苦参碱与人血浆蛋白结合率的分析测定

采用超滤法结合高效液相色谱法测定苦参碱与人血浆蛋白的结合率.血浆超滤液经二氯甲烷溶剂萃取后,以0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)-乙腈(体积比为93∶7)为流动相,槐定碱为内标,检测波长220nm下测定苦参碱.苦参碱在0.2~15.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为86.2%,日内、日间精密度均小于10%.超滤法结果表明,苦参碱在不同浓度下的血浆蛋白结合率为17.2%~23.1%,蛋白结合常数为(8.838±0.964)×103 L/mol.苦参碱与人血浆蛋白结合较弱,结合率在测定浓度范围呈浓度依赖性.     

丁香苦苷血浆蛋白结合率的测定

测定丁香苦苷的血浆蛋白结合率.采用超速离心法除掉血浆蛋白,高效液相色谱法对高、中、低剂量给药后的丁香苦苷血药质量浓度进行测定.高、中、低剂量丁香苦苷的血浆蛋白结合率分别为50.81%,56.92%,57.28%.丁香苦苷血浆蛋白结合率不具有质量浓度依赖性,不易引起具有药理作用的游离型血药质量浓度发生明显变化,保证丁香苦苷临床用药有较好的安全性.     

苯环喹溴铵血浆蛋白结合率测定

为了测定苯环喹溴铵大鼠和人的血浆蛋白结合率,将大鼠和人的血浆样品加入内标后用甲醇直接沉淀法进行LC/ESI/MS分析,然后采用平衡透析法测定大鼠和人血浆中苯环喹溴铵的血浆蛋白结合率。结果表明,苯环喹溴铵大鼠血浆中药物浓度为105.2~1842ng/ml,血浆蛋白结合是线性的,苯环喹溴铵与大鼠血浆蛋白结合率约为42.0%;苯环喹溴铵人血浆中药物浓度为305.3~3813ng/ml,血浆蛋白结合是线性的,与人血浆蛋白结合率约为71.4%。苯环喹溴铵在不同种属中的血浆蛋白结合率是不同的,与人的血浆蛋白结合率较大鼠的血浆蛋白结合率高,且与人的血浆蛋白具有中等强度的结合。     

超声对川黄柏中小檗碱提出率的影响

把超声技术用于从中药川黄柏中提取小檗碱常规的酸性浸泡工艺中,探讨了不同频率超声,提取时间等对小檗碱提出率的影响,实验结果表明,使用２０ｋＨｚ的超声对川黄柏提取３０ｍｉｎ,     

香叶木苷的血浆蛋白结合率研究

研究香叶木苷的血浆蛋白结合率．以体外方式，用平衡透析法模拟香叶木苷在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程，并以高效液相色谱法测定香叶木苷在透析袋内血浆中的药物质量浓度与透析袋外缓冲液中的质量浓度，计算血浆蛋白结合率．香叶木苷在血浆中药物质量浓度为1～90μg／mL范围内，其与大鼠血浆蛋白的结合率范围为29．83％～32．56％，波动较小，结果可靠．香叶木苷属于低血浆蛋白结合率药物，大部分药物分子以游离形式发挥药效．     

超声对川黄柏中小檗碱提出率的影响

把超声技术用于从中药川黄柏中提取小檗碱常规的酸性浸泡工艺中,探讨了不同频率超声、提取时间等对小檗碱提出率的影响．实验结果表明,使用２０ｋＨｚ的超声对川黄柏提取３０ｍｉｎ,其小檗碱的提出率比酸性浸泡２４ｈ高２８．３２％,且超声提取工艺简单,省时,节能．     

胡黄连苦苷Ⅰ大鼠药动学及血浆蛋白结合率研究

建立大鼠血浆中胡黄连苦苷Ⅰ的HPLC-UV测定方法,研究在大鼠体内的药代动力学特征,同时测定其血浆蛋白结合率.血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,上清液直接进样测定.采用Diamonsil(R)(钻石)C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)流动相为甲醇:水:醋酸(45∶55∶0.1),检测波长282 nm,流速1 ...     

HPLC法测定恩施黄柏药材中黄柏碱与小檗碱的含量

考察恩施州8个县市不同海拔与环境对黄柏药材中黄柏碱与小檗碱含量的影响.采用高效液相色谱法测定黄柏碱与小檗碱的含量.黄柏碱的色谱条件:色谱柱:依利特ODS2 C 18柱(200mm×4.6 mm,5μm)流动相:乙腈:0.1％磷酸(每100ml中加0.2g十二烷基磺酸钠)=25∶75(V/V)检测波长:284 nm,流速:1.0 ml/min,柱温:30℃,进样量:20 ul;小檗碱的色谱条件:色谱柱:Kromasil C18(250mm×4.6mm,5 μm)流动相:乙腈:0.1％磷酸(每100ml中加0.2g十二烷基磺酸钠)=50∶50(V/V)检测波长:265 nm,流速:1.0 ml/min,柱温:30℃.通过系统的方法学考察,该方法快速、简单、重复性好,可用于黄柏的品质评价.适用于恩施黄柏药材的检测.     

HPLC测定黄柏炮制品中盐酸小檗碱质量分数

采用HPLC法测定川黄柏及其炮制品中盐酸小檗碱质量分数；流动相为乙腈-0．02 mol/L磷酸(体积比为40：60)；流速为1．0 mL/min；进样量为10μL；检测波长为346 nm；柱温30℃．黄柏炮制方法分别为盐炙、酒炙、炒炭．结果表明,黄柏经不同的方法炮制后,小檗碱质量分数均下降,生黄柏中小檗碱质量分数最高,为1．156%；盐黄炙次之,质量分数为1．105%；其次是酒黄柏,质量分数为1．065%；黄柏炭中盐酸小檗碱质量分数最低,为0．434%．HPLC法测定黄柏中盐酸小檗碱质量分数具有重现性好,操作简单等特点．     

川黄柏不同部位中盐酸小檗碱的研究

本文采用HPLC测定了川黄柏植物的树皮、一年生幼叶和三年生老叶中盐酸小檗碱的含量 结果表明 :川黄柏树皮、幼叶和老叶中都含有盐酸小檗碱 ,其中树皮含量为 5 . 6 %、一年生幼叶为 0 . 33%、三年生以上老叶为0 . 5 2 % .     

胰岛素样生长因子结合蛋白7的研究进展

胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP7）是胰岛素样生长因子结合蛋白超家族（IGFBPs)中一名新成员。与其他结合蛋白一样，它能与胰岛素样生长因子（IGFs)相结合，携带、转运IGF，延长IGF的半衰期，调控IGF的生物活性；更为重要的是，IGFBP7具有许多不依赖于IGF的生物作用，可参与多种类型的组织细胞的生长、发育、分化衰老与癌变等病理生理学过程。     

人类磷酸泛酰巯基乙胺结合蛋白新基因的分离和鉴定

在对AD293和HEK293进行差减杂交以探索两者在吸附和凋亡特性上的差异时,从AD293的高表达文库中分离得到一段新的cDNA片段.从人类胎脑文库克隆得到该基因,全长2 745 bp,编码的蛋白含518个氨基酸,被预测为磷酸泛酰巯基乙胺结合蛋白.该基因在染色体上定位于2p22.3,包含8个外显子.该cDNA编码的蛋白序列含有一个凋亡抑制蛋白5结构域,外皮蛋白重复片段和铜结合辛肽重复片段.RT-PCR分析显示该基因在人类正常组织和癌组织中广泛表达,但在癌组织中表达量相对较低,提示其可能对细胞凋亡有抑制作用.该基因在进化过程中高度保守.     

Ran结合蛋白RanBP1的同源基因M3的克隆与功能分析

以Ｒａｎ结合蛋白ＲａｎＢＰ１的保守区域作为探针,低严谨条件下杂交筛人视网膜ｃＤＮＡ文库,得到阳性克隆Ｍ３,它与鼠ｚｈｘ－１基因高度同源。ＲＨ作图将其定位于８ｑ２４．１￣ｑ２４．３。拼接ＥＳＴ序列并填补缺口,得到Ｍ３ ｃＤＮＡ全长４９３４ｂｐ,与Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ得到的主要转录本长度一致。此ｃＤＮＡ全序列包括２６２２ｂｐ开放阅读框,编码８７３氨基酸,含有２种翻译调控元件ｕＵＡＧ和ＴＴＡＴＴＴ     

水稻Rubisco亚基结合蛋白的纯化及性质研究

以水稻叶片为材料，经热处理、硫酸铵分部，采用了ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ｆａｓｔ ｆｌｏｗ和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ－３００层析，阶段和线性洗脱相结合的步骤，纯化了Ｒｕｂｉｓｃｏ亚基结合蛋白，其得率比前人报道的方法提高了１倍。纯化的Ｒｕｂｉｓｃｏ亚基结合蛋白的式量为７０８０００，亚基式量为５８９００，故为十二聚体。该蛋白在紫外区有２个吸收峰，分别为２１２．６ｎｍ和２７９．４ｎｍ。该蛋白的氨基酸组分分     

重组乙肝表面抗原结合蛋白(SBP)的制备及功能研究

先前的研究发现乙肝病毒表面抗原结合蛋白(Hepatitis B virus surface antigen binding protein,SBP)能够与乙肝病毒表面抗原结合并促进HBsAg与肝细胞的亲和性,为进一步探索该分子对免疫应答的调节功能,构建了表达载体pBV-SBP,并在E.coliDH5α中表达重组SBP.以Balb/c小鼠为试验对象,分为SBP试验组和对照组,首次注射乙肝疫苗21 d后,测定两组小鼠血清中抗乙肝疫苗抗体的效价.结果显示SBP试验组小鼠血清中抗乙肝疫苗抗体效价的平均值约为对照组的3.0倍(P<0.01),表明SBP能够显著提高乙肝疫苗的免疫效力,在试验期间Balb/c小鼠总体IgG水平未见显著变化.     

麒麟菜粗多糖中多糖与蛋白质结合方式

从海藻麒麟菜中提取的粗多糖含有一定量的蛋白质，采用Sevag法在除麒麟菜粗多糖蛋白质，则蛋白质与多糖以相同的比例减少，粗多糖酸解液的pH调整为11．0后，经凝胶SephadexG—l00层析，能使蛋白质部分分离，而酸性条件无法使之分离，实验结果表明，粗多糖中蛋白质不是以游离的形式存在，可能以离子键方式与多糖分子中的硫酸根聚阴离子相结合，提取麒麟菜多糖和纯化过程中，控制合适的pH条件有利于分离蛋白质。     

大豆ASR蛋白富含组氨酸结构域在结合金属离子中的作用

利用固相亲和层析实验结果表明,GmASR蛋白及其含组氨酸结构域A1~A5短肽可与金属离子Cu2+和Cd2+结合;采用Cu-抗坏血酸体系检测了GmASR蛋白及A1~A5清除羟基自由基的能力,证明GmASR蛋白及A1~A5短肽中组氨酸数目与清除羟基自由基能力呈正相关;GmASR蛋白及A1~A5可保护DNA分子免受Cu2+造成的氧化损伤.CD实验和SDS-PAGE实验结果发现,GmASR蛋白及A1~A5短肽与Cu2+结合后将引起可逆性聚集及沉淀.可见GmASR蛋白通过组氨酸结合过多的金属离子,维持细胞内离子平衡,是保护植物免受重金属毒害的重要机制之一.