失神经对大鼠骨折愈合及FGFR3表达的作用机制研究

目的通过检测大鼠骨折端成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)的表达量,探讨失神经在骨折愈合过程中对FGFR3表达的作用机制。方法将96只成年健康雌性wistar大鼠随机分为实验组和对照组。实验组建立T10脊髓离断下的胫骨骨折模型,对照组行单纯胫骨骨折模型,分别于术后第3、5、7、14、21、28天取标本(每个时间点=8只),经固定、脱钙处理后,与骨折端上下5 mm处修剪标本,石蜡包埋,切成6μm切片。切片应用HE染色、原位杂交及masson三色染色。术后第7、14、21、28天拍X片。结果脊髓神经离断后骨折愈合加速,各时间点实验组FGFR3的表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05),并具有时间分布特点,第3天时较少,第5天时开始升高,第7天达到高峰,随后逐渐降低,并在第28天FGFR3mRNA细胞数趋于0。结论 FGFR3是骨折愈合过程中的一种膜蛋白,其表达受神经因素的调节。脊髓离断后,可通过调节FGFR3的表达量来加速骨折的愈合。     

行为学评价大鼠急性脊髓损伤模型脊髓节段选择的研究

目的通过行为学评价观察不同脊髓损伤节段选择的特点及对脊髓功能恢复的影响。方法选取不同脊髓损伤节段建立大鼠急性脊髓损伤模型。BBB评分法和斜板试验观察1d、3d、5d、7d、14d、21d和28d脊髓功能恢复情况。结果通过BBB评分法和斜板试验观察显示,脊髓损伤组(T8、T9、T10)大鼠相比假手术组大鼠各时间点均有显著差异(P0.01),整体趋势随时间呈现跳跃式变化。BBB评分结果显示,第5d开始,T10组的评分值高于T8组(P0.05),第7d到21d,T10组的评分值明显高于T8组(P0.01),第14d和21d,T10组的评分值高于T9组(P0.05),在第28d,T10组评分相比T8组和T9组无统计学差异(P0.05)。斜板实验结果显示,第5d到28d,T10组的评分值高于T8组(P0.05)。第5d到14d,T10组评分值高于T9组(P0.05),而第21d和28d,T10组的评分值相比T9组无统计学差异(P0.05)。评分值标准化为百分制后进行横向比较,假手术组大鼠两种评分值之间的一致性较好,脊髓损伤组大鼠两种评分值之间的差异较大,在术后1d、3d、28d时,无统计学差异(P0.05),在第7d、14d可观察到差异非常显著(P0.01)。结论通过BBB评分和斜板试验发现,T10组实验结果所反映的组间差异在术后各时间点较T8、T9差异更加显著,跨度更大,在实验过程中更有利于观察其变化,在损伤后第5d到第21d尤为明显,建立脊髓损伤模型选择T10损伤节段要优于T8和T9损伤节段。     

大鼠T_(10)脊髓半横断损伤模型的制备及评价

目的通过制备大鼠T10脊髓半横断动物模型,模拟脊髓损伤,研究其病理生理变化,为研究急性脊髓损伤的机制及治疗提供基础。方法成年雌性SD大鼠24只,随机分为两组:脊髓损伤组和假手术组,每组各12只。脊髓损伤组咬除棘突及相应椎板,横向半切断T10脊髓,假手术组仅行椎板切除术。分别于术后1、3、5、7、14、21、28 d进行BBB运动功能评分,同时于术后7、14、21、28 d分别检测其运动诱发电位和体感诱发电位,记录N1和P1波潜伏期,进而评估神经传导通路的完整性。结果脊髓损伤组大鼠术后BBB运动功能评分较低,在术后各时间点与假手术组相比具有统计学意义(P0.05)。神经电生理检测结果表明,与假手术组相比,脊髓损伤组运动诱发电位和体感诱发电位潜伏期均具有统计学意义(P0.05)。结论通过本实验方法建立大鼠急性脊髓损伤模型,制作过程简单,易于复制,可用于脊髓损伤的相关研究。     

参附动员内皮祖细胞改善肝移植大鼠缺血再灌注损伤

目的 观察参附注射液对发生肝移植缺血再灌注损伤(IRI)的大鼠外周血中内源性内皮祖细胞(EPCs)的作用以及此作用对其肝脏功能的影响.方法 100只雌性SD大鼠随机分为3组:原位肝移植(0LT)+参附(SF)组,OLT对照组,假手术组.3组均于术后第1、4、7天取血液标本流式细胞术检测外周血内皮祖细胞数量及生化分析仪检测肝功能,观察胆汁分泌量,并取肝组织标本进行HE染色形态学观察肝脏损伤.结果 OLT+ SF组外周血中的EPCs在术后1天开始增加,第4天达到高峰并持续至第7天;并且在3个时间点上,OLT+ SF组的外周血EPCs数量较其它两组明显增加,具有统计学意义(p ＜0.01);OLT+ SF组在用药后IRI有所改善,较对照组有统计学差异(p＜0.05).结论 参附注射液能显著动员大鼠骨髓中的内源性EPCs进入外周血,修复损伤的肝血窦,改善微循环,进而改善肝移植术后的缺血再灌注损伤.     

磁性丹参微球在骨折大鼠体内定位试验及对成骨细胞增殖分化的影响

目的观察磁性丹参微球在骨损伤后的体内分布特点及对成骨细胞的增殖与功能分化的影响,探讨磁性微球促骨愈合缓释诱导的作用机制。方法建立大鼠股骨骨折模型,在磁靶向作用下注射磁性丹参微球制剂,筛选最佳浓度,考察其磁响应性。MTT法检测1 d、4 d、8 d和12 d成骨细胞的增殖情况,Western blotting检测BMP2和BMP7蛋白的表达情况,RT-PCR检测BMP2和BMP7 mRNA的表达。结果 (1)在3500Oe磁场下给予60 mg/L的微球制剂后,骨折组织的丹参素含量检测达到最大值(P0.05)。(2)MTT试验显示在成骨细胞对数生长期第4天和第8天药物组+磁场组增殖效果明显高于其他三组(P0.01),药物组高于空白组和磁场组(P0.05)。(3)Western blotting检测药物+磁场组的BMP2和BMP7在所有时间点表达量均高于空白组(P0.05),BMP2、BMP7药物组表达量高于空白组和磁场组(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR检测第12d时BMP2、BMP7 mRNA表达升高最为明显(P0.05),药物组和药物+磁场组表达量高于空白组和磁场组(P0.05)。结论磁性丹参微球在大鼠体内有较好的磁响应性,并对成骨细胞的增殖以及骨形态蛋白BMP2和BMP7的表达有明显促进作用。     

个性化三维打印仿生骨骼术前诊断模型

目前骨科临床手术利用CT数字图像诊断病案、规划手术方案及复位策略,不易在术前进行操作练习,所选取的内固定骨钉和骨板无法测定力学匹配,从而难以避免术后应力并发症.术中依赖手术医生的经验和工具反复测量以便准确选取内固定器械,从而延长了患者创面开放时间,增加术中静脉血栓甚至动脉血栓并发症几率.尤其对于血管和神经丰富的股骨头更是容易引起术中并发症,甚至致残致死.本文分析了骨骼解剖模型的结构,研究了骨骼的内部微细结构、术前诊断模型外形轮廓以及力学性能的仿生设计方法,在此基础上,通过控制三维打印工艺、粉体材料成分和材料参数,得到不同力学性能的骨支架,从而实现了个性化定制的全骨仿生术前诊断模型.利用该模型可有效反映病患骨折和骨缺损真实特点,并可增加观察视场,明确骨折和骨缺损的实际情况和病症分型,从而有助于制定固定骨钉和骨板实际操作方案和规划替代骨植入方案,为术前手术设计、复位模拟、内置物选择、三维数据测量等重要手术环节提供物理操作模型,可明显改善手术效果,有效缩短手术时间,减少术中和术后并发症几率.     

单纯及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠海马TNF—α表达的影响

目的探讨单纯电休克及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠电休克治疗效果及海马内TNF-α表达的影响。方法50只成年Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组（C组）、抑郁组（D组）、单纯丙泊酚组（DP组）、单纯电休克组（E组）、丙泊酚联合电休克组（M组）。C组正常饲养,其余采用经典的慢性不可预见性应激法建立抑郁模型。建模成功后,E组直接行电休克治疗,M组腹腔注射丙泊酚90mg／kg,麻醉产生效应后行电休克治疗,每日进行以上处理1次,连续7日。以Open—field法和糖水消耗实验进行行为学评分。实验完成后处死大鼠,用免疫组化染色法检测TNF—α受体蛋白的表达;ELISA法海马TNF-α的含量,RT-PCR法测海马TNF—α mRNA表达。结果E组和M组大鼠的行为学评分高于D组和DP组,且M组高于E组（P〈0．05）;D组和DP组海马内TNF-α含量以及mRNA的表达高于其它各组（P〈0．05）,M组海马内TNF—α含量以及mRNA的表达低于E组（P〈0．05）,与C组差异无统计学意义（P〉0．05）;D组和DP组海马区TNF-α受体表达量低于C组（P〈0．05）,M组的表达量接近于C组,但高于E组（P〈0．05）。结论慢性应激使大鼠海马内TNF—α含量升高及其受体表达下调,从而产生抑郁症。丙泊酚可以改善电休克抑郁症状可能与进一步下调抑郁大鼠海马内TNF—α的含量和上调其受体表达有关。     

不同时点给予帕瑞昔布对妇科手术术后镇痛的影响

目的观察围术期不同时点应用帕瑞昔布对子宫切除术患者术后镇痛的不同效果。方法选择年龄25～50岁,体重45～80kg的ASA Ⅰ-Ⅱ级择期行经腹子宫切除术患者60例,分为帕瑞昔布术前组(PR组)、帕瑞昔布术后组(PO组)、对照组(CO组),每组20例。PR组在麻醉诱导前给予帕瑞昔布40 mg;PO组在关腹前30 min给予帕瑞昔布40 mg;CO组在麻醉诱导前和关腹前30min分别给予相同容积的生理盐水。分别在术后2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h进行痛觉评分,并记录各个时点曲马多的使用量、PCIA按压次数,以及出现的不良反应。结果与CO组相比,PR组和PO组术后8 h、12 h、24 h、48 h的VAS评分降低,相应时间点的曲马多用量减少(P0.05)。PR组术后24 h、48 h PCIA按压次数减少(P0.01),术后24 h镇痛满意度提高(P0.05)。PR组、PO组两组间在术后曲马多用量、PCIA按压次数、VAS评分及24 h镇痛满意度比较,差异无统计学意义。三组患者术后不良反应主要是恶心呕吐,未发现严重不良反应,三组间差异无统计学意义。结论术前或术毕时单次静脉注射帕瑞昔布40 mg,均可以减轻术后疼痛,减少曲马多的使用量,提高病人满意度,但不能减少恶心呕吐发生率。术前静脉给予帕瑞昔布未发现超前镇痛效果。     

成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化规律的研究

目的观察成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化,探讨内源性神经前体细胞的自然变化规律。方法制作脊髓压迫损伤模型,Brdu腹腔注射标记神经前体细胞,免疫荧光法(Immunofluoreseence)检测大鼠脊髓Brdu、GFAP、MBP阳性细胞数的变化。结果 1)正常组可观察到少量Brdu阳性细胞,脊髓损伤后Brdu阳性细胞显著增加(p0.05),并在第7天达到最大值,21天时仍高水平表达。2)正常组可见少量Brdu/GFAP和Brdu/MBP阳性细胞,脊髓损伤后Brdu/GFAP,Brdu/MBP双标阳性细胞数显著增加(p0.05)。结论脊髓损伤后神经前体细胞的数量在第7天达到最大值,我们认为,一周内可能是神经前体细胞增殖分化调控的关键时期。此外,新生星形胶质细胞和少突胶质细胞大量增殖,并与神经前体细胞的迁移、后肢功能恢复表现出一定的同步性,提示新生胶质细胞可能参与了脊髓损伤后神经功能的修复作用。     

三种不同浓度木瓜蛋白酶建立SD雌性大鼠膝骨关节炎模型的比较研究

目的对三种不同浓度木瓜蛋白酶所建立的SD雌性大鼠膝骨关节炎模型进行比较研究,以提供不同损伤程度的膝骨关节炎动物模型的建立方法。方法选取健康SD雌性大鼠72只,随机挑选18只为一组,各组在第1、3、5天均按0.1 m L/kg剂量左膝关节腔分别注射0.03 mol/L的L-半胱氨酸与2%、5%、10%(w/v)木瓜蛋白酶混合液,以及生理盐水,依次编为低浓度组、中浓度组、高浓度组和对照组。首次给药后第2、4、6周测量SD大鼠左膝关节宽度,各组随机处死6只大鼠对其进行解剖,观察膝关节滑膜及上下软骨表面,并进行大体及组织病理学评分。结果 SD雌性大鼠注射不同浓度木瓜蛋白酶2周后,出现不同程度的左膝关节宽度增大,左膝关节解剖后,可见滑膜厚度有所增加,软骨层损伤等病变,对照组与部分造模组的差异有统计学意义。结论 SD雌性大鼠按0.1m L/kg剂量膝关节腔注射2%、5%、10%木瓜蛋白酶和0.03 mol/L的L-半胱氨酸混合液,两周后可得到不同损伤程度的膝骨关节炎模型,在研究范围内,随着木瓜蛋白酶注射浓度的升高,所得膝骨关节炎模型的损伤程度加重,此造模方法操作简单、成功率高、周期短。     

Area and degree of occupation of the surface of precipitates of barium sulphate

Zusammenfassung Die spezifische Oberfläche von BaSO₄-Niederschlägen wurde bestimmt durch Messung des Austausches von Oberflächen-Ba-Ionen mit-radioaktiven Ba¹³¹-Ionen (spezifische Aktivität etwa 1 mc/g) einer gesättigten BaSO₄-Lösung. Die spezifische Oberfläche war 5150 cm²/g.Dann wurden die Adsorptionsisothermen von Farbstoffen (Kristallviolett, Methylenblau und Pikrinsäure) an der Oberfläche von BaSO₄-Teilchen bestimmt. Unter der Annahme, dass jedes Farbstoffmolekül im adsorbierten Zustand eine Oberfläche von 100 A² einnimmt, ergab sich ein maximaler Besetzungsgrad von 22–30%.