D-核糖生产菌的原生质体诱变育种及其发酵条件的研究

以短小芽孢杆菌为出发菌株 ,经过硫酸二乙酯和原生质体紫外诱变 ,定向选育出一株稳定的核糖生产菌 TJ3,该菌株具有莽草酸营养缺陷、耐高糖、以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。在发酵条件试验中 ,采用均匀设计理论 ,利用微机对试验数据进行统计处理 ,确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产核糖的优化配比。在最适培养条件下 ,摇瓶发酵平均产核糖 30 .12 mg/m L     

CoA产生菌的诱变育种及发酵条件研究

研究了ＣｏＡ产生菌诱变育种及摇瓶发酵条件。以产氨短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍ ａｍｍｏｎｉａｇｅｎｅｓ）ＡＳ１．８４４为出发菌株， 经单菌落分离获得了 ＢＳ１．８４４菌株，再经过紫外和 ＮＴＧ诱变，获得了对 ＴＭＴＤ具有抗性的 ＣＴ４００变异株， ＣｏＡ产量为 ５３５ ｕ／ｍＬ，比原亲株提高了 ２６９％。实验了不同的培养基组分，获得了最适培养基。采用两步补料法能显著提高 ＣｏＡ产量，比原一步补料提高 ３３％。不加热提取工艺能有效降低色素含量， ＣｏＡ得率略有增加。实验选用了 ４种阳离子型表面活性剂，以 ＣＰＣ对积累 ＣＯＡ效果最好。     

庆大霉素产生菌的紫外线诱变育种及发酵条件的研究

以庆大霉素产生菌ＪＹ１－１２为出发菌株，经紫外线照射，选育出性能优良菌株ＪＹ３－５，经正交试验确定了其最佳发酵培养基，研究了最佳发酵温及初始ＰＨ值，使其摇瓶效价提高３４．３％；３０ｍ＾３罐放大试验，比出发菌株效价提高１８．６％。     

斯达油脂酵母菌胞外多糖的发酵条件

微生物多糖在食品、医药、化妆品、纺织印染和石油开采等工业上有广泛用途[1,2]。为了开发利用酵母菌胞外多糖,我们筛选了一株多糖产量较高的斯达油脂酵母菌 2.1390。该菌株能合成由半乳糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成的胞外多糖。多糖无色素、易吸水膨胀、粘度高,具有潜在应用前景。下文报告该菌胞外多糖发酵条件的研究结果。     

耐碱性木聚糖酶发酵生产条件的研究

研究了不同培养条件下的产耐碱性木聚糖酶的情况 .类黄假单胞菌SQ153 产酶适宜条件为 :以4%的麸皮为碳源 ,以 0 .6 %的尿素为氮源 ,pH 10 .0 ,37℃ ,2 0 0r/ pm培养 14h ,其酶活力达 5 98IU/mL培养基 .在 5L自控发酵罐中 ,产酶达到同样水平 ,发酵周期缩短约 1h .     

植物乳杆菌YW11生产胞外多糖的发酵条件研究

对实验室从西藏灵菇中筛选出的一株植物乳杆菌YW11发酵产胞外多糖的条件进行优化。首先通过单因素实验对发酵条件进行初步优化,然后利用二水平正交试验直观分析确定影响因素的主次顺序。以胞外多糖产量作为响应值,采用3因素3水平的响应面分析法,建立二次多项式回归方程的预测模型,从而确定植物乳杆菌YW11产胞外多糖的最优条件。单因素实验结果表明,发酵时间为18h、碳源为乳糖(质量浓度为15g/L)、氮源为大豆蛋白胨(质量浓度为15g/L)、发酵温度为32℃、接种量为3%、pH值为6.0。直观分析确定影响植物乳杆菌YW11产胞外多糖主要发酵因素为大豆蛋白胨质量浓度、pH值、接种量,响应面法优化其较佳值为:大豆蛋白胨质量浓度为13.50g/L,接种量为2.70%,pH值为6.27。验证实验表明,在优化的发酵条件下得到植物乳杆菌YW11胞外多糖产量为131.26mg/L,与理论预测值(129.915mg/L)相接近。     

荧光假单胞菌株SE-6产铁载体的发酵条件

在摇瓶发酵条件下,研究了荧光假单胞菌SE-6在各种培养条件下的铁载体分泌量,确定了适合铁载体分泌的最佳培养条件：起始pH6．5,装瓶量200／500（mL）,接种量2％,最佳培养时间为46h左右,Fe^3＋浓度为0．8mg／L．在此条件下,铁载体在发酵液中含量最高,为大规模的发酵提供了有价值的数据．     

用响应面分析法优化胞外多糖的发酵工艺

采用响应面分析方法对发酵培养的蔗糖质量分数、接种量和pH等条件进行优化.优选得到较佳的发酵工艺条件:蔗糖4%～5%,pH6 5～8,接种量10%左右.摇瓶发酵胞外多糖的产量22 6g/L,蔗糖转化率45%,产品黏度2 01Pa·s.30L生物反应器放大发酵的实验结果产胶30g/L,产品黏度4 6Pa·s.     

甲基营养型芽孢杆菌产胞外多糖发酵条件及生物活性研究

针对一株从传统酒曲中分离出的高产胞外多糖的菌株,经16S rDNA鉴定,得知该菌株为甲基营养型芽孢杆菌GSBm-1,采用单因素实验及响应面法优化其培养条件。实验结果表明,在培养基组成为酵母提取物5.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、氯化钠10.0g/L、大豆蛋白胨40.0g/L、蔗糖26.0g/L、pH值6.26,培养温度37℃、培养时间48h、转速140r/min、接种量4%的条件下,胞外多糖的产量达到最大值,为(520.1±1.2)mg/L。对胞外多糖的生物学活性进行研究,结果表明,胞外多糖具有抗氧化作用,能够清除DPPH和ABTS⁺自由基,对Fe²⁺有螯合能力。此外,胞外多糖对α-葡萄糖苷酶有抑制作用,因此具有降血糖作用。实验结果以期为微生物胞外多糖的工业生产以及食品产业的功能性原料研发提供技术参考。     

灵芝胞外多糖液体发酵培养基的优化

灵芝液体发酵过程中培养各主要成分之类间的比例对灵芝胞外多糖产量有明显影响。正交试验结果表明,当发酵培养基的配方为葡萄糖3.5%、（NH4）2SO40.1%、MgSO40.05%、KH2PO40.2%、酵母膏0.2%,培养基初始pH6.0,此时得到的胞外多糖（EPS）的量可以达到最大,实验中还进行了在不同培养基中灵芝菌丝体的生物量测定,结果表明生物量最高的培养基中灵芝胞外多糖的产量并非最高。     

Northern杂交法分析转染的胞苷酶

目的：研究人胞苷转移酶（CitidyltransferaseCT）cDNA在鼠巨噬细胞中的表达。方法：按照T．Mainiatis等人[1]的方法从转染的巨噬细胞中提取总RNA,电泳分离RNA,转移BNA至尼龙膜并固定,制备32p标记的胞苷转移酶DNA探针,杂文及放射性自显影。结果：对照组无表达,同类转染的细胞均有不同程度的表达。结论：制备探针前应用电泳法确定CTcDNA片段的浓度比紫外光吸收法更准确适用。Quickspin柱（SephedexG-25）用于回收标记的探针,有利于提高探针的纯度,增加杂交的灵敏度。     

啤酒糟固态发酵生产生物农药条件的优化

探讨了以啤酒糟为主要原料进行固态发酵生产生物农药的方法，研究了不同培养基成分及培养条件对苏云金杆菌毒力效价的影响．实验结果表明，最适发酵培养基为：啤酒糟1000g，玉米粉15g，豆粕180g，KH2PO42g；其最适发酵条件为：原料含水量为60％，发酵温度30℃、pH为7．5，培养时间56h．分析结果表明，苏云金杆菌的毒力效价达4960IU／mg．     

嗜热芽孢杆菌β—半乳糖苷酸发酵条件研究

以嗜热芽孢杆菌为菌种,研究发酵生产β－半乳糖苷酸的条件,应用均匀设计优化发酵培养基组成,结果为：服糖０．５、蛋白胨２．０、牛肉浸膏２．０、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．０１。在温度５５℃、初始ＰＨ７．０、摇床转速２００ｒ／ｍｉｎ和１０％接种量条件下,发酵２４ｈ,β－半乳糖苷酸酶活力达１３．２Ｕ／ｍＬ。在乳糖水解反应中,证实该酶能催化转半乳糖苷反应,合成半乳糖低聚糖。     

L-缬氨酸生产菌的选育及基于遗传算法的发酵培养基优化

采用以黄色短杆菌TV10为出发菌株,经紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变处理,在含磺胺胍(SG)、α-氨基丁酸(α-AB)、2-噻唑丙氨酸(2-TA)结构类似物平板上定向筛选,获得L-缬氨酸高产菌株TV230。运用遗传算法,对L-缬氨酸发酵培养基的优化进行了研究,用10组实验完成了8因素20水平的优化任务。实验结果表明,采用优化后的发酵培养基能使缬氨酸的产量提高19.4%。     

透明质酸产生菌的诱变育种及发酵条件

本文研究了透明质酸（ＨＡ）产生菌的诱变育种及摇瓶发酵条件。以兽疫链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｚｏｅｐｉｄｅｍｉｃｃｕｓ）ＮＣＴ６１８０为出发菌种，在普通加血培养基上研究了ＨＡ的产生能力，用正交法研究了野生菌的最佳培养条件，通过单菌落分离得到野生高产菌株。再通过紫外和ＮＴＧ诱变得到溶血性较弱的菌株，部分菌株比出发菌株产量提高一倍以上。在摇瓶条件下，ＰＨ值的控制及葡萄糖的加入均有利于ＨＡ的产生。     

L-乳酸高产菌选育及其发酵条件的优化

从自然界分离筛选到产酸菌66株,经发酵和遗传稳定性测试后,保留L-乳酸产量高的菌株LC14作为诱变出发株;然后改造MRS培养基,以乙酸钠和乙酸为碳源,对突变株定向筛选,再经发酵测试复筛,最优突变株的L-乳酸产量达57.9 g/L,为出发株的2.2倍.又根据不同温度对细胞生长代谢的差异,建立了变温发酵过程:20 h前控温...     

白酒糟固态发酵生产蛋白饲料条件的优化

利用枯草芽孢杆菌和热带假丝酵母固态发酵白酒糟以提高白酒糟粗蛋白含量,优化了影响白酒糟固态发酵的单因子试验(接种量、发酵时间、菌种接种比例、尿素添加量)和多因子的正交试验[L9(34)]。结果表明,双菌株固态发酵白酒糟的最优条件为:接种量15%、发酵48 h、枯草芽孢杆菌与热带假丝酵母接种比例2∶1、尿素2 g。     

玉米芯生产单细胞蛋白发酵工艺条件的优化

纤维素原料是全球产量极大而又没有得到充分利用的糖类资源，据估计全球年产超过１０００亿吨，占地球生物量的８０％．我国各种秸秆年总积量为７亿多吨，是未来化工和生物技术产业的物质基础．其中我国玉米芯量估计每年有１０００万吨［１］，由于直接利用半纤维素和木糖...     

高效表达AIM工程菌的发酵培养基及发酵条件优化

为了进一步提高工程菌的载脂蛋白AI米兰突变体(AIM)的表达量,降低发酵成本,通过碳氮源优化实验并结合正交实验筛选出该工程菌产AIM的最适培养基为(g/L):蔗糖10,酵母粉10,硫酸铵6和NaCl 10;最适发酵条件为:装液量30 mL,接种量8%,诱导时机A600 1.0,诱导剂浓度0.8 mmol/L,诱导时间6 h.在此优化的条件下,AIM的表达量为2.26 g/L,是未优化条件下的1.58倍.     

基于cdd基因敲除和嘧啶操纵子转移的胞苷产生菌的研究

以大肠杆菌作为出发菌株,通过基因工程手段对其进行改造,旨在提高胞苷产量.首先,通过Red重组系统敲除了大肠杆菌MG3028基因组上的胞苷脱氨酶基因(cdd),阻断了胞苷的分解代谢.然后,构建了含解淀粉芽孢杆菌TS8嘧啶操纵子结构基因的重组质粒pPYR3021,并将其转入E.coli MG3028(△cdd).与出发菌株E.coli MG3028相比,E.coli MG3028(△cdd)的胞苷产量提高了近2倍,而尿苷产量降低了近75%,携带重组质粒pPYR3021的菌株胞苷产量较出发菌株提高了近6倍.