牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶经氯仿－乙醇混合液处理，丙酮沉淀，凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤提取和纯化．纯化酶在聚丙烯酰胺凝胶电脉（ＰＡＧＥ）图谱上的两条蛋白染色带和活性染色带相互对应，在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．此酶分子量为３４０００，亚基分予量为１７０００，在紫外区最大吸收值为２５８ｎｍ．该酶对ＫＣＮ和Ｈ２Ｏ２均敏感，在０～７５℃温度范围内对热稳定．纯化酶的比活性为７４６３Ｕ／ｍｇ，纯化１００９倍，酶的回收率为７９％．     

牛血清白蛋白对牛红细胞SOD的化学修饰

应用戊二醛交联法研究了牛血甭白蛋白对牛红细胞ＳＯＤ的化学修饰，修饰酶活力回收率为５１．２％，氨基修饰率为３３．１％，ＳＯＤ经牛血清白蛋白修饰后提高了耐热、耐酸碱稳定性，并保持良好贮藏稳定性。     

用铜盐法纯化牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶（Ｃｕ·Ｚｎ－ＳＯＤ），经溶血，ＣｕＣｌ２处理及离子交换柱层析等步骤被纯化到高度均一程度．纯化酶在聚丙烯酰胺梯度凝胶图谱上的活性染色带与蛋白染色带相对应，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱上呈现单一区带．元素分析表明该酶含有２个锌原子和多于２个的铜原子．分子量和亚基分子量分别为３３５００和１７８００．在紫外区酶有４个明显吸收峰，分别为２７４．６ｎｍ，２６６．２ｎｍ，２５８．８ｎｍ和２４５．４ｎｍ．该酶对热稳定，纯化后酶比活性为１４５２５ｕ／ｍｇ，活力回收率为４５％．本文对经ＣｕＣｌ２处理与氯仿－乙醇处理纯化的牛血Ｃｕ·Ｚｎ－ＳＯＤ进行比较，结果表明，氯仿－乙醇对酶的某些性质有影响     

牛红细胞铜锌超氧化物歧化酶的循环伏安法研究

应用悬汞电极和金属铂电极测试了牛红细胞Ｃｕ２Ｚｎ２ＳＯＤ分别在ＰＨ７．０的０．０５ｍｏｌ／Ｌ硫酸钠溶液２及ＰＨ７．２６的０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中的氧化还原电位，发现－０．０１６Ｖ处有一还原峰，＋０．７０５Ｖ处有一氧化峰，并对其进行讨论。     

饭豆铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

饭豆种子粗提液中有６条Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ活性谱带，经氯仿－乙醇混合液处理，硫酸铵盐析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析被分离，获得了两组ＳＯＤ同工酶组分（ＳＯＤ—１，ＳＯＤ—２）．它们在酶分子结构上可能存在一定差异．ＳＯＤ－１含与粗提液相对的、电泳迁移率较小的活性谱带，它在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）图谱上的活性染色带和蛋白染色带相互对在；在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳图谱上均呈现单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．该酶分子量为３１３００，亚基分子量为１６５００，等电点为４．２，在紫外区的吸收值为２６４．０ｎｍ．该必在０—７５℃范围内稳定．纯化的ＳＯＤ—１比活性为１７８９Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ—２比活性为２８４Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ活力回收率为３２％．     

水稻幼苗超氧物歧化酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳对水稻幼苗ＳＯＤ同工酶进行了研究。结果表明，４个品种的水稻幼苗的均含有６种ＳＯＤ同工酶，其中５种为Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ，一种为Ｍｎ－ＳＯＤ，未发现Ｆｅ－ＳＯＤ．Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ活性占ＳＯＤ总活性的９０％左右，Ｍｎ－ＳＯＤ占１０％左右，品种间同酶类型，酶活性无明显差异。     

枸杞果实铜,锌超氧物歧化酶的纯化及其性质的研究

枸杞果实粗提液中具有Mn-SOD、Fe-SOD和Cu·Zn-SOD三种类型。经氯仿-乙醇处理、丙酮分级沉淀、sepbadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素柱层析纯化,获得对CN~-敏感的Cu·Zn-SOD。在凝胶电泳染色图谱上,DEAE-纤维素柱层析纯化,获得对CN~-敏感的Cu·Zn-SOD。在凝胶电泳染色图谱上,DEAE-纤堆素柱线性梯度洗脱下来的两个活性组分与酶粗提液同工酶谱上两条Cu·Zn-SOD主区带分别相对应,而且酶活性染色带与蛋白染色带位置对应,说明上述活性组分都已纯化到均一的程度。该酶分子量约为33900道尔顿,亚基分子量约为16700道尔顿。酶的两个活性组分在紫外光区的吸收曲线略有差异,但吸收峰都在255nm。该酶在55℃的温度范围内对热稳定。纯化后的酶平均为4436units/mg protein,纯化了177.6倍,活力回收为12.3%。上述酶没有过氧化氢酶活性。     

水果超氧物歧化酶活性及性质

采用ＮＢＴ光化还原法对２２种水果进行ＳＯＤ活性测定，结果表明，新鲜水果富含ＳＯＤ，其中菠萝和山楂ＳＯＤ活性最高，克鲜重酶活性超过３００单位，其次是葡萄、枣、桑椹，克鲜重酶活性在２８８—２２４单位之间．酶的比活以山楂最高，毫克蛋白质达２２９．５单位．８种供试水果果皮中ＳＯＤ活性均明显高于果肉．这２２种水果中至少有９种不同的ＳＯＤ同工酶，其中４种同工酶在多数水果中出现．试验表明，水果ＳＯＤ活性在贮存期内均呈下降趋势．菠萝ＳＯＤ的热稳定性、酸碱稳定性高于西瓜ＳＯＤ．水果普遍具有Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ和Ｍｎ—ＳＯＤ，本研究还发现菠萝、蕉柑和枣具有Ｆｅ—ＳＯＤ．     

超氧物岐化酶提纯研究

采用氯仿—乙醇提取液盐析、丙酮沉淀及ＤＥ（３２）纤维素柱层析方法，从牛红细胞中分离得到纯品铜锌超氧物歧化酶（Ｃｕ、Ｚｎ—ＳＯＤ）．纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条蛋白带，活性染色在蛋白带的位置上呈现表示酶活性的亮斑，比活力为每毫克２４８７３单位，原子吸收测Ｃｕ、Ｚｎ含量及紫外吸收光谱测定结果制备样与标准ＳＯＤ样相同．     

植物药超氧物歧化酶活性与某些性质的研究

应用NBT光还原法对23种植物药材SOD粗提液活性研究表明。供试材料全部达到200units·g~(-1)F·W的水平,13种超过300units·g~(-1)F·W,野山楂高达812.5units。酶的比活,玄参、何首乌位列前茅,超过300units·mg~(-1)protein~-,野山楂、枸杞等都在150units·mg~(-1)protein~(-1)以上。综合分析,何首乌、野山楂、玄参与枸杞等酶活性与比活都高,有开发利用的价值。植物药普遍具有Mn-SOD与Cu·Zn-SOD,本研究首先发现枸杞、宁夏枸杞、沙参和合子草具有Fe-SOD。酶粗提液的热稳定性明显优于纯化酶。     

牛红细胞的Svedberg常数

将牛、羊红细胞悬浮于等渗生理盐溶液中,消除并隔离与红细胞叠连、聚集有关的生理生化特性,单纯对红细胞沉降率(ESR)进行研究,求出红细胞的Sved-berg常数,同时用高渗、低渗盐溶液悬浮红细胞,利用红细胞的渗透特性,人为改变红细胞的形状、大小,求出异常红细胞Svedberg常数,然后两者进行比较,理论和实验证明:牛红细胞的正常Svedberg常数为7.78×10—8S,与红细胞的大小,形状和可变度有关,具有一定的临床意义,由于绵羊红细胞脆性较大,无法求出Svedberg常数。     

蔬菜超氧物歧化酶活性比较及其某些性质研究

釆用NBT光化还原法对十五种春季蔬莱进行SOD活性测定,结果表明,春季蔬菜中富含SOD,其中豌豆藤中SOD活性最高,达472活性单位/克鲜重,韭菜、荠菜、香椿、莴苣叶、枸杞苗中所含SOD活性也都赶过200活性单位/克鲜重。这十五种蔬菜中至少有十种不同的SOD同工酶,其中3种同工酶在多数蔬菜中出现。荠菜SOD粗提液含Cu·Zn-SOD和Mn-SOD两种类型,而蒜花仅含Cu·Zn-SOD,这两种SOD都具有较高的热稳定性,蒜花尤甚。     

超氧物歧化酶对糖尿病自由基代谢的影响

观察结果表明用超氧物歧化酶（ＳＯＤ）治疗糖尿病，患者机体中自由基发生改变．糖尿病患者血液中超氧阴离子（Ｏ－２）、丙二醛（ＭＤＡ）水平均高于正常人（ｐ＜０．０５），而红细胞ＳＯＤ（ｒｂｃ一ＳＯＤ）、总ＳＯＤ（Ｔ一ＳＯＤ），以及铜锌ＳＯＤ（Ｃｕ·Ｚｎ一ＳＯＤ）水平均明显低于正常人（Ｐ＜０．０１）．用ＳＯＤ肌注治疗后，不仅改善了患者的自觉症状，而且使血液ＭＤＡ较用药前下降（ｐ＜０．０５），并使ｒｂｅ一ＳＯＤ、Ｔ—ＳＯＤ、Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ均较用药前升高（Ｐ＜０．０１，ｐ＜０．０５，ｐ＜０．０５），提示ＳＯＤ可作为治疗糖尿病患者的一种药物．     

兔血铜锌超氧化物歧化酶的纯化及其性质

用乙醇－氯仿处理，丙酮分级沉淀，ＤＥＡＥ－纤维层析等方法，从兔血红细胞中纯化出铜锌超氧化物歧化酶，产率为５１％，比活力为１２４３０ｕ／ｍｇ．该酶经冷冻干燥后呈淡蓝色，天然状态，下该酶的分子量约为３００００，由相同的两个亚基组成，紫外扫描表明纯酶在２６５ｎｍ处有最大光吸收值，经聚丙烯酰胺凝胶电泳后，用蛋白染色及ＮＢＴ活性染色均显示出三条带，结果表明用该纯化方法得到的ＳＯＤ为均一性纯酶，氨基酸组成显示     

猪肝铜锌超氧化物歧化酶的分离纯化与理化性质研究

利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇．氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶（CuZnSOD）的粗酶液,通过DEAE-52离子交换层析和G-75凝胶层析实现了CuZnSOD的分离纯化,得到电泳纯产品CuZnSODI对猪肝CuZnSOD的理化性质、酶学特征和光谱性质进行了研究．     

豆类种子的超氧物歧化酶活性、同工酶及热稳定性

13种豆类种子超氧物歧化酶(SOD)活性、同工酶及热稳定性研究的结果表明:豆类种子含有较高的SOD活性,每克鲜重含500～1-200酶单位,其中绿豆、赤豆、蚕豆、大豆种子SOD活性都在1-000-U/g以上.豆类种子一般含有Cu.Zn-SOD和Mn-SOD两种类型的同工酶,以前者为主,其中Mn-SOD活性一般占总活性的10%,粉青豆Mn-SOD活性最高,为198-U/g.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)同工酶谱显示多数受试种类含1条Mn-SOD区带和3～6条Cu.Zn-SOD区带.     

豆类种子的超氧物歧化酶活性，同工酶及热稳定性

13种豆类种子超氧物歧化酶（SOD）活性,同工酶及热稳定性研究的结果表明,豆类种子含有较高的SOD活性,每克鲜重含500－1200酶单位,其中绿豆,赤豆,大豆种子SOD活性都在1000U/g以上,豆类种子一般含有Cu.Zn-SOD和Mn-SOD两种类型的同工酶,以前者为主,其中Mn-SOD活性一般占总活性的10％,粉青豆Mn-SOD活性最高,为198U/g,聚丙烯酰凝胶电泳（PAGE）同工酶谱显示多数受试种类含1条Mn-SOD区带和3－6条Cu.Zn-SOD区带。