麻疯树花药愈伤组织诱导分化与生根培养

以麻疯树花粉处于单核中晚期的花药作为实验材料,探讨了麻疯树花药培养从愈伤组织诱导,愈伤组织分化芽,壮苗,生根的整个过程.其中愈伤组织诱导的最好培养基为N6+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+10%蔗糖,避光培养;在愈伤组织分化芽的过程中,TDZ起到了非常明显的效果,最佳的培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白1g/L+3%蔗糖;最合适的壮苗培养基为MS+GA3 1.0mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+3%蔗糖;生根效果     

植物激素对新疆雪莲愈伤组织诱导和分化的影响

研究了不同植物激素对新疆雪莲叶片愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:植物激素对新疆雪莲愈伤组织的诱导和分化影响显著,以MS为基本培养基附加浓度1.OO mg·L~(-1)的6-BA和2.OO mg·L~(-1)的NAA组合为最佳诱导培养基,诱导率达100%;以MS为基本培养基附加浓度1.00 mg·L~(-1)的6-BA和O.20 mg·L~(-1)的NAA组合为最值出芽培养基,出芽率达78%;以1/2MS为基本培养基附加浓度O.30 mg·L~(-1)的NAA和浓度O.03 mg·L~(-1)的KT为最佳生根培养基,生根率达54%.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

萍蓬草的组织培养及快速繁殖的研究

以萍蓬草的嫩根茎为外植体,在附加不同浓度的BA、IAA、NAA和2,4-D的MS、1/2MS或1/3MS培养基上进行了愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、不定芽的生根、试管苗的移栽和移植研究,成功的建立起萍蓬草嫩根茎无性系,达到了快速繁殖的目的。结果表明：MS＋BA0.4-0.8mg·L^-1＋2,4-D1.2mg·L^-1是诱导嫩根茎形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;1/2MS＋AgN031.2mg·L^-1＋BA0.3mg·L^-1＋NAA0.1mg·L^-1是诱导颗粒状愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1/3MS＋IAA0.5mg·L^-1的液体培养基是试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基;试管苗移栽平均成活率为99.4%。     

铁线莲‘Multi Blue’体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种‘Multi Blue’的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择。结果表明：茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0 mg/L)+NAA(0.5 mg/L)+2 %蔗糖+0.7 %琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L)+ABA(0.3 mg/L)+CH(0.5 g/L)为佳,诱导率可达96 %;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2 mg/L)+IBA(0.05 mg/L)。体胚再生植株经驯化后,移 栽成活率可达80 %以上。     

番茄花药培养愈伤组织诱导及不定芽形成的研究

为了建立番茄花药愈伤组织诱导及分化的实验体系,通过花药离体培养并设计不同的试验处理,以6个番茄品种的花药为试材,研究了植物生长调节剂、蔗糖浓度、硝酸银浓度、基因型和培养基对番茄花药培养愈伤组织诱导率及不定芽形成的影响.结果表明:培养基中添加1.0mg/L的2,4-D和0.5mg/L的KT,里格尔87-5和石番9号愈伤组织诱导率都达最高;培养基中加入30g/L的蔗糖,里格尔87-5的愈伤组织诱导率达20.24%;培养基中加入10μmol/L的硝酸银,花药组织褐化率较对照降低了70.59%,当浓度超过50μmol/L,褐化率增高,出愈率略有降低;不同基因型愈伤组织发生率明显不同,相同培养条件下,里格尔87-5的诱导率高达21.43%,而粉B二号的诱导率仅有0.46%;培养基中加入175g/L的马铃薯汁、0.1%的活性炭,6个材料的愈伤组织平均诱导率较对照分别降低了35.14%、95.48%.番茄花药愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L+ZT 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上可再分化成不定芽,不定芽诱导率达15.15%.     

榉树嫩叶愈伤组织初诱导培养技术研究

对榉树开展愈伤组织诱导培养技术研究,目的为榉树快繁育苗奠定技术基础。经过比较筛选试验,结果表明:每年3月上旬—4月上旬榉树嫩叶接种效果较好;嫩叶先用0.1%高锰酸钾水溶液浸泡30 min,蒸馏水冲洗3遍,0.1%升汞消毒10min,污染率在5%以下;最佳基本培养基:1/2MS+琼脂12g·L~(-1)+蔗糖25 g·L~(-1)+AC1 g·L~(-1)+PVP1 g·L~(-1),pH值6.5~7.0;采用TDZ1.5mg·L~(-1)+NAA0.025 mg·L~(-1)或TDZ3.0 mg·L~(-1)+NAA0.01 mg·L~(-1)的激素配比,均能培养出绿色、疏松的愈伤组织,诱导率90%以上。     

茎瘤芥(榨菜)子叶及带下胚轴茎段离体培养研究

以茎瘤芥永安小叶品种无菌苗子叶和带下胚轴茎段为材料,初步探索愈伤组织诱导、分化及再生植株生根培养.结果表明,子叶与叶柄的切口处极易产生愈伤组织,在MS+1.0mg·L-16-BA+0.2mg·L~(-1)NAA培养基中,愈伤组织分化率达到64%,其不定芽量最大;1/2MS+0.6mg·L~(-1)IBA培养基对不定根形成最为有利,生根率可达到96%.     

苦皮藤种子愈伤组织诱导试验研究

以苦皮藤种子为外植体,以MS为基础培养基,添加不同水平生长素与细胞分裂素,采用直接接种、0.2 mg·L~(-1)GA_3浸种、切种处理的接种方法,开展苦皮藤种子愈伤组织诱导实验研究.结果表明:(1)直接利用种子接种和利用0.2 mg·L~(-1)GA_3浸种处理后接种,都不能诱导出愈伤组织,甚至种子根本也不能萌发;(2)切种处理的种子,使用0.2 mg·L~(-1)GA_3浸种可以有效促进种子萌发;(3)MS+1.0 mg·L~(-1)NAA和MS+1.0 mg·L~(-1)NAA+1.0 mg·L~(-1)6-BA是诱导愈伤组织的最佳培养基;MS+0.2～1.0 mg·L~(-1)NAA+1.0～0.2 mg·L~(-1)KT培养基只能诱导种子萌发,而不能诱导愈伤组织生成;MS+0.5～2.0 mg·L~(-1)2,4-D培养基不能诱导种子萌发,也不能诱导出愈伤组织.     

BA和激素对‘Bonny Best’试管番茄愈伤组织形态发生的影响

用’Bonny Best’番茄品种的子叶和下胚轴作为外植体,在MS附加不同水平和比率的BA和2,4—D(或NAA)或IAA的培养基中,愈伤组织形态发生的情况是不同的。MS+BA4.44μM+2,4-D10μM(子叶),MS+BA0.44-4.44μM+2,4-D1—5μM(下胚轴)使外值体产生淡黄色疏松的愈伤组织,而且生长迅速。若2,4-D浓度低于5μM(子叶)或高于5μM(下胚轴)时,外植体形成白色紧密的愈伤组织,而且生长缓慢,固定2,4-D的浓度,BA浓度由高到低,所形成的愈伤组织的结构由紧密向疏松变化。愈伤组织的液体培养中也出现了类似现象。把愈伤组织转移到生茎培养基中,白色紧密的愈伤组织形成茎较为容易,培养21天后,茎的分化即开始。而疏松的愈伤组织的形态发生则经过了黄色疏松、深褐色胶状到白色紧密的变化。茎的分化出现较晚。愈伤组织培养时生长调节剂的水平对茎的分化有着直接的影响。较高水平的BA(22.2—44.4μM)+NAA10-40μM有利于茎的分化。把子叶和下胚轴切段培养在MS+BA22.2-44.4μM+IAA1-5μM的生茎培养基上,24—60天后,70％以上的外植体正常分化并伸长成茎,生枝率每个切段为3—4个。转移到MS培养基上,形成正常的带根幼苗。把下胚轴切段直接培养在没有激素的MS培养基上,三周后,45.8％的下胚轴形成正常幼苗,出枝率为1.0。把这些幼苗移栽到温室     

美国红枫‘白兰地’的组织培养与快繁技术

以美国红枫‘白兰地’(Acer rubrum‘Brandywine’)的带腋芽的茎段为外植体,进行了组织培养与快繁技术研究,结果表明:1)外植体的最佳取材时段为3-5月,最佳消毒方案是用3%的NaClO处理8min,污染率仅为2.22%,存活率达91.11%.2)启动培养中,3因素对其影响的主次顺序依次为培养基,IBA,6-BA.在WPM,MS,1/2MS,DKW 4种培养基中,WPM对外植体启动培养影响显著高于其他3种,最佳培养基配方为WPM+IBA 0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L.3)增殖培养的最佳培养基配方为WPM+0.002mg/L TDZ+0.4mg/L NAA,增殖系数为1.37.4)壮苗培养的最佳培养基配方为WPM+0.5mg/L NAA+1.0mg/L GA3,苗的长势最好,茎粗且伸长明显,叶大且绿.5)根诱导培养中,4因素对其影响的主次顺序依次为6-BA,GA3,培养基,IBA,最佳培养基配方为MS+2.0mg/L IBA+1.0mg/L GA3,生根率高达93.3%.6)组培苗的炼苗移栽以先闭盖锻炼6d,后开盖锻炼2d,再移栽到沙与腐殖质等比混合的基质中,存活率最高,达86.7%.     

山梗菜嫩茎无性系的建立

以山梗菜的嫩茎为试验材料,先后对其愈伤组织培养、愈伤组织分化、分化芽生根和试管苗的栽培进行了研究．结果证明：MS＋ KT0．2mg·L -1＋2,4-D1．4mg·L -1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;1/2MS＋ NAA0．1 mg · L -1＋ZT0．1 mg · L -1＋AgNO30．3 mg · L -1是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2MS＋NAA0．1 mg · L -1＋IAA0．2 mg · L -1＋ABT2号1．0 mg · L -1是试管苗生根继代增殖培养和不定芽生根培养的适宜培养基．试管苗移栽成活率为94．2％;定植成活率达到了99％以上．定植的试管苗不仅具有野生山梗菜所有植物学性状,而且还能在翌年正常开花结果．     

益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究

以益母草根颈为材料,进行了愈伤组织诱导、增殖与分化,分化芽生根,试管苗移栽、定植的研究.结果表明：MS＋6-BA 0.5mg·L-1＋NAA 0.6mg·L-1＋2,4-D1.2mg·L-1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋2,4-D 1.5mg·L-1是愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.2mg·L-1＋NAA 0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养和分化芽继代分化增殖培养的理想培养基;N6＋IAA0.2mg·L-1培养基是益母草分化芽生根培养的理想培养基.移栽成活率为94.4%;定植成活率为99.1%;定植成活的试管苗保持野生益母草的所有植物学性状.     

美洲商陆高频再生体系的建立

美洲商陆为商陆科多年生草本植物,在工业、农业和医药上具有很高的应用价值.本实验拟从外植体选择、激素组合、GA3和AgNO3等物质应用角度进行试验,分析各条件对愈伤组织诱导,不定芽分化、伸长以及不定根诱导等方面的影响,旨在构建美洲商陆稳定高效的再生体系.实验结果表明:愈伤组织诱导和不定芽分化的最适外植体为茎节;将无菌苗的上部经诱导培养基转接、壮苗后,再取茎节进行愈伤组织诱导和不定芽分化,可以显著提早不定芽分化、提高芽增殖系数;不定芽诱导分化最佳培养基为MS+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+TDZ(0.02 mg/L),增殖系数达12.7;不定芽伸长的最佳培养基为MS+TDZ(0.02 mg/L)+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+GA3(2.0 mg/L);生根最佳培养基为1/2MS+NAA(0.4 mg/L),生根率可达91.7%以上.AgNO3处理抑制了美洲商陆不定芽的分化.     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

加工番茄的花药培养技术

为确定适宜于加工番茄花药愈伤组织诱导的最佳取材时期和激素组合,以2个加工番茄品种的花药为材料,以醋酸洋红液为染液,压碎法制片,用体视显微镜观察小孢子的发育时期;以MSB培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物激素2,4-D、NAA、KT、6-BA、ZT、TDZ进行花药培养,研究不同植物激素组合对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:番茄花蕾纵径为5.25-6.19 mm,横径为2.09-3.20 mm,绝大多数的小孢子发育时期处于单核靠边期;不同基因型加工番茄愈伤组织的诱导率不同,品种CK8的诱导率为18.63%,品种CK3的诱导率为14.19%;0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L TDZ是最适宜愈伤组织诱导的激素组合,诱导率为56.52%,其次是0.1 mg/L2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的组合,诱导率为56.36%;番茄花药愈伤组织在MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/LKT培养基上可形成胚性愈伤组织;4℃低温预处理花蕾的适宜时间为2-5 d。     

垂盆草组织培养及无性系建立的研究

本研究以垂盆草的嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根、试管苗生根继代培养进行了研究,建立起垂盆草的无性系。结果证明：MS＋BA0.2mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋GA30.5mg·L-1是诱导嫩茎形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;1/2MS＋BA0.6mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋GA30.5mg·L-1是诱导愈伤组织分化和不定芽分化的理想培养基;1/2MSmg·L-1＋I-AA0.3mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1是试管苗生根培养的理想培养基;河沙是试管苗移栽的理想基质。移植的试管苗具有长势旺盛整齐、根系增加1倍左右、耐干旱等特点。     

全缘贯众的组织培养及无性系建立

以蕨类植物全缘贯众根茎、叶片和叶柄为外植体诱导愈伤组织,选取诱导率最高的根茎愈伤组织为材料诱导分化形成幼叶,继续培养成生根试管苗,建立起全缘贯众的无性系.结果表明,1/2 MS NH4H2PO4(100 mg·L-1) BA(0.5 mg·L-1) 2,4-D(1.2 mg·L-1) NAA(1.2 mg·L-1)是诱导根茎愈伤组织的最佳培养基;愈伤组织分化形成幼叶的最佳培养基是1/2 MS BA(0.2 mg·L-1) NAA(0.1 mg·L-1);试管苗生根培养的最佳培养基是1/3 MS IAA(0.6 mg·L-1);移栽后根茎上的须根比对照野生苗增加1.5～2.5倍.