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相似文献
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1.
以phagemid,pBluescript为载体,把牛凝乳酶原基因的KpnI-KpnI片段插入,将牛凝乳酶45位Cys用Ala取代,根据遗传密码子的兼并性,在其附近引入限制性内切酶ClaI位点.利用寡聚核苷酸介导的定位突变技术,以获得凝乳酶Cys45Ala的突变基因.为了提高突变效率,采用Kunkel等创立的含尿嘧啶单链DNA模板法,经酶切鉴定及双脱氧末端终止法测序,证明已获得预期的突变。  相似文献   

2.
对蛋白质二硫键异构酶与GSH/GSSG促进重组凝乳酶原复性进行了比较。GSGSSG促进重组凝乳酶原复性的效率低于蛋白质二硫键异构酶,但最终效果相似。GSH/GSSG与蛋白质二硫键异构酶促进重组凝乳酶原复性的反应没有叠加效应。  相似文献   

3.
6个氨基酸小C肽人胰岛素原类似物基因的构建和表达   总被引:1,自引:1,他引:1  
用片段置换法,从在C肽两端具有酶切位点的双突人胰岛素原因中,将C肽基因替换成含Arg-Arg-Gly-Ser-Arg-Lys6个氨基酸小C肽基因。将这个小C肽岛素原类似物基因重组到具有Tac启动子的质粒中,并与部分牛凝乳酶原基因融合,在E.coli中得到了高效表达。表达的BC'A融合蛋白占菌体总蛋白的16%。表达产物以包含体形式存在,经CNBr裂解及磺酸,再经复性后,具有对胰岛素的放射免疫活性。  相似文献   

4.
将含麦芽糖结合蛋白-嗜热菌DNA聚合酶内蛋白子基因的pMI84、pMI94、pMI95三个重组突变体质粒转入E.coli2426经发酵及IPTG低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→Ala1/Ser538Stop)三种蛋白质前体。研究了PH温度、巯基试剂对内蛋白子N末端的剪切影响。  相似文献   

5.
用极谱法研究了铕与有机磷酸(P)、丝氨酸(Ser)、半胱氨酸(Cys)等形成的二元体系Eu^3+-P、Eu^3+-Ser、Eu^3+-Cys和三元体系Eu^3+-P-Ser、Eu^3+-P-Cys。考察了各种配合物形成的条件、电化学性质,测定了配合物的组成及其稳定常数。结果发现,其稳定常数随有机磷酸烷基取代基的增大而减小。  相似文献   

6.
豆凝乳酶产生菌的筛选及诱变育种   总被引:16,自引:0,他引:16  
从104份土样中分离到一株产豆凝乳酶的芽孢杆菌(Bacillus sp.),酶活力0.3u/ml。经UV-DES诱变及培养基调整后,酶活可达1.6u/ml以上,其最适产酶培养基组成:麦麸2.5%,(NH4)2SO4 0.5%(NH4)2HPO4 0.5%,CaCl2 0.05%。  相似文献   

7.
利用Opton显微注射系统(Microinjectionsystem)将不同分子量的荧光分子探针分别注射到不同生育期的紫竹梅雄蕊花丝毛细胞内,在OlympusBH—2型荧光显微镜下观察探针在细胞内的转移情况,取得以下结果,花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞的胞间连丝允许LRB(559Da),FITC-(Ala)6(870.3Da)通过,而FITC-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Val-Ala(1161.3Da)难以通过.花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞间的胞间连丝的通透性差异不大.且允许通过的分子探针不超过1161.3Da.在花蕾和开放花的雄蕊花丝毛细胞间不能通过的分子探针FITC-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Val-Ala(1161.3Da),FITC-InsulinAChain(2921.0Da)在衰老花雄蕊花丝毛细胞间可以转移,但分子量为4400.0De和9400.0Da的FITC-Dertran探针却难以转移.胞间连丝的通透性能,随着植物的生长发育发生相应的变化.  相似文献   

8.
通过对中国沙区燥原荠属PtilotrichumC.A.Mey。植物的研究,认为研究沙区产此属植物物1种、1亚种、细胞叶燥原荠 P.canescens(DC.)C.A.Mey.subsp.tenuifolium(Steph.exWilld.)HaneltetDavamzac为我国新记录。  相似文献   

9.
本实验室从正常狗脑中又分离获得一个暂称这为“60a”的肽。冻干粉经SephaderG-50和羧甲基纤维素CM22柱层析,再经反相高效液相层析纯化得最后样品,经SDS电泳和等电聚焦电泳鉴定均为一条带,分子量约8000,等电点在pH7.8左右;N-末端氨基酸为Met;自N-末端的部分氨基酸序列为:H2N-Net-Leu-Ser-Pro-Als-Asp-Leu-Thr-Asp-Ile-Leu-Phe-T  相似文献   

10.
酵母菌的分离及鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
从新疆吐鲁番所采的土样中分离出的3株编号为Sy95-001、Sy94-002、Sy94-003的酵母菌株,通过形态和生理生化试验,初步鉴定为:克洛克酵母属(Kloeckeasp.)、假丝酵母属(Candida)的热带假丝酵母(Tropicaeis)、类酵母属(Saccharomycodes)的中国类酵母(sinensis)  相似文献   

11.
用Cy2BuSnO2C-C6H4-x,Cy2MeSnO2C-C6H4-x,CyBu2SnO2C-C6H4-x(x=H,p-CH3,p-CH3O,p-NO2,p-F,p-Cl,p-I,p-OH,p-NH,m-NO2,m-CH3O)3个系列共18种取代苯甲酸配位的有机锡络合物在13种有机溶剂(环己烷、正庚烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙醚、氯仿、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、对二氧六环、乙腈)中的羰  相似文献   

12.
在BSA的等离子点pH=5.3时,研究了1:1Mn(Ⅱ)-BSA配合物金属中心的紫外LMCT跃迁谱带,结果表明:该配合物的金属中心锰在实验浓度范围内始终保持着五配位的四方锥构型,此结果与该条件下Mn(Ⅱ)-HSA体系的极相似,但在生理pH下的构型有着很大差异;结合的位置最可能位于N-端Asp^1-Thr^2-His^3三肽段上,涉及的配体是Asp^1上的α-NH2和COO^-,His^3上的咪唑基  相似文献   

13.
1974年,Erdos和Saucer提出如下问题:设f(p)是p个顶点的不含3正则子图的图的最大可能边数,确定f(p)。本文给出:(1)f(p)≥3p-9,p≥4;(2)f(p)≥3p-5,p≥34。  相似文献   

14.
用Cy2BuSnOC-C6H4-x,Cy2MeSnO2C-C6H4-x,CyBu2SnO2C-C6H4-x(X=H、p-CH3、pCH3O、p-NO2、p-F、p-Cl、p-I、p-OH、P-NH2、m-NO2、m-CH3O)3个系列共18种取代苯甲酸配位的有机锡络合物在13种有机溶剂(环己烷、正己烷、正庚烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙醚、氯伤、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、对二氧六环、乙腈)中的羰基伸缩振动波数(以下简写为vc=0)和氯仿在7种溶剂(硝基甲烷、乙腈、乙酸乙酯、四氯化碳、环乙烷、对二氧六环、四氢呋喃)中的vc-c1的溶剂效应,验证了先前提出的经验方程.  相似文献   

15.
人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA重组在表达质粒pDR720中。在E.coliC600中获得了表达,表达水平为2%。以醋酸锌显色PAGE凝胶回收t-PA表达条带,进行复性处理。复性产物经Benzamidine-Sepharose4B,Lysine-Sepharose4B亲和层析,纯化得到SDS-PAGE银染一条带纯度,比活为4,000mol/s·g的人t-PA。  相似文献   

16.
αs1、β、αs2酪蛋白中磷酸化Ser周围序列具有Ser-Ser-Ser-Glu-Glu的共同特点和cAMP、cGMP、Ca^++调节的蛋白质的磷酸化Ser周围序列和Hsp70钙调蛋白结合序列具有相似性,都具有2-3个Ser相连的序列,不同之处在于N端的碱性氨基酸簇变成了C端的Glu-Glu,反映了用于携带Ca^++和调节作用的Ser磷酸化二类蛋白质一级结构的差别:前者需要有一个酸性残基区协助,后  相似文献   

17.
将阴离子聚合所得窄分布聚苯乙烯(d<1.1)在无水ZnCl_2催化下以氯甲醚对其进行氯甲基化(C1%<1.5),再用自制无水AlCl_3作催化剂,使氯甲基化聚苯乙烯(CMPS)发生大分子链间的Friedel-Crafts反应,一步合成主链与支链等长的无规支化聚苯乙烯(ABPS).研究了支化反应条件及支化结构,实验表明,反应条件:T=40~45C、C_(CMpS)=0.1~0,15g·Ml ̄(-1)、C_(cat)=0.05~0.1g·ml ̄(-1)、t>l2h达到良好的支化效果,支化臂数为1~20.  相似文献   

18.
小麦——冰草异源衍生系淀粉理化特性的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
利用RVA-3D(Newport Scientific Pey.Ltd.Narrabeen,Australia)、TA-XT2(Stable Micro Systems,Godalming,Surrey,England)、DSC20(Mettler Naenikon-Uaenikon-uster,Switzerland)等分析仪,对已被GISH检测过的35份小麦-冰草属间杂种衍生系及其亲本Fuku  相似文献   

19.
采用元素分析、X射线光电子谱(XPS)以及直流电导率σdc(T)与温度关系等方法对三种聚苯胺PANI-HCl,PANI-H2SO4和PANI-H3PO4进行了研究.在Cl(2p)谱中,可以分辨四个二重态的自旋轨道裂分偶极子Cl(2p1/2)和Cl(2p3/2).S(2p)-core-level谱显示了二重态自旋轨道的裂分偶极子S(2p1/2)和S(2p3/2),而P(2p)-core-level谱仅在结合能为134.03eV时显示单一的峰值.室温时PANI-HCl和PANI-H2SO4的σdc比PANI-H3PO4的σdc高数倍.PANI样品的导电性与温度的关系表明它们是半导体,而且符合准一维的变程跳跃(Q1D-VRH)模型  相似文献   

20.
结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3为一由三个三聚体组成的寡聚蛋白,并具有分子伴娘活性(Changetal.,J.Biol.Chem.,1996,271:7218~7223)。为研究高度保守疏水片段中高度保守疏水亮氨酸残基(Leu121)对寡聚体结构和活性的影响,该残基被分别定点突变成天冬氨酸(Asp)、天冬酰胺(Asn)、缬氨酸(Val)和丙氨酸(Ala)等。结果发现当Leu121被突变成Val和Ala时,通过SDS-PAGE凝胶电泳检测仍可见重组蛋白在大肠杆菌中的高水平表达,而当被突变成Asp和Asn时,在SDS-PAGE胶上,见不到Hsp16.3蛋白带。表明该残基可能对寡聚蛋白的结构稳定起重要作用。  相似文献   

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