脂肪酶产生菌的筛选及其脱墨的初步研究

采取油墨污染的土样,通过矿物油富集培养,平板筛选共得到76株菌株.酶活测定表明2株酶活较高,分别为5 446和12 298 U/L.经分类鉴定表明一株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.),一株属于产碱菌属(Alcaligenes sp.).对后者产酶条件进行了研究,结果表明以1%蔗糖为碳源,1%牛肉膏为氮源的液体发酵培养基,起始pH7.0,20 mL装液量,30℃发酵72 h产酶最高.利用酶液对废报纸进行初步脱墨,证实了该酶对采用矿物油为连接料的油墨有明显的分解作用.     

碱性脂肪酶产生菌的筛选与产酶条件及酶学性质研究

作者从泸州油脂厂附近的土壤中,筛选到一株产碱性脂肪酶活性较高的细菌,经初步鉴定为假单胞菌(Pseudomonassp.).经对该菌株进行产酶条件和酶学性质研究发现,该菌株的最适产酶发酵培养基为(%):酵母浸出汁1.5,黄豆粉1,NaCl0.2,K2HPO40.2,NaH2PO40.2,MgSO4·7H2O0.01,初始pH8.5.100mL三角瓶装液10mL,30℃,150r/min摇床培养48h,酶活最高可达19.1U/mL.酶的最适反应温度40℃,最适pH8.5,该酶具有较好的热稳定性.     

产脂肪酶菌株的筛选、鉴定与产酶条件优化

以橄榄油为唯一碳源,采用平板变色圈法,从土壤中筛选到1株脂肪酶高产菌XYU-6,经生理生化试验鉴定及16S rDNA序列分析,XYU-6被鉴定为洋葱假单胞菌(Burkholderia cepacia).设计单因素试验,对其产酶条件进行优化,优化后的培养条件为:葡萄糖1.00;,蛋白胨2.00;,豆油1.00;,KH2 PO40.35;,K2 HPO4 0.15;,MgSO40.05;,初始pH值为7.0,培养温度30℃,培养48 h,酶活可达24.1U·mL-1,是优化前的1.65倍.     

铜绿假单孢菌脂肪酶产生条件

产生优质脂肪酶的铜绿假单孢菌JEP－606菌株的培养成分（质量分数）为大豆1.5％,玉米浸出液3．0％,葡萄糖0．5％,橄榄油0．75％,当菌株液体培养时,细胞直径约0．4μm,长1．5～3．5μm,革兰氏阴性,产生蓝绿色素．提高菌株脂肪酶活性和生物量的培养条件是：初始pH7．0～9.0,28℃,150r／min,培养时间60～140h,装液量25mL（250mL三角瓶）和0.75％橄榄油．     

低温脂肪酶产生菌的筛选及鉴定

通过三丁酸甘油酯平板法从太平洋帕里西维拉海盆5010m的底泥中共筛出八株可产脂肪酶的菌株,其中的两株生理生化特征极其相近的菌脂肪酶活性最高,并且对橄榄油平板产生荧光。对两株菌进行鉴定,分析其生理生化特征和16SrDNA产物序列,确定这两株菌均属于发光杆菌属,但是和该属的各种还有一定差异,对其分类地位的最后确定还需进一步的系统发育学分析。其中D2菌株所产脂肪酶的最适作用温度在35℃左右,证明其脂肪酶为低温酶;最适作用pH值在7～9之间,最适pH值8。     

1株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其脂肪酶基因的克隆表达

从武汉市郊蓖麻地土壤中分离到1株产脂肪酶菌株,结合形态观察和生理生化鉴定,扩增16S rDNA并测序,运用Blast比对构建了进化树,发现该菌与粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的同源性高达99％,初步鉴定该菌属于沙雷氏菌属(Serratia),命名为Serratia sp.HS-L5.克隆了脂肪酶...     

莠去津高效降解菌的筛选及鉴定

为克服传统降解菌筛选的局限性,采用全新的筛选方法从长期施用莠去津的土壤中分离筛选出1株高效莠去津降解菌,该菌株可利用莠去津作为氮源生长,降解率可达98.46%.对其最佳生长条件及影响因素的实验研究显示最佳条件为:温度30℃、pH7.0.经生理生化鉴定和16s序列比对分析,鉴定其为丁香假单胞菌.外加氮源可促进菌体的生长但不会完全抑制农药的降解.因此,该研究为降解菌的筛选方式提供了全新的思路并为污染环境修复奠定了坚实的基础.     

一株冷凝油污降解菌的分离筛选与初步鉴定及其功能研究

从受到食堂排放的冷凝油污污染的土壤中获取土壤样本,从中分离筛选可以分解利用冷凝油污的细菌菌株.经过富集培养、初筛、复筛、扩大培养、酶活测定和表面活性测定,获得了一株既能产生脂肪酶又能产生生物表面活性剂的细菌菌株(BNUBIODQ).经形态学、部分生理特征及16SrDNA序列分析,将该菌株命名为Pseudomonas aeruginosa BNUBIODQ.该菌株可以产生具有较高表面活性和乳化性能的生物表面活性剂,同时还可产生可诱导的胞外脂肪酶.该菌株在降解冷凝油污和环境保护领域将具有潜在的应用价值.     

导入脂肪酶基因提高荧光假单胞菌26-2的产酶效率

采用导入脂肪酶基因的方法对荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescence）26—2的产酶效率进行实验。实验以质粒ppic9k—lipA为模板,通过PCR的方式在26—2脂肪酶基因的两端引入BamHl和EcoR1的酶切位点,并将该基因与大肠杆菌荧光假单胞菌穿梭质粒pDSK 519连接,获得重组质粒pDSK519-lipA,再将重组质粒转入荧光假单胞菌26—2,获得工程菌株P．fluorescence 26—2—1。在相同的发酵条件下,工程菌株的发酵液酶活力比原始菌株的发酵液酶活力提高2倍,实现了荧光假单胞菌脂肪酶基因的同源性表达。     

有机溶剂中脂肪酶固定化的研究

研究了在有机溶剂中的脂肪酶的固定化。并确定了固定化脂肪酶的条件,如载体、有机溶剂、初水量等。固定化脂肪酶的回收率达到48.30%且稳定性好,其半衰期为360h.     

产脂肪酶假丝酵母的筛选及其研究

从武汉油污样中分离获得一株高产脂肪酶酶的假丝酵母R－2．发酵研究表明,最适培养基为蛋白胨20g/L,蔗糖10g/L,橄榄油5g/L,(NH4)2SO41g/L,MgSO4.7H2O1g/L,K2HPOR1g/L和吐温－801g/L,最适产酶条件为30℃,初始pH7．0,转速200r/min,培养32h ,最高产酶活力达到1437u/mL,酶作用最适温度40℃,最适pH7.5。     

产胞外脂肪酶菌株的筛选及底物测定

文中采用简便快速的平板检测法，通过观察培养基上生长的菌落直径和其水解圈直径的大小，进行初筛。再用液体培养，采用滴定法测定酶活性，进行复筛筛选出１０株优良菌株。活性最高为４．４５×１０－８ｍｏｌ／ｓ，其中Ｄ６菌株以苏籽油、亚麻油和月见草油为底物，酶活性分别达到１４．２９×１０－８ｍｏｌ／ｓ，１０．９０×１０－８ｍｏｌ／ｓ和１１．３５×１０－８ｍｏｌ／ｓ。     

包衣酶在油/水两相体系中催化水解橄榄油反应

用合成的谷氨酸十二烷基酯核糖醇对来源于Candidarugosa的脂肪酶包衣后在油/水两相体系中水解橄榄油为反应模型.确定了最佳水油比范围为1～3,最适pH值为7.0左右,温度为30℃,油相有机溶剂为异辛烷.包衣酶的最大活性达到48.8mmol·min-1·g-1蛋白质,是天然酶活性的1.8倍.对底物选择性研究表明:包衣酶和天然酶的最适底物均为橄榄油,酰基链越长,酶活越高.包衣酶的米氏常数只有天然酶的一半,最大反应速度是天然酶的1.4倍.     

花生四烯酸产生菌的选育

通过对深黄被孢霉AS3．2793和MUI0310进行紫外线和氯化锂复合诱变、以及硫酸二乙酯和氯化锂复合诱变，涂布在诱变培养基上，对分离出的突变株进行摇瓶发酵初筛，从中得到一支产花生四烯酸的菌株。该菌株在摇瓶产脂培养基中发酵8天：生物量达16．57g／l，油脂含量达49．10％，油脂得率达8．14g／l，油脂中花生四烯酸的含量为0．9％．     

一株产耐热碱性脂肪酶芽孢杆菌的筛选及其所产酶性质的研究

从武汉市白沙洲沙鸥食用油总厂分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶的产生菌,经鉴定为产邪包的短杆菌、革兰氏阳性、该菌株的最适生长温度为４５℃,所产酶的最适作用温度为６０℃,最适ＰＨ为１０．０,且ＰＨ在８．０－１１．０范围内酶蛋白性质稳定。     

腈水合酶产生菌的分离、鉴定及部分酶学性质研究

从长期被腈化物污染的土壤中筛选到一株腈水合酶产生茵YL-1，经过对分离菌株形态特征及生理生化指标的鉴定，该菌株初步鉴定为Rhodococcus．在含有丙烯腈的培养基中，细胞的生长与产物腈水合酶的合成相关，酶学性质研究表明：酶反应最适温度为30℃，最适pH为7．0．该酶在50℃以下，pH为6．0至9．0范围内较稳定。     

产耐热过氧化氢酶菌株的筛选和培养

过氧化氢酶能催化过氧化氢的分解,在食品、环保、纸浆和造纸业、以及纺织行业具有重要的工业应用价值。研究从堆肥中分离了一株产过氧化氢酶的嗜热菌。该菌最适生长温度为55℃,最适生长pH值为7.0,最适NaCl浓度为1.5%。通过16S rDNA编码基因序列分析,该菌和环状芽孢杆菌有较高的同源性,命名为Bacillus sp.SHT2。通过对培养基中的碳、氮源进行优化,酶活达到196.9 U/mL。酶学性质研究表明该菌产生的过氧化氢酶具有良好的热稳定性、pH稳定性和储存稳定性。