丙酮沉淀法提取中性β-甘露聚糖酶的条件研究

利用丙酮沉淀提取枯草芽孢杆菌Ｋ３－１４发酵产生的中性β－甘露聚糖酶－２０℃时Ｖ（发酵液）：Ｖ（丙酮）用量为１：１．０时,提取率为８２．５７％,固体酶制酶活力为１９．４３万Ｕ／ｇ,１：２．０时提取率为９５．４０ｇ,所得固体酶净重增加此工艺在工业上是可行的。     

二步法云母微晶片的纳米二氧化钛包覆研究

提出了二步法云母微晶片的纳米二氧化钛包覆技术,使二氧化钛的成核与生长过程分开进行。所得产物包膜均匀、致密,颗粒达纳米级。对包覆技术条件进行了研究,反应体系的最佳条件为ｐＨ值取２．０～２．５,二步钛盐加料比Ｖ１／Ｖ２≥０．１１,第一步钛盐加料速度低于０．３ｍｌ／ｍｉｎ,第二步钛盐加料速度低于０．６ｍｌ／ｍｉｎ。     

基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究

对基因重组人Ｇａｍｍａ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株的发酵工艺进行了研究．结果表明,采用在２５０ｍＬ摇瓶中装液量为１５０ｍＬ,按照１∶４０的稀释比进行两次扩大培养,并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好．收集菌体以后,将菌体进行冷冻和超声破碎,并在２．０ｍｏｌ／Ｌ脲中浸泡８ｈ～９ｈ以清洗杂蛋白,然后用７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍（Ｇｕ·ＨＣｌ）提取．在优化工艺条件下,ｒＩＦＮ－γ的收量为９．０×１０６ＩＵ／Ｌ～１２．８×１０６ＩＵ／Ｌ,总蛋白为７９．５ｍｇ／Ｌ～１２７．２ｍｇ／Ｌ,比活为５．６×１０５ＩＵ／ｍｇ～８．０×１０５ＩＵ／ｍｇ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳含量可达６０％～８０％,使ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株获得了高效表达．     

灵芝深层培养工艺的研究

为了提高发酵终了时灵芝菌丝浓度以获取高等真菌多糖，对灵芝ＡＳ．５．６５的深层培养工艺进行了研究。确定了最适发酵条件为：５％玉米淀粉、０．３％玉米浆、１％豆饼粉、０．６％糖蜜、０．１５％ＫＨ２ＰＯ４、０．０７５％ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ，ｐＨ５．５～６．０，温度２８℃，摇床转速１５０ｒ／ｍｉｎ，摇瓶种子培养３ｄ接种。接种量５％、装液量５０ｍＬ，培养５～６ｄ可终止发酵。最终菌体干重可达２７．５ｇ／Ｌ、含粗多糖２．６ｇ／Ｌ。     

三氯偶氮氯膦光度法测定合金钢及水中的微量铬

目前利用褪色反应测铬的光度分析法大多灵敏度不高。通过研究三氯偶氮氯膦与Ｃｒ２Ｏ２－７的褪色反应,发现其在硝酸介质中具有高灵敏的褪色反应,其摩尔吸光系数ε＝１．１×１０５,是目前测铬的最灵敏的方法之一。研究发现该体系在５５０ｎｍ处具有最大吸光度ΔＡ,在硫酸、盐酸介质中加热３０ｍｉｎ时褪色不明显,在硝酸介质中加热１０ｍｉｎ已褪色完全。在ＨＮＯ３（Ｖ（ＨＮＯ３）∶Ｖ（Ｈ２Ｏ）＝１∶３）用量为３．０～５．５ｍＬ,０．５ｇ／Ｌ三氯偶氮氯膦溶液的用量为２．０～３．５ｍＬ,沸水浴加热８～１１ｍｉｎ时,褪色完全。本研究选取ＨＮＯ３４．５ｍＬ（Ｖ（ＨＮＯ３）∶Ｖ（Ｈ２Ｏ）＝１∶３）,三氯偶氮氯膦溶液２．５ｍＬ,沸水浴加热９ｍｉｎ。Ｃｒ（Ⅵ）质量浓度在０～０．４８μｇ／ｍＬ内符合比耳定律,回归方程为ΔＡ＝０．９７２５ρ（μｇ／ｍＬ）＋０．０１７３,相关系数γ＝０．９９６８。对１８种共存离子的干扰进行了测定,Ｆｅ２＋,Ｆｅ３＋,ＭｎＯ－４的干扰可在溶样时除去。用于合金钢及水中的微量铬的测定结果令人满意。     

嗜热芽孢杆菌β—半乳糖苷酸发酵条件研究

以嗜热芽孢杆菌为菌种,研究发酵生产β－半乳糖苷酸的条件,应用均匀设计优化发酵培养基组成,结果为：服糖０．５、蛋白胨２．０、牛肉浸膏２．０、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．０１。在温度５５℃、初始ＰＨ７．０、摇床转速２００ｒ／ｍｉｎ和１０％接种量条件下,发酵２４ｈ,β－半乳糖苷酸酶活力达１３．２Ｕ／ｍＬ。在乳糖水解反应中,证实该酶能催化转半乳糖苷反应,合成半乳糖低聚糖。     

产胞外木聚糖酶青霉菌发酵条件的正交设计试验

正交设计试验结果表明,青霉菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．ｍ８） 胞外木聚糖酶活力达９２．９６ Ｕ／ｍＬ,合适的产酶发酵条件为：培养基（ｇ／Ｌ）,麦草粉４０,（ＮＨ４）２ＳＯ４ ４．４４,ＫＨ２ＰＯ４ １．０,ＭｇＳＯ４ ·７Ｈ２Ｏ０．５,ＮａＣｌ０．３,Ｔｗｅｅｎ ８０ ３．０,ＣａＣＯ３ １．０;每亳升培养基接种２．０×１０５ 个孢子,２８ ℃,水浴振荡培养４ ｄ（１２０ｒ／ｍｉｎ）。     

从香菇发酵醪液中分离鸟苷酸技术的研究

香菇发酵醪处理液经７３２阳树脂在ｐＨ２．５￣３．０时得５＇－ＧＭＰ和５＇－ＣＭＰ混合液，再调至ｐＨ４．０￣４．５上７１７阴离子树脂柱，５＇－ＧＭＰ被吸附，用ψ＝３％ＮａＣｌ溶液解吸，即分离得５＇－ＧＭＰ。醪液经０．２μｍ胶体磨破壁后分别作了自溶，酶解（５＇－磷酸二脂酶）和自溶加酶解三种处理，结果５＇－ＧＭＰ得率分别为９４．０％，９５．１％和９５．０％，未见显著差异。     

豆凝乳酶产生菌的筛选及诱变育种

从１０４份土样中分离到一株产豆凝乳酶的芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）,酶活力０．３ｕ／ｍｌ。经ＵＶ－ＤＥＳ诱变及培养基调整后,酶活可达１．６ｕ／ｍｌ以上,其最适产酶培养基组成：麦麸２．５％,（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．５％（ＮＨ４）２ＨＰＯ４ ０．５％,ＣａＣｌ２ ０．０５％。     

海洋弧菌Z010产生几丁质酶的发酵条件研究

以海洋弧菌Ｚ０１０菌株为对象,研究了其产生几丁质酶的发酵条件。研究表明,其产酶的最佳发酵条件为：２２１６Ｅ液体培养基中含０．５％（ｗ／ｖ）的胶体几丁质,０．５％（ｗ／ｖ）的蛋白胨,培养起始ｐＨ值为７．０,２５℃摇床２００ｒ／ｍｉｎ培养３６ｈ,几丁质酶产出最大。     

马铃薯酪氨酸酶的部分纯化及理化性质的研究

马铃薯酪氨酸经粗提、丙酮沉淀和酸铵分级后，得到了纯化１．８倍，活力回收４２．５％，比活力为４９．７Ｕ／ｍｇ蛋白的部分纯化酶，并对其理化性质进行了研究。结果表明，以多巴为底物，酶的Ｋｍ为５．７ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍ为１６．２μｍｏｌ／Ｌ?ｍｉｎ，最适ＰＨ为８．２，最适温度为４０℃，ＨＳＯ＾－３Ｆ＾－、苯甲酸、叠氮化钠、过氧化氢为其抑制剂，Ｖｃ、苯肼等对该酶的半抑制浓度为μｍｏｌ／Ｌ水平。Ｃｕ＾２＋在低浓     

糖化酶的分批发酵动力学研究

用国内常规糖化酶生产菌株黑曲霉ＵＶ－１１,利用５升全自动发酵罐培养,在以淀粉为碳源,ＮＨ４Ｃｌ为氮源的合成培养基中,３３℃,ｐＨ４．５条件下进行分批发酵,菌体比生长速率为０．０２～０．０３１／ｈ时,糖化酶的比生产速率可达最大,为１５００～１８００ｕ／ｇ．ｈ,酶活力为２１９０ｕ／ｍｌ。     

生长调节物质对丹参叶片脱分化及根芽分化的效应

生长调节物质对丹参叶片脱分化及根芽分化效应的研究结果表明：（１）０．５～５．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ，０．１～０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ０．５～１．５ｍｇ／ＬＩＢＡ或０．２～１．０ｍｇ／Ｌ４ＰＵ－３０诱导叶片的脱分化率高达９７％～１０００％。（２）０．１～０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ或０．５～２．０ｍｇ／ＩＢＡ诱导芽化率为９３％～１００％，３种细胞分裂素中，４ＰＵ－３０对叶片芽化最有效，６－ＢＡ和ＫＴ次之。（３）随     

里氏木霉DWC1纤维素酶的研究

实验对纤维素酶高产菌株里氏木霉ＤＷＣ１的最佳产酶条件进行了研究。且分析了菌株在不同的营养及培养条件下的产酶情况。ＤＷＣ１菌株的最佳液体培养条件如下：温度（２５～２９）℃，初始ｐＨ５．０，发酵时间（５～７）ｄ。在此培养条件下菌株的ＣＭＣ酶活及滤纸酶活可分别达到４８３．３ｍｇ／（ｍｌ·３０ｍｉｎ）和１３６．７ｍｇ／（ｍｌ·ｈ）。     

黑曲霉发酵玉米淀粉生产柠檬酸

用紫外线和亚硝基胍诱变相结合的方法,从野生黑曲霉菌株出发,经多次诱变筛选,得到一株能够较好地利用玉米淀粉生产柠檬酸的黑曲霉菌株Ａ．ｎｉｇｅｒ９５。对Ａ．ｎｉｇｅｒ９５在摇瓶和发酵罐上用玉米淀粉发酵产生柠檬酸的适宜条件作了详细研究。经过比较,认为摇瓶产生柠檬酸的适宜培养基配方及发酵条件为：玉米淀粉２０％（均为质量分数,下同）、（ＮＨ４）ＳＯ４０．２％、ＫＨ２ＰＯ４０．２％、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．０５％,甲醇３％,初始ｐＨ３．０。接种液体种子５％,３０℃２００ｒ／ｍｉｎ发酵７ｄ,柠檬酸产量１０．８％。在６．６Ｌ的Ｂｉｏｆｌｏ－Ⅱ型发酵罐上设定３０℃,５００～６００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ４．０,１．２～２．５Ｌ／ｍｉｎ的通气量,发酵１３２ｈ,柠檬酸产量为９．３％。可用价格低廉、来源丰富的玉米淀粉代替传统的薯干,作为发酵生产柠檬酸的原料,为实际生产奠定了基础。     

嗜热芽孢杆菌β-半乳糖苷酶发酵条件研究

以嗜热芽孢杆菌为菌种,研究发酵生产β－半乳糖苷酶的条件。应用均匀设计法优化发酵培养基组成,结果为（ｇ／Ｌ）：乳糖０．５、蛋白胨２．０、牛肉浸膏２．０、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．０１。在温度５５℃、初始ｐＨ７．０、摇床转速２００ｒ／ｍ ｉｎ 和１０％ 接种量条件下,发酵２４ｈ,β－半乳糖苷酶酶活力达１３．２Ｕ／ｍ Ｌ。在乳糖水解反应中,证实该酶能催化转半乳糖苷反应,合成半乳糖低聚糖。     

绿色木霉固态发酵产纤维素酶条件及酶性质的研究

对绿色木霉 Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉｄｅ９４０５固态发酵产纤维素酶的条件及酶的性质进行了研究。结果表明,最适产酶条件为：秸秆粉与麸皮的比 ７：３;玉米秸秆粉培养基含水量２５０％;花生皮粉培养基含水量１５０％;ｐＨ４．０～４．５;温度３０℃;周期７２ｈ。在玉米秸秆粉固体培养基上,所产纤维素酶ＣＭＣ活力为１３８６ｕ／ｇ,ＦＰＡ活力为２１７ｕ／ｇ,棉花糖化力为３２５ｕ／ｇ。必作用的最适条件为ｐＨ４． ５～５． ０,温度 ５０℃;在 ４５℃以下, ｐＨ３． ５～６． ０之间比较稳定,室温放置半年,酶活保存率在９０％以上。     

巨大芽孢杆菌产青霉素酰化酶发酵条件的研究

该文对一株巨大芽孢杆菌产胞外青霉素酰化酶的发酵条件下进行了初步研究。不同的氮源及装液量和发酵时间产酶均有影响。该菌株在２７－２８℃１８０ｒ／ｍｉｎ，初始ＰＨ８．０，苯乙酸浓度０．６％的最佳发酵条件下发酵６０ｈ左右，青霉素酰化酶活力可达５００－７００Ｕ／１００ｍｌ。     

黑曲霉AJ1958菊粉酶的产生和性质

从菊芋根际土壤中分离出一株菊粉酶（ＩｎｕｌｉｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．７）产生菌，经物理和化学诱变得高酶活黑曲霉突变株ＡＪ１９５８．该菌株在培养基（０．０７ｇ／ｍＬ菊芋提取液１０００ｍＬ，豆饼粉５ｇ，麸皮５ｇ，ＫＣＩ０．７ｇ，ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，ＰＨ５．０）中，于３０℃振荡培养３ｄ，酶活力可达６４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１．酶水解反应的最适ＰＨ为３．０～４．０，最适温度为６０℃，在ＰＨ２．５～５．５的范围内和７５℃以下较稳定．适宜条件下，１０ｈ内０．０５ｇ／ｍＬ的菊粉溶液中之底物几乎１００％被酶水解．产物糖中果糖质量分数为９３％，葡萄糖质量分数为５．６％．该突变株产生的菊粉酶具有较满意的水解性和热稳定性．     

菊芋的酶降解及其综合利用

菊芋富含菊粉,菊粉经菊粉酶一步酶解,可生产高果糖浆．报道了菊芋发酵生产菊粉酶、高果糖浆、酒精等研究结果,国内外研究进展以及酶解产物的综合利用．经诱变选育出的高产突变株ＡＬ１５４ 菊粉酶的活力达１４６ ．３ μ／ｍＬ,比出发株提高近３ 倍,菊粉酶酶解菊芋提取液的最适工艺条件为：ｐＨ５ ．０ ,６０ ℃,底物总糖浓度１０％ ～２０ ％ ,酶用量３ ．０ μ／ｇ菊糖,酶解时间１０ ｈ ,底物降解率达９７ ．２ ％ ,酶解产物中果糖占总糖的８６ ．１ ％ ．