用大孔明胶微载体培养Vero细胞

用自制在孔明胶微载体与实心微载体ＣＴ－３在转瓶中培养Ｖｅｒｏ细胞，在培养后期许多细胞从ＣＴ－３上胶落下来，细胞密度降低，而大孔微载体上的细胞密度一直保护在较高水平（８×１０＾８ｃｅｌｌｓ／Ｌ以上），表明大孔微载体能够延长细胞活性期，用大孔明胶微载全反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞，最大活细胞密度达５．６×１０＾９ｃｅｌｌｓ／Ｌ。     

接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响

研究了接种密度对Ｖｅｒｏ细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于１．０×１０＾５ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Ｖｅｒｏ细胞培养过程,适宜的表面接种密度为３×１０＾－４－７×１０＾４ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。     

Vero细胞培养过程中球转球接种工艺的可行性研究I.动态球转球过程

研究了动态球转球接种Ｖｅｒｏ 细胞培养过程中的细胞生长特性,提出了细胞球转球的机理,通过与消化接种的比较,证明在动态球转球接种的细胞培养过程中,细胞的比生长速率和增殖倍数均较低,因而认为以动态方式实现细胞球转球接种不适合于细胞的大规模培养过程。     

硫鱼精蛋白去除OPV中Vero细胞基质DNA的研究

以不同浓度的硫鱼精蛋白（ＰＳ）对Ｖｅｒｏ细胞制备的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型脊髓灰质炎口服活疫苗（ＯＰＶ）病毒悬液进行后处理去除细胞基质ＤＮＡ研究．ＰＳ浓度大于１ｍｇ／ｍＬ,纯化后疫苗中ＤＮＡ残余含量低于１００ｐｇ／剂量．随着病毒液中ＰＳ浓度的增加,ＤＮＡ残余含量减少,但病毒回收率亦降低．结果表明ＰＳ沉淀法,病毒回收率高,ＤＮＡ残余含量能达到ＷＨＯ规程ＤＮＡ限量要求,对脊灰病毒ｒｃｔ／４０特征及病毒壳蛋白等生物学性状无显著影响,是Ｖｅｒｏ细胞制备ＯＰＶ简便的纯化方法     

Vero细胞的微载体培养——放大过程中的接种工艺

概述了用微载体系统培养贴壁细胞放大过程中的接种方法,研究了球转球的工艺条件,并建立了球转球的动力学模型。用此方法成功地在国产５０Ｌ生物反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞,细胞密度达１．１×１０＾７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ。     

Vero细胞培养过程中球转球接种工艺的可行性研究II.静态球转球过程

研究了静态球转球接种Ｖｅｒｏ 细胞培养过程中的细胞生长特性,提出了细胞球转球的机理,通过与消化接种的比较,证明在静态球转球接种的细胞培养过程中,细胞在新球与老球表面的生长和细胞的生理状态很不平衡,因而认为不适合于大规模细胞培养过程,并对消化接种在大规模操作中的可行性进行了讨论     

微囊藻毒素对Hela细胞和Vero细胞的毒性效应

ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＭＣＹＳＴ－ＲＲ,ＭＣＹＳＴ－ＹＲ稀释后的毒素溶液处理Ｈｅｌａ细胞和Ｖｅｒｏ细胞后得到如下结果：１．３种毒素溶液对培养的Ｈｅｌａ细胞均有明显的抑制作用和毒性作用,其毒性作用与浓度成正比,致死细胞边缘不整齐不规则,细胞呈脱水状态。倒置显微镜下可见细胞变黑无折光性。高浓度毒素溶液（包括ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＲＲ和ＹＲ３个样品）作用细胞２４ｈ后,细胞完全致死脱落,３个样品间无明显差别;２．     

两种细小病毒MVM宿主细胞的比较研究

ＭＶＭ属自主性细小病毒，对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用，本文对ＮＢＫ细胞的软琼脂克隆形成率和以体进行了分析，确认ＮＢＫ细胞为转化细胞，且对ＭＶＭ敏感。在此基础上，比较了两种细小病毒ＭＶＭ宿主细胞ＮＢＫ和Ａ９的细胞存活率、单位体积培养液中的细胞产量和病毒产量，认为Ａ９细胞更适合于作为细小病毒ＭＶＭ的宿主细胞进行病毒的制备和生产。     

Depolarization Induced by Substance P on Rat Stellate Ganglion Neurons

应用细胞内生物电记录技术，观察神经肽Ｐ物质（ＳＰ）对大鼠星状神经节细胞的影响。ＳＰ在１μｍｏｌ～１０μｍｏｌ或更高的浓度范围内，供试３５个细胞，有２８个细胞发生膜除极反应。用低钙（０．２５ｍｍ）或用含河豚毒素（ＴＴＸ，１μｍｏｌ）克氏液灌流神经节，不影响ＳＰ引起的除极反应的幅度和时程。ＳＰ引起除极反应的同时常伴有膜电阻增大。当膜电位增大时，除极化反应幅度变小，反转电位为－８０ｍＶ至－１００ｍＶ。研究表明，ＳＰ对部分星状神经节细胞具有兴奋作用，使通过这些细胞的信息传递增强；ＳＰ对细胞膜的除极作用是由于其引起细胞膜钾导降低所致。     

小鼠免疫脾细胞与SP2／0细胞融合的杂交瘤细胞的超微结构…

对ＳＰ２／０骨髓瘤细胞，免疫脾细胞和由二者融合而分泌抗水貂肠炎病毒（ＭｉｎｋＥｎｔｅｒｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ，ＭＥＶ）单克隆抗体的杂交瘤细胞超微结构进行了研究。经ＭＥＶ免疫的动物脾细胞糙面内质网发达，细胞质与细胞核的比例增大，贴壁生长的ＳＰ２／０细胞的表面中央为微线毛集中区，其余部分则遍布皱褶，细胞质中内质网不发达，由ＳＰ２／０细胞和免疫脾细胞融合形成的杂交瘤细胞，表面均匀分布有皱褶，无微绒毛，细胞     

BIV92044毒株体外培养体系的建立

将携带ＢＩＶ９２０４４毒株的牛外周血单核细胞分别与新生牛脾细胞、肾细胞和肺细胞建立共培养，经过传代和ＰＣＲ追踪检测及一些因子的处理，发现ＢＩＶ９２０４４毒株能够持续感染脾细胞，并且在脾细胞中对ＢＩＶ的表达调控因子和一些外源因子都能做出应答，从而为ＢＩＶ９２０４４毒株的分子生物学研究建立了一个较好的体外培养体系。     

昆明山海棠对中国仓鼠V79细胞核／质分裂协调性的影响

本研究以哺乳动物非整倍体诱发剂昆明山海棠根部水抽提物９Ｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍ Ｈｙｐｏｇｌａｕｃｕｍ（Ｌｅｖｅｌ）Ｈｕｔｃｈ，ＴＨＨ）处理中国仓鼠Ｖ９７细胞，通过检测Ｖ７９细胞，通过细胞Ｖ７９细胞末期和早Ｇ１期核／质构型变化和双核间期细胞频率，分析了ＴＨＨ对哺乳动物细胞质分裂的影响。结果指出；ＴＨＨ能显著诱发Ｖ７９细胞的异常质裂，并明显的提高双核细胞的频率。结合以往的工作、提示ＴＨＨ不仅对哺乳动     

凋亡抑制基因p35对杆状病毒增殖的影响

以野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒和多角体基因缺失的ＡｃＮＰＶ分别感染Ｓｆ９－３５细胞,研究了ｐ３５的稳定表达对杆状病毒增殖的影响。     

小鼠免疫脾细胞与SP2／0细胞融合的杂交瘤细胞的超微结构研究

对ＳＰ２／０骨髓瘤细胞、免疫脾细胞和由二者融合而分泌抗水貂肠炎病毒（ＭｉｎｋＥｎｔｅｒｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ，ＭＥＶ）单克隆抗体的杂交瘤细胞超微结构进行了研究．经ＭＥＶ免疫的动物的脾细胞糙面内质网发达，细胞质与细胞核的比例增大．贴壁生长的ＳＰ２／０细胞的表面中央为微绒毛集中区，其余部分则遍布皱褶，细胞质中内质网不发达．由ＳＰ２／０细胞和免疫牌细胞融合形成的杂交瘤细胞，表面均匀分布有皱褶，无微绒毛，细胞在贴壁基部周围伸出裙状伪足，扩大了贴壁面积，使细胞贴壁较牢固．本实验还对ＳＰ２／０细胞和杂交瘤细胞的染色体做了计数，二者的平均数分别为６７和９７，在传代培养中染色体有丢失现象．     

蛤蚧ADVR视区结构

用Ｎｉｓｓｌ法，Ｇｏｌｇｉ法研究蛤蚧ＡＤＶＲ组构，ＡＤＶＲ分为３个区：前外侧区，内侧区，后外侧区。从头到尾ＡＤＶＲ分为表层细胞板和核心部。ＡＤＶＲ视区神经元分布不均匀，表层细胞板中６－３０个神经元胞体相连散乱排列成团状或不规则柱状；核心部神经元分散或３－５个成团。     

具全期启动子盒的杆状病毒高效表达载体的组建与应用

通过ＰＣＲ扩增，得到苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｕｔｏｇｒａｐｈａｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａＮｕｃｌｅａｒＰｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓ，ＡｃＮＰＶ）具早晚期启动子元件的ｐ３５基因启动子，将其插入到杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３多克隆位点上游，使之与ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３质粒中的人工合成后期启动子（ＰＳｙｎ）、多角体ＸＩＶ启动子（ＰＸＩＶ）串联构成早期、晚期、极晚期能持续启动外源基因表达的转移载体质粒ｐＳＸ３５．将ｐＳＸ３５用于组建含ＨＢｓＡｇ基因并形成多角体的重组ＴｎＮＰＶ，ＨＢ－ｓＡｇ基因的表达量显著提高，表达时间亦明显提前，从而实现了外源基因在杆状病毒表达系统的全期、高效表达．ｍＲＮＡ引物延伸试验结果显示，Ｐｐ３５在重组病毒中可产生２套转录本，分别于病毒感染的早期和晚期起始ＨＢｓＡｇ基因的表达．     

棉铃虫细胞系SFE—HA—8212的克隆化及对HaSNPV受纳性提高的…

用细胞临界生长密度法对棉铃虫蛹卵巢细胞系ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２进行克隆化，获得８株克隆细胞系。各株克隆细胞系各自的形态较为均一，但相互间在形态，生长特性，对病受毒纳性等方面有很大差别，其中一株Ｃ８细胞对棉铃虫单粒包埋型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶ）的受纳性明显高于ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２细胞，形成角体的细胞比率，多角体的产量，游离病毒粒子的产量及多角体蛋白的产量均有提高，是研究和应用ＨａＳＮＰＶ的有效系     

杆状病毒p35基因延缓昆虫细胞凋亡

构建了以新霉素抗性基因为筛选标让的带有ｐ３５基因的转移载体ｐ３５ＩＥ１Ｎｅｏ,以此载体转染Ｓｆ９细胞,经Ｇ４１８筛选得到染色 上稳定整合质粒ｐ３５ＩＥ１Ｎｅｏ的Ｓｆ９细胞,     

残铝在35CrNi3MoV钢中的作用

研究了残铝在３５ＣｒＮｉ３ＭｏＶ钢中的作用与作用机理。结果表明，３５ＣｒＮｉ３ＭｏＶ钢的最佳残铝含量为０．０１０％Ａｌ。     

35GHz高线性VCO的研制

讨论了毫米波ＶＣＯ电调特性的开环线性校正原理，采用模拟断点式线性校正器对３５ＧＨｚ ＶＣＯ电调特性进行了开环线性校正。实验结果表明，该３５ＧＨｚ高线性ＶＣＯ在１２０ＭＨｚ电调带宽内电调非线性度小于１％，输出功率大于６０ｍＷ，频谱质量良好，满足系统指标。