普通油茶染色体制片技术优化及核型分析

【目的】染色体是种内品种变异的遗传物质基础,明确普通油茶主栽品种染色体倍性及核型特征,可为育种和栽培中品种配置提供依据。【方法】以普通油茶3个主栽品种(‘华硕’、‘华鑫’、‘华金’)的扦插苗和实生苗根尖为试材,对油茶染色体制片技术实验进行优化,对3个品种进行核型分析。【结果】①改良的去壁低渗火焰干燥法更适合普通油茶染色体制片,根尖以0.002 mol/L 8-羟基喹啉预处理5~6 h,1.75%纤维素酶和1.75%果胶酶酶解120 min,蒸馏水后低渗30 min,制片效果最佳。②3个品种扦插苗染色体数目均为2n=6x=90,为六倍体,而3个品种的实生苗染色体数目为90、87、85和75等。③对扦插苗根尖细胞中期分裂相进行核型分析可知,‘华硕’、‘华鑫’核型都为2A,‘华金’核型为2B,核型公式分别为2n=90=63m(3SAT)+27sm(‘华硕’)、2n=90=58m(SAT)+32sm(‘华鑫’)、2n=90=64m+26sm(SAT)(‘华金’),核型不对称系数分别是61.73%(‘华硕’)、61.13%(‘华鑫’)、61.44%(‘华金’)。【结论】优化的去壁低渗火焰干燥法更适合于普通油茶染色体制片,‘华硕’、‘华鑫’、‘华金’均为六倍体,而其实生后代会发生倍性分离。本研究为进一步开展普通油茶的倍性与核型研究奠定了基础。     

非洲菊常见品种的染色体核型与倍性分析

采用常规根尖压片技术对非洲菊3个常见品种的染色体进行核型分析,并用流式细胞仪检测其倍性.结果表明:供试的3个非洲菊品种均为二倍体.深圳5号核型公式为2n=2x=50=2M+34m+16sm,染色体相对长度系数组成为2n=6L+12M2+24M1+8S,按照Stebbins标准核型分类属于2C核型,不对称系数AS.K% =60.09%.香槟核型公式为2n=2x=50+B=36m+12sm+2st+B,染色体相对长度系数组成为2n=8L+10M2+16M1+16S,属于2C核型,不对称系数AS.K% =62.17% .大头粉核型公式为2n=2x=50+B=34m+12sm+4st+B,染色体相对长度系数组成为2n=8L+8M2+28M1+6S,属于2B核型,不对称系数AS.K% =62.21%.综上所述,3个非洲菊品种的染色体长度、着丝点位置、B染色体的有无均不同,核型呈现多态性.     

麝香百合及东方百合品种核型分析

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离后采用涂片法制片,对4种观赏百合进行核型分析。结果表明,‘白狐狸’核型为3A,‘雷山’、‘水晶布兰卡’和‘康斯坦撒’的核型均为3B。核型公式分别为:‘白狐狸’2n=2x=24=4m+4st(2SAT)+16t,‘雷山’2n=2x=24=2m+2sm+10st(2SAT)+10t,‘水晶布兰卡’2n=2x=24=4m+10st+10t,‘康斯坦撒’2n=2x=24=4m(1SAT)+10st+10t。‘白狐狸’、‘雷山’、‘水晶布兰卡’及‘康斯坦撒’的核不对称系数分别为83.11%、82.78%、79.75%、81.22%。     

两个油菜种的染色体核型分析

应用改进的染色体制片方法研究了甘蓝型油菜和芥菜型油菜的核型,结果表明：甘蓝型油菜和芥菜型油菜的各品种在染色体数目和核型对称性方面都是稳定不变的,甘蓝型油菜“中双4号”的核型公式为2n=4x=38=2M 22m 14sm,芥菜型油菜“望江凉亭”的核型公式为2n=4x=36=24m 8sm(2SAT) 4st,它们的核型均为2B型,讨论了两个油菜种各栽培品种之间的核型差异,指出同一类型染色体在不同品种核型组成中的数量不同,随体存在与否及数目亦不相同。     

利用Giemsa C-带和45S rDNA FISH的方法鉴定百合杂种

利用Giemsa C-带和染色体荧光原位杂交(45S rDNA FISH)的方法对‘Royal Lace’בHigh Class’的杂种后代分别进行了鉴定。结果表明：‘Royal Lace’的染色体数2n=3x=36,‘High Class’的染色体数2n=2x=24。杂种后代的染色体数出现2n=3x=36和2n=4x=48两种类型。经Giemsa C-带和45S rDNA FISH方法对两个亲本和具2n=4x=48的杂种后代分析结果表明,杂种后代的根尖染色体C-带可观察到来自双亲的可以特异追踪的染色体带纹。FISH分析表明,杂种后代中分别有两条来自‘Royal Lace’和‘High Class’的染色体。两个亲本的荧光原位杂交点数分别为10和9。杂种后代染色体为2n=36的个体有14个杂交信号,可以确定两条来自‘Royal Lace’,另外3条来自‘High Class’。杂种后代中2n=48的个体的杂交信号点为19,从而证实所获得的杂种后代的真实性。同时,对于2n=48,而杂交信号为19 的多倍体起源于未减数分裂的2n雄配子体的可能性进行了探讨。综合研究结果表明,Giemsa C-带和45S rDNA FISH方法可以准确地对百合的杂种真实性进行鉴定。     

6株越橘实生苗的染色体核型分析

以6株越橘实生苗为材料,去壁低渗火焰干燥法制片后观察记录染色体数,并进行染色体核型分析.实验结果表明:所有实验材料均属2B核型.其中1号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=34 m+12sm(2SAT)+2T;2号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=32 m(2SAT)+10sm(2SAT)+4st+2T;3号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=38 m(2SAT)+8sm+2T;4号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=30 m(4SAT)+12sm+6st;5号材料体细胞染色体数目为24,核型公式为2n=2x=24=20 m+4sm(2SAT);6号材料体细胞染色体数目为24,核型公式为2n=2x=24=16 m(2SAT)+6sm+2st.     

皖西天堂寨三种黄精属植物的核型研究

首次报道了皖西天堂寨三种黄精属(Polygonatum)植物的染色体数目和核型,结果如下:湖北黄精(P. zanlanscianense) 核型为20n=2x=28=10m 8sm 10st,染色体长度比值3.49,属于3B核型;多花黄精(P. cyrtonema)核型为 2n=2x=22=2m 18sm 4st, 染色体长度比值2.38,属于3B核型;玉竹(P. odoratum)核型为2n=2x=18=8m 10sm(3sc), 染色体长度比值2.84, 属于2B核型.分别与产自其它地区的同种植物的染色体数目和核型差异明显.     

六株越橘实生苗的染色体核型分析

以六株越橘实生苗为材料,去壁低渗火焰干燥法制片后观察记录染色体数,并进行染色体核型分析。实验结果表明：所有实验材料均属2B核型。其中1号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=34m+12sm(2SAT)+2T;2号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=32m(2SAT)+10sm(2SAT)+4st+2T;3号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=38m(2SAT)+8sm+2T;4号材料体细胞染色体数目为48,核型公式为2n=4x=48=30m(4SAT)+12sm+6st;5号材料体细胞染色体数目为24,核型公式为2n=2x=24=20m+4sm(2SAT);6号材料体细胞染色体数目为24,核型公式为2n=2x=24=16m(2SAT)+6sm+2st。     

秋英属植物核型分析

采用常规压片法,以秋英属2种植物为研究材料进行核型分析,旨在为波斯菊和硫华菊种质资源的开发利用和良种培育提供细胞学依据.结果表明:波斯菊的染色体数目为2n=2x=24和2n=4x=48,染色体数目出现异常,首次发现48条染色体.硫华菊染色体数目是2n=24. 2种植物在染色体类型中均含有m、sm和st类型.核型类型有1A、2A、3A、2B和3B型.最长与最短染色体比值为1.27~2.37,臂比大于2∶1 的染色体占染色体总数的0~58.33%.核型不对称系数为58.12%~67.69%,核型不对称程度较高,说明秋英属2种植物的进化程度较为进化,其中CC(纯粹Sensation Purity)最原始,KL(凯莱Sensation Gloria)最进化.秋英属不同品种的核型特征均有差异,说明不同品种之间具有染色体遗传多样性.     

罗汉果与三种苦瓜属植物的核型比较分析

以罗汉果、苦瓜、木鳖子、云南木鳖种子根尖为实验材料,采用去壁低渗法进行染色体制片和核型分 析,为罗汉果的分类归属及品种选育、倍性育种提供细胞遗传学资料. 结果表明:罗汉果染色体28条,为二倍体, 基数为14,核型公式为2n=2x=28=10m+6sm+6st+2t+4T,核型类型为3A型;苦瓜染色体22条,为二倍体,基数为 11,核型公式为2n=2x=22=2M+20m,核型类型为1A型;木鳖子染色体28条,基数为14,核型公式为2n=2x=28= 2m+22sm(2SAT)+4st,核型类型为3A型;云南木鳖染色体24条,基数为12,核型公式为2n=2x=24=22m+2sm,核 型类型为1A型染色体数目和核型类型表明罗汉果和木鳖子的亲缘关系比较近,在分类系统上比较进化;苦瓜和 云南木鳖亲缘关系比较近,在分类系统上比较原始.核不对称系数也表明木鳖子和罗汉果在分类系统上比较进 化,苦瓜和云南木鳖比较原始.