用

利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)研究了钙调素对HeLa细胞周期进程的影响,TFP处理的细胞被阻抑在G_1/S,使S期群体及DNA合成下降,G_2期群体增加.有丝分裂(M)前期细胞减少,中期细胞增加.结果表明钙调素对G_1至S期.G_2至M期和M中期至M后期具有调节作用,钙调素通过细胞周期中上述3个位点对肿瘤细胞增殖进行调节.     

PKA和PKC对HeLa细胞G_2/M/G_1进程的影响

为了研究PKA和PKC对HeLa细胞G2 →M期和M→G1期进程的影响 ,用PKA和PKC抑制剂分别处理同步的G2 期和M期的HeLa细胞后 ,测定了细胞有丝分裂指数和PKA ,PKC与CDC2激酶的活性 .结果表明 ,PKAⅢ型抑制剂在促进HeLa细胞G2 /M /G1进程的同时 ,刺激了PKC的活性 ,反之 ,PKC的抑制剂GF 10 92 0 3X在阻抑HeLa细胞G2 /M /G1进程的同时 ,激活了PKA的活性 ,与其相关的CDC2激酶活性也发生了相应的变化 .实验表明 ,PKA和PKC分别负调和正调HeLa细胞G2 /M/G1进程 ,两者表现出拮抗关系 .     

钙调素在细胞增殖中的调节作用

钙调素通过促进细胞周期的进程，实现其对细胞增殖的调节。     

壳寡糖对HeLa细胞和A549细胞自噬性死亡的影响

为了探讨壳寡糖(COS)对He La细胞和A549细胞自噬性死亡的影响,利用不同浓度COS处理细胞后MTT法检测细胞的增殖抑制情况,采用MDC染色法观察自噬泡的形成,免疫荧光法检测LC3在细胞内的表达,Western-blot分析COS处理He La和A549细胞不同时间后细胞内LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ变化。结果表明,5.0 mg·m L-1COS对两种细胞的增殖抑制率最大,分别为52.15%和57.63%(P0.01)。与阴性对照相比,经COS处理后的细胞MDC染色细胞内荧光强度增加,且阳性信号聚集于核周区域;免疫荧光检测发现LC3阳性颗粒数明显增加,表明细胞内自噬体的数量增多。Western-blot检测分析随着COS处理细胞时间延长,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值逐渐增大,显示细胞内自噬活性增强。由此推测COS能够通过诱导He La和A549细胞的自噬性死亡来抑制细胞增殖,为COS的抗肿瘤作用机制的研究提供理论依据。     

白藜芦醇抑制HeLa细胞肿瘤活性的自由基机理

白藜芦醇是一种植物抗毒素,属多元酚类。虽然迄今的研究表明,白藜芦醇能有效抑制许多癌细胞的肿瘤活性,但均未从自由基生物角度来阐明其抑制肿瘤活性的机理。该研究以离体HeLa细胞为材料,利用细胞培养法研究了白藜芦醇抗肿瘤活性的功效,以及产生这种功效的自由基途径,旨在从自由基生物学的角度进一步揭示白藜芦醇抗肿瘤活性的机量。噻唑蓝法及流式细胞仪分析结果表明,白藜芦醇能强烈抑制HeLa细胞增殖阻断HeLa细胞由S期向G2期转变。HeLa细胞内源性活性氧（ROS）及HeLa细胞内部氧化还原态的实验结果表明,白藜芦醇对细胞自分泌的总ROS有一定的抑制作用,它抑制HeLa细胞自分泌的O^-2浓度与抑制HeLa细胞增殖之间有明显的相关关系;同时,白藜芦醇可明显增高HeLa细胞内源SOD的活性以及GSH的含量,但可使CAT的活性显著下降,提示白藜芦醇能显著改变细胞内部的氧化还原态。以上结果为白藜芦醇抗癌机制提供了自由基生物学方面的实验依据。     

T细胞蛋白p80调控c-Myc表达的机理

为了解p80在正常T细胞以及T细胞癌变过程中的作用,在缺失p80的T淋巴瘤细胞中重新表达p80,其结果显示:原癌基因c-Myc的表达受到显著抑制,且细胞周期在G1期出现了停滞.定量PCR的结果表明:p80对c-Myc表达的抑制是转录水平的抑制.双荧光素酶报告基因试验表明:p80对c-Myc的抑制作用定位于c-Myc启动子上相对于转录起始位点的-1042bp～-630bp区域.运用TFSEARCH软件对这一区域的分析发现存在多个c-Myb结合位点.在稳定表达p80的T淋巴癌细胞中敲低c-Myb,表明p80对c-Myc的转录抑制是通过c-Myb来实现的.免疫共沉淀实验表明p80和c-Myb在细胞中存在相互作用.进一步的研究显示p80对c-Myc的转录抑制依赖于组蛋白去乙酰化酶的活性.研究结果表明p80有可能通过与c-Myb的相互作用将组蛋白去乙酰化酶募集至c-Myc启动子区域,并通过组蛋白的去乙酰化抑制c-Myc的表达.     

电化学对人宫颈癌细胞系HeLa-S3细胞周期进程的影响

为了解电化学治疗（ＥＣＴ）是否对人宫颈癌细胞的生物学行为有影响,用体外实验和放射自显影技术,观察不同电压和电量组合的ＥＣＴ对人宫颈癌细胞系（ＨｅＬａ－Ｓ３）的细胞增殖周期影响。结果是ＥＣＴ对ＨｅＬａ细胞的ＤＮＡＧ１－Ｓ期和有丝分裂期有明显抑制作用。     

电磁脉冲各参数对HeLa细胞可逆穿孔影响的研究

通过对HeLa细胞进行电磁脉冲处理,可以看到细胞膜电穿孔.穿孔的几率及深度与脉冲的各参数有关.细胞膜表面的微绒毛受到一定程度的损伤,还可见到火山形的喷口和喷出物.经实验研究,得到了在离体条件下HeLa细胞电穿孔的最佳电脉冲参数.     

反义HSP90诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的 探讨反义ＨＳＰ９０降低ＨｅＬａ细胞恶性度的机制。方法 经荧光染色观察细胞形态,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果 转染有反义ＨＳＰ９０的ＨｅＬａ细胞经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色,荧光染色观察可见细胞变小,染色质浓缩并产生凋亡小体,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ可见明显的梯形条带,流式细胞仪检测有凋亡的细胞。结论 反义ＨＳＰ９０可诱导细胞凋亡。     

CXCR7对HeLa细胞增殖、粘附和侵袭能力的影响

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在肿瘤侵袭、转移过程中起着重要的调控作用.此前认为SDF-1是通过其唯一受体CXCR4来起作用.近年来发现SDF-1还有另一作用受体——CXCR7,SDF-1/CXCR7在部分肿瘤侵袭转移过程中起重要作用,但其在宫颈癌HeLa细胞中的作用目前尚未明确.通过Western blotting检测HeLa细胞中CXCR4和CXCR7的表达,阻断CXCR4或CXCR7后,通过MTT法评价细胞增殖能力,细胞粘附实验评价细胞粘附能力,Transwell实验评价细胞侵袭能力.结果表明,CXCR4和CXCR7在HeLa细胞中表达.阻断CXCR4或CXCR7后,SDF-1诱导的HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附能力均被阻断.结果提示CXCR7在SDF-1诱导HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附过程中起着重要作用,将有望成为治疗宫颈癌转移的新靶点.     

Ar^＋激光辐照对吖啶橙敏化人体宫颈癌细胞的生物学效应

用不同剂量的氩离子激光照射经吖啶橙敏化的人体宫颈癌细胞后,与对照组细胞比较,观察到其生长曲线下降、死亡率曲线上升、酸性磷酸酶迅速失活以及细胞显微结构与亚显微结构的受损退行性变等效应,并对上述结果进行了讨论分析。     

Effects of antisense CENP-Bon the proliferation of HeLa (Tet-off) cells

In order to study the change of the expression of centromere protein B (CENP-B) caused by anfisense tcansfection, proto-eukaryotically expressed fused protein GST-CENP-B (65 ku) was injected into mouse, and a peculiar anti-CENP-B serum MaCenpB was collected. A strain of transfected HeLa Tet-off cell HaCb, which contains antisense CENP-B expressing vector pBI-EGFP-as-CenpB, was prepared. Northern blot and Western blot were used to analyze the repression of internal CENP-B in transfected cells. According to the growth curve, the proliferation of HeLa (Tet-off) is repressed by antisense CENP-B, and the multiplication time is prolonged for 32.81 h. The analysis of flow cytometry revealed that, compared with HeLa (Tet-off), the G1 cell population of HaCb is increased (△G1 = 9%) while S fraction is decreased (△S = 11%), but the G2/M phase is nearly unchanged (△G2/M=3%). In the meanwhile, the mitotic index of HaCb declines greatly compared with that of HeLa (Tet-off). Immunofluorescence showed that the assembling of centromeres in HaCb cell is arrested. These results suggest that a normal expression of CENP-B may be necessary for cell proliferation.     

RNA干涉抑制存活素表达并诱导HeLa S3细胞凋亡的研究

选择3个靶向存活素（S1,S2,S3）Survivin基因的siRNA序列,构建相应的RNA干涉载体pTet-U6-S1,pTet-U6-S2,pTet-U6-S3,将它们分别转染HeLa S3细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测分析转染对HeLa S3细胞内源Survivin表达的影响,结果表明,针对Survivin 3’端非编码区序列的干涉载体pTet-U6-S3转染细胞后,Survivin的mRNA水平和蛋白水平均明显下调,抑制水平高于S1序列.与对照相比,S1,S2和S3片段对Survivin mRNA的抑制率分别是20%,12.5%和40%,对Survivin蛋白的抑制率分别是39.2%,17.0%和58.6%. 流式细胞术检测结果表明,抑制Survivin表达后,HeLa S3细胞凋亡比例显著提高.     

三尖杉酯碱诱导HeLa细胞凋亡的研究

报道了三尖杉酯碱 (harringtonine ,HT)可以诱导HeLa细胞凋亡 .采用Heochst33342荧光染色、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞光度术 (FCM)的方法 ,研究了HT对HeLa细胞凋亡的影响 .利用细胞同步化技术和斑点杂交法研究发现 ,HT影响了HeLa细胞c myc和bcl 2基因的表达并且与细胞周期密切相关 .初步探讨其凋亡诱导的机制 ,认为HT通过在G1和G2 期下调细胞凋亡抑制基因bcl 2的诱导凋亡 ,以及下调c myc癌基因阻滞细胞增殖 ,并延迟凋亡发生 .这些结果对于了解HT的药物作用机制和提高临床化疗疗效具有重要意义 .     

欧几里德最短2-连通Steiner网络的性质

称连接平面上给定点集的最短2-连通Steiner网络为欧几里德最短2-连通Steiner网络。给出了欧几里德最短2-连通Steiner网络的两个性质。     

牦牛转铁蛋白抗菌与抗肿瘤作用的实验研究

用细胞株体外培养技术和抑菌试验 ,研究牦牛血清转铁蛋白对HeLa细胞株生长的影响和对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用 .结果 :①一定浓度牦牛血清转铁蛋白对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌具有较强的抑菌作用 ,抑菌圈直径达 2 .0cm以上 ;②牦牛血清转铁蛋白在 10 μg/mL时 ,对HeLa细胞株生长和集落形成均无明显的抑制作用 ,但当牦牛血清转铁蛋白在 2 5 μg/mL时 ,对HeLa细胞株生长和集落形成均有明显的抑制作用 ,并且随着作用时间的延长和浓度的增加 ,其抑制作用明显增强 .这表明 ,牦牛血清转铁蛋白具有一定的抗菌和抗肿瘤作用     

6-溴异香兰素诱发人宫颈癌上皮细胞纺锤体损伤及有丝分裂灾变死亡

 研究香兰素衍生物中的6-溴异香兰素（6-溴-5-羟基-4-甲氧基苯甲醛,BVAN08）对人宫颈癌上皮（HeLa）细胞纺锤体结构、有丝分裂的影响,及杀死癌细胞的相关机制,为开发新的抗癌药物提供理论依据。研究发现BVAN08对体外培养的人HeLa细胞具有剂量依赖性致死效应。通过抗?琢-微管蛋白抗体和抗?茁-微管蛋白抗体免疫荧光标记和激光共聚焦显微镜观察发现其机制是：BVAN08对细胞纺锤体结构造成破坏,诱发产生大量的多中心体细胞,使细胞阻滞在有丝分裂期。异常多极纺锤体细胞的百分率与BVAN08呈浓度依赖效应关系。荧光染料Hoechst33258染色观察到多微核或细胞核割裂和染色质凝集现象,也证实BVAN08诱发Hela细胞有丝分裂灾变死亡。同时免疫印迹实验还发现,BVAN08可导致细胞周期转录调节因子FoxM1（Forkhead box）及其下游靶分子CyclinB1的降解,参与有丝分裂的FoxM1蛋白失活,这表明BVAN08通过抑制FoxM1蛋白的表达是导致细胞纺锤体装配异常、细胞发生有丝分裂灾变死亡的分子机制之一。研究结果提示BVAN08诱发Hela细胞新的死亡方式,具有被开发为新型抗癌药物的潜力。