水稻马协细胞质雄性不育及其保持系线粒体体外热分析

以新选育出的水稻细胞质雄性不育系马协Ａ及其相应保持系协青早为材料,分别从它们黄化苗中提取线粒体。一方面于体外测定线粒体能量代谢谱,进行热化学分析,得到一系列热力学参数和动力学参数,建立起反映线粒体体外能量代谢模式的热动力学方程,通过对不育系和保持系的比较发现,不育系线粒体在能量释放大小,代谢时间,能量代谢阶段的复杂性上明显低于保持系,从而得出不育系线粒本能量代谢水平低,造成供能匮乏从而导致不育;同     

红莲型水稻不育系与保持系线粒体DNA酶切分析

为研究红莲型水稻细胞质雄性不育的分子基础，我们提取纯化了红莲型水稻丛广４１Ａ和丛广４１Ｂ的线粒体ＤＮＡ，采用限制性内切酶酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法比较了红莲型不育系和保持系线粒体ＤＮＡ酶切图谱，发现两者之间存在一定的差异，部分支持了细胞质雄性不育与线粒体ＤＮＡ有关的结论。     

中国水稻农家品种马尾粘败育株细胞质雄性不育系（马…

１９８４年在中国水稻农家品种马尾粘中发现花粉败育型雄性不育株，用协青早选杂和连续回效选育成马协型雄性不育系，对马协不育系的特征特性，开花习性，花粉败育的细胞学特征，细胞质质量，线粒体ＤＮＡ和线粒体ＣＯＤ同工酶等进行比较研究，结果表明，马协雄性不育系是一种新的细胞质雄性不育系，具有重要的理论意义和实践价值，利用马协不育系与明恢６３配组马协６３杂交稻组合具有优质，高产，多抗特点，通过了湖北省和僵杂交稻     

水稻马协细胞质雄性不育系及其保持系线粒体体外热分析

以新选育出的水稻细胞质雄性不育系马协Ａ及其相应保持系协青早（简称马协Ｂ）为材料,分别从它们黄化苗中提取线粒体．一方面于体外测定线粒体能量代谢谱,进行热化学分析,得到一系列热力学参数和动力学参数,建立起反映线粒体体外能量代谢模式的热动力学方程．通过对不育系和保持系的比较发现,不育系线粒体在能量释放大小、代谢时间、能量代谢阶段的复杂性上明显低于保持系,从而得出不育系线粒体能量代谢水平低,造成供能匮乏从而导致不育;同时进行线粒体ＤＳＣ（差示扫描量热法）分析,发现不育系能量代谢的释活能（Ｅ）、释活指数（ｎ）明显比相应保持系高,从而可得出,不育系能量代谢水平低,形成原因可能是不育系线粒体中参与能量代谢的酶系统活性较低．     

植物细胞质雄性不育分子机理研究

本文综述了植物细胞质雄性不育分子机理的研究进展。主要介绍了植物线粒体DNA、线粒体RNA和线粒体蛋白质与细胞质雄性不育的关系,同时对植物叶绿体及核质互作与细胞质雄性不育的关系进行了综述,并对今后的研究前景进行了展望。     

普通小麦T型CMS保持系mtDNA基因文库的构建

研究证明，小麦细胞质雄性不育（CytoplasmicMaleSterile，CMS）与mtDNA有密切的关系．因此，构建保持系线粒体DNA的基因文库应该有助于发现“育性”基因，进一步研究细胞质雄性不育的不育机理及创建工程恢复系，推进小麦杂种优势利用的进程．本文以普通小麦（T．aestivum）T型CMS细胞质雄性不育系75－3369A及其保持系75－3369B为材料，构建了保持系线粒体DNA基因文库，并应用保持系线粒体基因文库的部分重组子转化相应不育系，探讨保持系线粒体DNA与育性恢复的关系．线粒体DNA提取于75－3369B的黄化苗，经测定纯度适合于构建基…     

普通小麦T型细胞质雄性不育系及其保持系线粒体多肽的电泳比较研究

应用单向SDS—PAGE和双向IEF—SDS电泳技术对两个品种的普通小麦(T.aestivum L.)T型细胞质雄性不育系及其保持系的线粒体多肽进行了比较研究,结论如下: 1、黄化苗期普通小麦线粒体多肽单向SDS—PAGE呈现40—50条多肽带纹,双向IEF—SDS电泳图谱上则可看到150—180个多肽斑点。不育系和保持系线粒体多肽在单向SDS—PAGE和双向IEF—SDS电泳行为上无明显差别。 2、孕穗期幼穗的线粒体多肽单向SDS—PAGE图谱上,两个不育系都缺少28KD带纹,因而不育系和保持系间表现出明显的差异。双向IEF—SDS凝胶电泳证实28KD带纹实际上是分子量相同而等电点分别为5.58和5.65的两个多肽。 3、线粒体基因的表达是具有时空性质的。 4、线粒体与T型细胞质雄性不育可能存在着某种特定的关系。本文还就T型细胞质雄性不育的分子机制进行了探索性讨论。     

国外水稻育种概况

一、杂种优势利用问题关于水稻细胞质雄性不育的杂种优势利用问题,一些国家正从籼与粳、栽培稻与野生稻间杂交等方面,寻找雄性不育系,研究三系配套。据报道,现有五个导致雄性不育的细胞质为新城,渡边,埃里克森等人所发现,日本有三个细胞质雄性不育系。渡边在研究病毒时找到不育株,经与“藤坂5号”回交10代育成不育系,但保持系尚未找到。硫球大学新城把籼稻“钦苏拉春稻Ⅱ”(Chinsurah Boro ⅠⅠ)导致雄性不育的细胞质转移到粳稻品种“台     

普通小麦热激处理后育性变化和A、T型CMS品系不育机理的初探

用普通小麦的不育系和保持系为材料,经高温处理以后,提取其线粒体多肽和可溶性蛋白做SDS-PAGE分析,发现不育系与保持系在热激后其线粒体多肽的电泳图谱均有相互趋同的现象.育性不稳定的A型繁91小麦雄性不育系在热激后有明显的可育度提高现象.育性稳定的T型细胞质雄性不育(Cytoplasmic MaleSterility,CMS)品系及其保持系经短时间热激后没有明显育性变化.由未经热激处理的对照电泳分析可见,A型不育系、T型CMS品系花粉发育到单核期向双核期转变时,其线粒体多肽较其相应保持系明显减少,表明到此时期不育系细胞的线粒体结构与功能已明显丧失.     

普通小麦热激处理后育性变化和A、T型CMS品系不育机理的初探

用普通小麦的不育系和保持系为材料,经高温处理以后,提取其线粒体多肽和可溶性蛋白做SDS-PAGE分析,发现不育系与保持系在热激后其线粒体多肽的电泳图谱均有相互趋同的现象.育性不稳定的A型繁91小麦雄性不育系在热激后有明显的可育度提高现象.育性稳定的T型细胞质雄性不育(CytoplasmicMaleSterility,CMS)品系及其保持系经短时间热激后没有明显育性变化.由未经热激处理的对照电泳分析可见,A型不育系、T型CMS品系花粉发育到单核期向双核期转变时,其线粒体多肽较其相应保持系明显减少,表明到此时期不育系细胞的线粒体结构与功能已明显丧失.     

油菜细胞质雄性不育相关基因的筛选

甘蓝型油菜波利马(Brassica napus pol.)细胞质雄性不育系是一种很有实用价值的油菜不育类型.目前关于其分子机制的研究已证实,线粒体ATP合成酶的一个亚基ATP6与其雄性不育相关.本实验以ATP6作为诱饵蛋白,应用酵母双杂交共转化的方法筛选与ATP6相互作用的蛋白质.在获得的阳性克隆中,发现了一个与tAPX基因及其表达的蛋白都具有较高同源性.它是活性氧清除的重要酶类,很可能与细胞质雄性不育间建立起了某种联系.     

水稻线粒体atp6基因的克隆及其结构分析

以玉米线粒体ａｔｐ６基因为探针所作的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂文结果显示，水稻野败型细胞质雄性不育系与其保持系（珍汕９７Ａ，Ｂ）的ａｔｐ６基因存在结构上的差异。不育系只有一个ａｔｐ６基因拷贝，而相应的保持系却有两个拷贝．从保持系线粒体ＤＮＡ的Ｌａｍｄａ ＥＭＢＬ３基因文库中筛选出了以上两个ａｔｐ６基因克隆，并根据制作的物理图谱将它们分别定位在２．７５ｋｂ的ＰｓｔＩ／ＰｖｕⅡ和１．６３ｋｂ的Ｓａｌ／ＥｃｏＲ     

小粒野生稻型细胞质雄性不育系的创建及其恢保关系鉴定

小野1A是由小粒野生稻(Oryza minuta Presl.)中天然不育株与Y58S/内香B杂种后代优秀单株经多代回交转育而成。由于该雄性不育细胞质来自小粒野生稻,称为XY型雄性不育细胞质。恢保关系鉴定结果表明,XY型细胞质雄性不育系与野败型(WA)、印尼水田谷型(ID)、K型和红莲型(HL)细胞质雄性不育系的恢保关系不同,WA型、ID型、K型和HL型的保持系和恢复系中部分可以作为XY型雄性不育细胞质的保持系,部分可以作为XY型雄性不育细胞质的恢复系。XY型雄性不育细胞质突破了WA型、ID型、K型和HL型等雄性不育细胞质的恢保关系,扩大了保持系育种范围,可以用品质优良的栽培品种培育出高标准优质米不育系。由此可见,XY型雄性不育细胞质的发掘,不仅丰富了杂交稻细胞质遗传多样性,而且为培育高标准优质米不育系、进而实质性提高杂交稻稻米品质开辟了一条崭新的育种途径。     

利用酵母双杂交系统筛选油菜ATP6的相互作用因子

甘蓝型油菜波利马(Brassica napus pol.)细胞质雄性不育系是一种很有实用价值的油菜不育类型.目前关于其分子机制的研究已证实,线粒体ATP合成酶的一个亚基ATP6与其雄性不育相关.本实验以ATP6作为诱饵蛋白,应用酵母双杂交共转化的方法筛选与ATP6相互作用的蛋白质.在获得的阳性克隆中,发现了一个与拟南芥中未知基因AT3G47550所编码的蛋白质具有较高同源性的蛋白质.它含有RING HC的结构,可能在泛素-蛋白质降解途径与细胞质雄性不育间建立起了某种联系.     

红莲型水稻二核期花粉蛋白质组学分析

对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系、保持系和杂种F1二核期花粉总蛋白质采用固相pH梯度等电聚焦/SDS-PAGE进行了双向电泳分离,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱．对其中15差异点进行了肽质指纹图分析或者LC-MS/MS分析．对已鉴定的蛋白质点进行亚细胞定位和功能分析,发现不育系相对于可育系有部分参与蛋白质缺失或表达量降低,可能与线粒体提供能量不足而导致的花粉不能正常发育有关．     

K型和冈型水稻线粒体DNA的AFLP分析

用264个随机引物(E11,M24)对K型和冈型水稻(Oryza sativa L.)的不育系、保持系和F1代线粒体DNA进行AFLP分析,共筛选到了37对扩增效果较好的引物,显示出9条可能与K型水稻雄性不育相关的差异带,3条可能与冈型水稻雄性不育相关的差异带.其中引物组合E10M8(EcoR Ⅰ-ATA×Mse Ⅰ-AGC)扩增后,K型和冈型水稻不育系、F1代几乎在750 bp左右的位置都同时表现出了差异条带而在保持系相应位置表现为缺失,它与"缺陷型不育"假设一致.由此证明了K型和冈型水稻不育系线粒体DNA的特异性及其与雄性不育的相关性,为回收克隆等后续工作奠定了基础.     

水稻雄性不育的分子机理

从细胞质雄性不育和细胞核雄性不育2个方面概述水稻雄性不育相关基因及导致不育的分子机理.     

水稻细胞质雄性不育性和杂种选育(摘要)

在自花授粉的作物中,育成生产上用的杂种有一些固定存在的困难。细胞质雄性不育性以及育性恢复基因在水稻中是存在的,但是在异交中雄性不育株不能产生令人满意的结实。小穗不育性受环境影响很大,但有些不育系比其他一些较稳定。已经发现半矮水稻品种,台中本地一号是不育细胞质和育性恢复基因的一个来源。另一品种,Pankhari 203可起保持系的作用。由Pankhari×台中本地一号组合和两次回交Pankhari获得了完全的雄性不育后代,提供了有关杂种优势的研究的文献。在稻属中,发现了花的形态的一些变异的跡象和异交可能性。     

α-微管蛋白与玉米细胞质雄性不育的相关性研究

采用两个核背景（Mo17,77)的同核异质、同质异核细胞质雄性不育系及正常品系为材料，以合成的α-微管蛋白基因片段为探针，对玉米细胞质雄性不系转育前后的mRNA进行Northern杂交分析，首次直接从转录水平上了玉米细胞质雄性不育系在败育前后α－微管蛋白基因转录量的差异。结果表明，玉米细胞质雄性不育系α－微管蛋白基因在败育前后的转录量存在着明显的差异，败育前的相对转录量大于败育后的相对转录量，证明了α－微管蛋白基因在花粉发育中起着重要作用，与玉米细胞质雄性不育性密切相关。     

采用氨基柱的HPLC分离水稻线粒体膜磷脂组分

比较了L iChrosorb C18(250×4.6 mm,5μm)和C apce ll Pak-SG NH2(250×4.6 mm,5μm)氨基柱分析红莲型细胞质雄性不育水稻(HL-CM S)线粒体膜磷脂组成的方法.结果表明:用C apce ll Pak-SG NH2氨基柱,流动相用乙腈-甲醇-85%磷酸(体积比100∶10∶1),二极管阵列(DAD)检测器,检测波长205 nm,在15 m in内使膜磷脂的4种主要成分达到基线分离.在此色谱条件下,样品测试精密度较高,重现性好.用面积归一化法对HL-CM S水稻不育系粤泰A(YTA)和保持系粤泰B(YTB)的线粒体膜磷脂组成成分含量进行了定量分析,结果表明两者膜磷脂组分相似,但其含量配比存在差异.