禽流感病毒检测免疫组织化学染色改良方法的建立

目的本研究对如何消除禽流感病毒检测免疫组织化学染色的非特异性反应进行探讨,从而建立一种免疫组化染色的改良方法。方法对抗原修复方法、一抗孵育条件、内源性生物素封闭条件等进行优化,并用SABC检测系统对改良法和常规法进行比较。结果采用微波炉加热法修复抗原、一抗在37℃孵育1.5~2 h、20%的蛋清液室温封闭20 min的改良法比常规法的染色效果好,可有效消除背景干扰,阳性表达清晰,对比度高。结论建立的改良法特异性强,可用于禽流感病毒的基础研究和临床检验。     

禽流感病毒型及亚型特异性免疫酶染色技术的研究

 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立型及亚型特异性免疫酶染色技术,用于检测或鉴定禽流感病毒．优化反应条件,确定单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较．结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒．     

甲状腺冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色效果比较

目的通过对甲状腺冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色效果进行对照观察．发现冰对蜡块与冰剩蜡块对免疫组织化学染包效果的差异,为选择冰对蜡块与冰剩蜡块做免疫组织化学提供理论实践依据。方法3冰对蜡块与冰剩蜡块分别切片用EnVision法做TTF-1,CK19,Gal—3,HBME—1．TPO,TG免疫组织化学染色。结果对TTF—1．CK19．Gal-3,HBME-1,TPO,TG免疫组织化学染色结果的背景．定位进行分析．冰对蜡块与冰剩蜡块免疫组织化学染色各项指标阳性率完全一致。结论冰对蜡块与冰剩蜡块分别做免疫组织化学染色结果无明显差别．在没有冰剩蜡块或冰剩蜡块不符合要求时选择冰对蜡块做免坡组化．结果对诊断无影响。     

免疫组织化学实验技术研究

以SD大鼠睾丸为实验材料,应用免疫组织化学方法进行染色,探讨免疫组化石蜡切片实验中各条件对实验结果的影响．结果表明,玻片处理、试剂纯净度、取材到封片等,都对实验结果会产生较大影响．而脱水、抗原修复、过氧化氢、一抗及正常羊血清孵育过程是影响实验的关键因素．     

抗结核分枝杆菌感染的免疫机制

对宿主利用体内各种细胞与结核分支杆菌的相互作用进行了综述.机体抵抗结核分枝杆菌感染的机制包括特异性免疫和非特异性免疫,参与非特异性免疫的主要有巨噬细胞和γδT细胞,另外,树突状细胞在引发T细胞免疫方面起着关键的作用.由于结核分支杆菌是胞内寄生菌,特异性免疫以细胞免疫为主,主要包括CD4+T细胞免疫和CD8+T细胞免疫.     

CREB在家蚕中枢神经系统中的免疫组织化学定位

用免疫组织化学的方法,研究了CREB蛋白在家蚕中枢神经系统中的分布.结果表明,家蚕CREB蛋白在5龄幼虫期和蛹期的中枢神经系统中均有表达,主要分布在脑和神经节的胞体密集区.从5龄幼虫期到蛹期,随着发育的进行,CREB阳性细胞数逐渐减少.比较二化性品种的滞育系与非滞育系,CREB蛋白在5龄幼虫脑中的表达分布存在明显的差异,滞育系的阳性反应细胞比非滞育系多.这些结果暗示,CREB蛋白可能参与家蚕生长发育、变态的调控以及环境条件调控家蚕滞育的过程.     

免疫组织化学在心脏性猝死研究中的应用

上世纪80年代,免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术得到发展,法医病理学家开始将这一技术应用于法医学领域,主要用于寻找心脏性猝死早期心肌缺血的病理形态学依据、青壮年猝死综合症的发病机理的研究、不典型心肌炎的死因诊断等。近年来应用于法医病理学研究的诊断标志物主要有心肌肌动蛋白(Actin)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、纤维连接蛋白(Fn)、纤维蛋白原(Fg)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、早期生长反应因子(Zif/268)、血管内皮生长因子(VEGF)、心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、CD68、肌红蛋白(Mb)、Cx43、内皮素(Endothelin,ET)、补体C5、细胞调亡相关蛋白Bcl-2和Bax等。     

浅谈PBL在研究生《免疫组织化学》教学中的实践

研究生科研创新能力的培养是研究生教育中极为重要的内容,科研创新能力也是高级人才的必备能力之一。免疫组织化学方法在医学研究中的应用范围较广,合适的教学方法对研究生掌握这种实验方法以及科技创新能力的培养有着很大的作用。本文借鉴国外现行教学方法,结合在研究生免疫组织化学教学的实践,发现PBL教学方法更有利于研究生对免疫组织化学技术的学习和综合科研能力的培养。     

口腔扁平苔藓中Caspase-3和PTEN 蛋白的免疫组织化学观察

目的：探讨Caspase-3和FIEN蛋白在口腔扁平苔藓病变发生发展中的作用及两者间的关系。方法：采用S—P免疫组化方法对28例口腔扁平苔藓及5例正常口腔黏膜中Caspase-3和PTEN蛋白表达进行检测。结果：口腔扁平苔藓病损中Caspase-3的阳性率上皮层和固有层均为100％，与正常口腔黏膜相比，表达有显著统计学意义（P〈0．01）。口腔扁平苔藓病损中PTEN蛋白阳性率为100％，与正常口腔黏膜相比，无统计学差异（P〉0．05）。口腔扁平苔藓中Caspase-3与PTEN蛋白表达呈正相关，（P〈0．05）。结论：Caspase-3和PTEN蛋白均参与口腔扁平苔藓病变的发生及发展过程，且两者之间具有相关性。     

免疫组织化学在扫描电镜上的应用与进展

本综述文章介绍了若干个免疫组织化学标记物的检查方法,如胶体金、铁蛋白、外源凝集素、辣根过氧化物酶(HRP)、二次电子像、背散射电子像等在扫描电镜上的应用。本技术需要有高分辨率的扫描电镜,并装备的场区发射电子枪、二次电子和背射电子检测器,还要有临界点干燥器、喷碳仪以及胶体金结合物(抗体、蛋白A、链抗生物素蛋白、外源凝集素等)、铁蛋白结合物、HRP—结合物等。     

免疫组织化学技术在肿瘤病理诊断上的应用

近年来，免疫组织化学技术在肿瘤病理诊断上得到广泛应用和普及，技术也日渐成熟，特别是即用型试剂盒抗体的商品化，使免疫组织化学技术在我国大中型医院中做为常规病理诊断方法成为可能。以下对临床病理医师应用此技术可能涉及到问题进行探讨。l免疫组化在肿扫清理诊所应用的意义免疫组化在肿瘤病理诊断必须以观察HE切片为基础，这是1996年我国举办的（全国免疫组织化学技术与诊断标准专题研讨会）所达到的共识（‘］。当病理医生迢到疑难病例决定是否应用免疫组化技术，必须是全面仔细观察了IIE切片，然后再根据鉴别诊断要求选择适当抗…     

猕猴大肠5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学研究

以免疫组织化学ＳＰ法显示猕猴大肠含５－ ＨＴ的细胞,并用Ｗｅｉｂｅｌ体视学方法对其进行了定量分析．结果表明,猕猴大肠５－ ＨＴ免疫活性内分泌细胞的密度在结肠离心段最高,直肠密度中等,盲肠和结肠向心段最低．５－ ＨＴ免疫反应阳性细胞多分布在肠腺处,其形态多样,大多为锥形、梭形、圆形等．有些细胞的基底部有突起,突起的末端含有５－ ＨＴ阳性物质;有些细胞的５－ ＨＴ阳性物质释放到腺腔或肠腔面．     

半乳糖凝集素PPL13的表达纯化及免疫组织化学研究

在E．coli M15中表达纯化半乳糖凝集素PPL13(placenta protein lectin13)，制备兔抗人PPL13多克隆抗体。以免疫组织化学法检测PPL13在人胎盘及脐静脉的表达情况．结果显示PPL13分布在胎盘及脐静脉的内皮细胞中．提示PPL13可能与胎盘及脐静脉内皮细胞的功能相关．     

免疫组织化学技术在推断颅脑损伤时间中的应用

颅脑损伤经历时间的推断,涉及到生前伤与死后伤的鉴别以及伤后存活时间的判定,在法医学中占有重要地位。随着对颅脑损伤经历时间推断研究的深入,常规病理学方法已经不能满足需要,免疫组织化学(IHC)技术开始广泛应用。目前应用较多的指标主要有胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、S-100蛋白、热休克蛋白70(HSP70)、C-FOS、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞凋亡相关蛋白Bc1-2、NOS1和NOS2、环氧合酶(COX1和COX2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)等。     

光学免疫传感器中芯片的制备

为满足光学免疫传感器在环境监测和食品卫生检测领域中应用的要求,研究一种免疫芯片制备方法,并用平面波导型荧光免疫传感器对免疫芯片的性能进行了评价。该方法可以将小分子物质固定到玻璃基底上。试验结果表明:该芯片能够有效抑制蛋白质的非特异性吸附,并对目标物质抗体的响应符合Logistic方程;修饰基片的氨基葡聚糖的相对分子质量和氨基摩尔比都影响免疫芯片对抗体响应灵敏度;平行测定20次的信号标准偏差小于5%,测定后芯片性能没有明显下降。     

光学免疫传感器中芯片的制备

为满足光学免疫传感器在环境监测和食品卫生检测领域中应用的要求,研究了一种免疫芯片制备方法,并用平面波导型荧光免疫传感器对免疫芯片的性能进行了评价。该方法可以将小分子物质固定到玻璃基底上。试验结果表明:该芯片能够有效抑制蛋白质的非特异性吸附,并对目标物质抗体的响应符合Logistic方程;修饰基片的氨基葡聚糖的相对分子质量和氨基摩尔比都影响免疫芯片对抗体响应灵敏度;平行测定20次的信号标准偏差小于5%,测定后芯片性能没有明显下降。     

在热休克反应中大白鼠肝脏HSP70表达的免疫组织化学研究

用免疫组织化学方法研究了大白鼠肝脏在４６℃热休克３０ｍｉｎ后恢复期内ＨＳＰ７０的表达定位和动态变化及不同温度处理３０ｍｉｎ、恢复１２ｈｒ后ＨＳＰ７０ 表达。     

真菌异多糖与肿瘤的非特性免疫

随着现代医药科学技术的飞速发展,肿瘤防治的研究也日新月异,科学家们不但对癌细胞的生物学特性,以及致癌因素等有了深入的了解,而且在临床治疗的手段上也不断创新,其中肿瘤的免疫疗法,就是一个重要的方面。晚近以来国内外大量的研究结果表明,机体的免疫状态与肿瘤的发生和发展有着密切的关系,机体的免疫功能愈低下,发生肿瘤的机会愈多,且肿瘤生长愈快。反之,机体的免疫功能增强,出现肿瘤的机率就减小,且肿瘤生长较慢,甚至停止生长。因此,从免疫疗法去寻找新的抗肿瘤增强物质,是当前许多国内外学者最感兴趣的课题之一。其中从真菌多糖中筛选具有免     

兔圆小囊淋巴组织中11种脑肠肽类物质免疫组织化学定位观察

采用免疫组化方法,观察P物质、胰高血糖素、胃泌素、胰多肽、生长抑素、促甲状腺素、促肾上腺素皮质激素、降钙素、胰岛素、突触素、血管活性肠肽等11种脑肠肽类物质在兔圆小囊淋巴组织中的分布及定位。研究发现上述物质在兔圆小囊淋巴组织及粘膜内均有分布,但在淋巴组织中上述物质阳性细胞的数量及分布部位各不相同。其中降钙素、胰岛素2种物质,在粘膜下淋巴组织中分布很少,只可偶见阳性细胞;突触素阳性细胞稍多于上述2种物质;P物质、胃泌素、生长抑素、血管活性肠肽阳性细胞较多,尤其是在圆顶上部淋巴组织和淋巴滤泡中均大量散在分布;促肾上腺素、生长激素、促甲状腺素阳性细胞也比较多,主要分布在淋巴滤泡部位,圆顶上部淋巴组织虽然也存在阳性细胞,但数量明显少于淋巴滤泡部位;胰多肽主要分布在圆顶上部的淋巴组织中,淋巴滤泡处较少。     

c-fos在低氧适应高原鼢鼠(Myospalax baileyi)延髓中表达的免疫组织化学研究

本研究以高原鼢鼠为材料,运用组织学和免疫组织化学研究方法,对营地下生活的高原鼢鼠经过低氧处理后延髓中Fos蛋白的表达情况进行研究.结果表明,经过低氧适应后,高原鼢鼠延髓中Fos蛋白表达的量随低氧浓度的降低而升高,较常氧组,低氧浓度14.1%7天组、低氧浓度10.5%7天组、低氧浓度6.5%1天组Fos蛋白的表达量分别升高了3.67倍、7.76倍和33.38倍.同时在一定的低氧浓度中,Fos蛋白的表达量随低氧时程的延长而降低.高原鼢鼠在低氧浓度14.1%以下,7天低氧适应延髓中Fos蛋白表达量低于4天适应的表达量(P>0.05);同时在低氧浓度10.5%下,7天低氧适应延髓中Fos蛋白表达量极显著低于4天适应的表达量(P<0.01).由此可见,高原鼢鼠能够适应低氧环境,在低氧刺激下,神经系统反应敏感,能够主导机体各系统的低氧反应.