HCV基因分型与血清分型相关性的研究

目的 探讨HCV血清分型和基因分型的相关性及临床意义。方法 HCV血清学分型应用ELISA法；HCV基因分型应用型特异性PCR法。结果 1．血清学分型率为52．38％（88／168），其中血清1型阳性率为48．86％（43／88），血清2型阳性率为34．09％（30／88），血清（1＋2）混合型阳性率为17．04％（15／88）。基因分型率为54．17％（91／168），其中基因Ⅱ型阳性率51．64％（47／91），基因Ⅲ型阳性率为31．86％（29／91），基因（Ⅱ＋Ⅲ）混合型阳性率为16．48％（15／91）。结论 兰州地区HCV以血清1型即基因Ⅱ型为主，其次是血清2型即基因Ⅲ型以及血清（1＋2）型即基因（Ⅱ＋Ⅲ）型。     

流式细胞术检测TcR Vα24/Vβ11双阳性NKT细胞及其在HCV感染者中的应用

目的 研究丙肝病毒感染者外周血NKT细胞含量与HCV感染状态之间的相关性.方法 应用流式细胞术检测TcR Vα24/Vβ11双阳性NKT细胞.结果 抗-HCV阳性且HCV RNA也阳性的病例NKT细胞数量明显低于抗-HCV阳性而HCV RNA阴性的病例(P<0.01),明显低于正常对照组(P<0.05).结论 由于NKT细胞数量减少或活化受阻,造成HCV的持续感染,不利于病毒的清除;另一方面,由于肝内有HCV的存在,NKT细胞大量向肝内趋化,导致外周血的数量相对减少.     

EIA法检测Ahti-HCV1700例结果分析

丙型肝炎病毒（HCV）是近几年来公认的可引起输血后肝炎的病原体，由输血引起的HCV感染急性期抗HCV阳性者70％—80％慢性化，继而转化为肝硬化，还可能进一步发展为肝癌（1）因此，HCV的感染研究和献血员的筛选受到了广泛的重视。1材料与方法1．1机关干部、教师、工人、职员等正常人血清、其中男性897例，女性803例，年龄18—65岁。2检测方法2．1抗HCV检测，EIA法，采用上海科华公司体外用试剂合，严格按说明书规程操作。3检测结果3．1总检测人数96／1700例，阳性率5％。3．2男性总人数58／897例，阳性率占6％。3．3女性总人数28／8…     

PCR扩增检测献血者中TT病毒DNA及部分TTV基因序列分析

目的：了解江苏地区献血者中新型肝炎相关病毒－－TT病毒的感染状况,探讨TTV感染与ALT异常的相关性,方法：设计通用引物,采用半套式聚合酶链反应（hemi-nested PCR)方法检测195份献血者血清标本,结果,在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中,检出TTV DNA阳性标本36份,TTV DNA的阳性检出率为36．3％,而在96份正常献血者血清标本中,检出TTV DNA阳性标本16份,TTV DNA阳性检出率为16．6％,明显低于ALT常献血者人群,对2株阳性株序列分析结果显示,一株与TX011（G1b日本代表株）的同源性为98．6％,属于G1b亚型,另一株虽可归属于G1,但与G1a ,Blb差异较大,可能为G1的新亚型,结论：江苏地区献血者人群中存在TTV感染,国内首次报告检出TTV G1b亚型及新的亚型,献血者ALT异常与TTV感染密切相关,输血可能成为传播TTV感染的途径之一。     

江苏地区无偿献血人群HCV流行病学调查

本文旨在研究江苏地区无偿献血人群的HCV感染情况及其流行特征.对2013年-2014年度江苏省血液中心157,119名健康无偿献血者血液标本进行抗-HCV ELISA双试剂检测和HIV、HBV和HCV6-混样核酸检测,对HCV RNA阳性标本用定量PCR方法检测病毒滴度情况;对HCV RNA阳性标本进行巢式PCR扩增核心区片段,根据测序结果分析基因型,分析HCV基因型的分布及其与性别、年龄的关系.结果共检出347例抗-HCV反应性标本,阳性率为0.22%.经核酸检测,在抗-HCV阴性和单试剂阳性标本中均未检出HCV RNA阳性标本;125例抗-HCV双试剂阳性标本中HCV RNA阳性标本46例,病毒血症阳性率为36.8%.巢式PCR扩增HCV RNA阳性标本并成功测序和分型36例.基因型分型为1a(2.6%)、1b(74.4%)、2a(10.2%)、3b(5.1%)、6a(5.1%)和6n(2.8%)4种基因型和6种基因亚型,未发现4型和5型.1型和2型在男性组中比例明显高于女性组,但差异无统计学意义;1型与2型患者平均年龄小于3型和6型患者,差异有统计学意义.结果显示,江苏地区无偿献血人群抗-HCV阳性率呈现下降趋势,HCV的感染与性别和职业受教育程度没有相关性,但与年龄和职业具有相关性,感染的HCV基因型以1b为主,不同基因型在不同年龄之间具有显著差异.     

输血后的丙型肝炎及其预防

<正>丙型肝炎是一种血清型肝炎,国外流行病学研究表明:自愿供血者的抗体-HCV阳性率为0.25％-1.2％,丙型肝炎约占70％-95％。心脏手术病人感染丙肝者占2％-51％,国内的报道:北京地区献血者抗-HCV阳性率为2.95％;上海1004例健康人丙型肝炎率为0.2％。由输血或其它血制品引起的肝炎比率为2.4-27.3％,其中接受职业供血者血     

济南市在校大学生无偿献血者HBV、HCV、HIV和梅毒感染状况调查分析

目的：了解济南市无偿献血大学生HBV、HCV、HIV和梅毒感染状况.方法：对2010年2月～2011年10月8568名无偿献血大学生HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP检测结果进行回顾性分析.结果：8568名大学生HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP的阳性率分别为0.57%、0.32%、0和0.12%,各项指标阳性率明显低于普通无偿献血者.结论：在校大学生HBV、HCV、HIV和梅毒的感染率低,是无偿献血的低危人群.     

苦参酸衍生物的合成及抗丙型肝炎病毒活性研究

自主创新的12-N-对甲氧苄基苦参酸(1)是一个全新结构骨架的抗丙型肝炎病毒(HCV)化合物,主要通过下调宿主肝细胞热休克应急蛋白70(Hsc70)的基因表达而发挥抗HCV活性。本研究以化合物1为先导化合物,合成与评价一系列新苦参酸衍生物的抗HCV活性,进一步完善此类化合物的抗HCV构效关系,同时通过安全性与药代动力学等初步成药性评价,获得具有较高成药性的抗HCV化合物,为将此类化合物发展成一类新型抗HCV药物奠定基础。共设计合成了15个全新结构的苦参酸衍生物,采用qRT-PCR方法测定它们对HCV感染复制的抑制作用,通过药代动力学和急毒试验评价了代表性化合物12-N-间硝基苄基苦参酸(5b)的成药性特征。12-N上的苄基片段为活性必需基团。化合物5b具有较好的抗HCV活性,选择性指数(SI)高于38。另外5b还显示出良好的药代动力学特征和安全性(LD501 000mg/kg)。化合物5b表现出较高的成药性特征,值得进一步研究。     

慢性丙型肝炎患者HCV基因分型研究

我国是丙型肝炎的高发地区。自然人群中丙型肝炎病毒（HCV）感染率为0.7%~3.1%。作者对兰州市部分人群调查健康人群HCV感染率为4.4%。HCV感染虽不如HBV感染常见，但是HCV感染更容易引起慢性化，并在肝硬化和肝癌的发生发展中起作用。HCV基因型的地理分布差异较大。目前人们对不同基因型感染致病机理和临床意义的研究还较少，为不断积累我国HCV基因分型地区性分布资料，了解本地区HCV基因型的分布特点，我们对慢性丙型肝炎患者血清进行了HCV基因分型研究。1 材料与方法1.1 研究对象1996年6月—1999年12月我院传染科住院和门诊的慢…     

2002-2005年吉安市无偿献血血液检测结果报告

目的 了解吉安市近几年无偿献血血液检测情况，以进一步提高血液质量。方法 对本站2002-2005年接待的35059名无偿献血者，参照《献血者健康检查标准》，采血前，进行咨询和身体检查；采血后对血型、ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒试验进行二次检测。结果 在35059人次中，总不合格数为1522人次，占总数的4．33％。其中ALT异常占不合格数的44．74％，而且男性和女性有显著性差异（P〈0．01）；HBsAg占35．54％；抗-HCV占5．12％；梅毒占13．93％；抗-HIV占0．79％，共12人次初筛阳性，只有1例为确证阳性。结论采供血单位应加强无偿献血者采血前的咨询和快速检测工作，减少ALT异常和HBsAg阳性血的报废，应选用特异性强，敏感度高的检测试剂，严把血液检测质量关。     

丙型肝炎病毒抗体快速诊断试剂的方法学研究

通过将抗原片段用点膜仪固相在硝酸纤维素膜上,依次加入标本、生物素标记的IgG、链霉亲和素-碱性磷酸酶,最后加底物显色,建立一种快速、敏感、实用的丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测方法.结果表明,整个检测过程仅需15～25 min,操作简便,已通过"第3代ELISA抗-HCV诊断试剂国家参考品".该方法简便、快速,结果易判断,既有ELISA的特异性和灵敏性,又有金标记法的检测速度;既适合输血筛查实验,又适合临床常规检查.     

慢性肝炎患者91例庚型肝炎病毒抗体测定

目的：阐明HGV在慢性乙肝和慢性丙肝病人中的感染情况。方法：甩ELISA法检测上述二类对象的度型肝炎病毒抗体（抗—HGV）。结果：35例慢性丙肝中有13例阳性,阳性率为37．1％。56例慢性乙肝中有5例阳性,阳性率为8．9％。结论：侵性肝炎合并HGV感染率较高,尤其是慢性丙肝。可能是HBV和HCV感染易慢性化的原因之一,但较单一HBV和HCV感染的临床表现无明显加重趋势。     

丙型肝炎病毒5′NCR转基因模型及在反义核酸物筛选和评价中的应用

为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒（HCV）药物的筛选及评价，将HCV5′NCR－C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体，通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定，获得HCV5′NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-neo4，将其转染HepG2xleq,x G418筛选，从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706。该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性，转基因拷贝数为140。利用该细胞株，通过脂质体介导，对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸（ASODNs)即HCV363，HCV349，HCV279进行了活性评价，结果显示，三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性，浓度在0．5μmol/L时，三者对HCV5′NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61％，55％及48％。该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径。     

62例肝功能异常学龄儿童输血传播病毒的检测结果

目的：分析血丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高的学龄儿童(7—12岁)输血传播病毒(TTV)感染情况，并对其致病性及与其它肝炎病毒感染的关系做初步探讨。方法：应用巢式聚合酶链反应技术(Nested PCR)，对62例体检发现ALT升高和75例ALT正常的学龄儿童血标本进行TTV DNA扩增，通过凝胶电泳分离扩增产物；用ELISA方法同时检测甲、乙和丙型肝炎病毒感染的血清标志。结果：ALT升高中，TTV DNA检出率为12．9％(8／62)，其中3例HBsAg同时阳性(4．8％)，1例与抗—HCV同时阳性(1．6％)；ALT正常中，TTV DNA检出率为2．7％(2/75)，两差异具有显性意义(P＜0．05)。结论：肝功能异常学龄儿童存在较高的TTV感染率且有可能致肝功能损害。TTV与肝炎病毒可重叠感染同一儿童。     

甘南州无偿献血者Rh(D)阴性调查分析

了解甘南州无偿献血者Rh(D)阴性人群民族分布情况。对2005年—2015年23448名无偿献血者进行抗-D快速筛查,筛查Rh(D)阴性献血者用抗人球蛋白法进行确认。通过检测得知,23448名无偿献血者中筛查出Rh(D)阴性献血者87人次,占献血总人数的0.37%。甘南州Rh(D)阴性无偿献血者分析调查,对本地区Rh阴性献血者队伍的建立和保证临床稀有血型的应急供应提供参考价值。     

2002～2005年吉安市无偿献血血液检测结果报告

目的了解吉安市近几年无偿献血血液检测情况,以进一步提高血液质量。方法对本站2002～2005年接待的35059名无偿献血者,参照《献血者健康检查标准》,采血前,进行咨询和身体检查；采血后对血型、ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒试验进行二次检测。结果在35059人次中,总不合格数为1522人次,占总数的4.33%。其中ALT异常占不合格数的44.74%,而且男性和女性有显著性差异(P＜0.01)；HBsAg占35.54%；抗- HCV占5.12%；梅毒占13.93%抗-HIV占0.79%,共12人次初筛阳性,只有1例为确证阳性。结论采供血单位应加强无偿献血者采血前的咨询和快速检测工作,减少ALT异常和HBsng阳性血的报废,应选用特异性强,敏感度高的检测试剂,严把血液检测质量关。     

无偿献血者采血前ALT初筛检验在大理地区的实用性评价

目的:通过对我站献血者采血前丙氨酸氨基转移酶(ALT)初筛检验前后检测结果分析,评价献血者采血前ALT初筛检验在大理地区的实用性。方法:对我站2010年及2011年无偿献血者总体及ALT初筛检验前后检测结果进行对比分析。结果:开展采血前ALT初筛检验后,降低了ALT阳性报废率,差异有统计学意义。结论:通过对献血者采血前进行ALT初筛检验,能有效的减少血液的报废率。     

献血队员表面抗原的流行病学调查

本文对辽源市1993年公民无偿献血队员3974人进行表面抗原阳性流行病学调查,调查结果表明,表面抗原阳性578人,阳性率14.5％,男性高于女性559人,女性19人。合并转氨酶增高可定为慢性乙型肝炎149人。矿区和偏僻的郊区表面抗原阳性率高于市民。在调查的基础上对献血队员单位环境条件和各年龄段进行了分类,辽源地区表面抗原阳性率较高的原因进行了分析。     

丙型肝炎病毒5＇NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用

为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒(HCV)药物的筛选及评价,将HCV5＇NCR-C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体,通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定,获得HCV5＇NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-ne04,将其转染HepG2细胞,经GA18筛选,从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706.该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性,转基因拷贝数为140.利用该细胞株,通过脂质体介导,对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸(ASODNs)即HCV363,HCV349,HCV279进行了活性评价,结果显示,三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性,浓度在0.5μmol/L时,三者对HCV5＇NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61%,55%及48%.该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径.     

丙型肝炎病毒(HCV)截短型E2的原核表达和蛋白纯化

对丙型肝炎病毒(HCV)截短型包膜糖蛋白E2-661基因进行原核表达和纯化.利用PCR法扩增出661 bp的截短型HCV E2区基因片段,并将测序正确的E2-661基因克隆入原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果表明目的蛋白分子量约为35 kDa,主要以包涵体形式大量存在.Western-blot结果显示目的蛋白与抗His标签单抗及HCV阳性血清均具有良好的反应原性.并通过镍离子亲和层析方法获得纯化的重组蛋白.以上结果为HCV E2功能的进一步研究奠定了基础.