恒波长同步荧光法测定吐温80-硫酸铵液固萃取体系中绿色荧光蛋白标记的融合蛋白

培养了含六聚组氨酸绿色荧光蛋白修饰融合蛋白的工程菌,对从工程菌中收集的蛋白原液用普通荧光和恒波长同步荧光2种荧光表征方式进行了比较,探究了分离蛋白的液固萃取体系中各因素(如硫酸铵浓度、吐温80浓度、酸度)对蛋白质荧光特性的影响,确定了萃取体系中适用的恒波长同步荧光测定法.运用该法得到液相的工作曲线线性相关系数达0.999 35,固相工作曲线线性相关系数为0.997 48,原始吐温80-硫酸铵液固萃取体系分离菌中目标蛋白,一次萃取固相收得率可达41.31%,调节pH 6.2时一次萃取固相收得率可达63.24%,进一步提高选择性,加入聚乙二醇修饰物可提高至93.50%.     

吐温80-(NH4)2SO4-H2O液-固萃取酚类物质

研究了吐温80-(NH4)2SO4-H2O液-固萃取体系对苯酚、邻硝基苯酚和邻氯酚的最佳萃取条件,结果以吐温80的浓度(体积分数)为10.5 %,盐的种类以硫酸盐最好,其浓度为1.51 mol*L-1,萃取酸度pH 5.87.对模拟水样中苯酚、邻氯酚、邻硝基苯酚进行了萃取,用HPLC检测,其回收率分别为86.8 %、 95.7 %、100.2%.总酚回收率90.2 % .可用于水中酚类污染物的萃取.     

IDA修饰PEG非有机溶剂液-固萃取体系分离钪(Ⅲ)和镱(Ⅲ)

研究了 Sc和 Yb在亚氨基二乙酸修饰的聚乙二醇 (PEG- IDA)混合 Tween80 -盐水液 -固萃取体系中的分配行为 ,讨论了 PEG- IDA用量、萃取酸度、吐温用量及分相盐种类和浓度对其萃取率的影响 ,筛选出适宜的萃取分离条件 ,控制萃取酸度 ,实现了 Sc和 Yb的分离 .并用 p H电位法在 30℃的 0 .1mol· L- 1 KNO3溶液中 ,测定了PEG- IDA的离解常数以及 PEG- IDA与 Sc和 Yb形成配合物的稳定常数 ,研究了稳定常数与稀土在 PEG- IDA修饰聚合物 -盐水液 -固萃取体系中分配行为的关系 ,并对该体系富集分离稀土的机理进行了初步探讨     

修饰聚合物液-固亲和体系萃取测定试样中的铜

用亚胺基二乙酸(IDA)修饰聚乙二醇(PEG)8000与吐温80,构建了修饰聚合物-盐-水液-固亲和萃取体系,用于萃取发样、中草药、水样中的铜.在吐温80体积分数5%,(NH4)2SO4浓度1.66 mol/L,PEG-(IDA)2质量浓度0.1%,pH 3.30的萃取条件下 ,Cu(Ⅱ)的萃取率>96.46% .连续变换法测定Cu(Ⅱ)和PEG-(IDA)2的摩尔比是2∶1,由螯合物离解度计算配合物的表观稳定常数lgK= 5.53.该体系的萃取机理是:Cu(Ⅱ)与PEG-(IDA)2形成电中性的螯合物,与非离子型表面活性剂吐温80的羟基实现氢键作用而被萃取.     

聚乙二醇修饰物Cu(Ⅱ)-IDA-PEG10000-IDA-Cu(Ⅱ)的合成及应用

研发了一种新的适用于液-固萃取体系的聚乙二醇修饰物Cu(Ⅱ)-IDA-PEG10000-IDA-Cu(Ⅱ).详细介绍了该修饰物的合成及其在分离纯化血红蛋白中的应用,在液-固萃取体系中可达到牛血红蛋白固相收得率93.75%,lgK=3.7.     

EDTA的酰氯化

阐述了对EDTA进行酰氯化的目的,用不同的方法合成了一种新物质--乙二胺四乙酰氯(简称EDTA酰氯),并对产物进行了鉴定和表征.将合成的EDTA酰氯与聚乙二醇6000(PEG6000)和吐温80(Tween80)在N,N二甲基甲酰胺存在下反应制得了修饰聚合物PEGEDTA和TweenEDTA.并将所得产物用于构建修饰聚合物盐水液固萃取体系富集分离Cu(Ⅱ),在pH=5.40,Tween80和(NH4)2SO4的浓度分别为9%(体积百分比)和20%(质量体积百分比)的条件下,两修饰物对Cu(Ⅱ)的一次萃取率分别为89.68%(PEG-EDTA)和81.54%(TweenEDTA).     

二-(2-乙基己基)磷酸-熔融石蜡对金属锌的固液萃取研究

研究了二-(2-乙基己基)磷酸(P204)以熔融石蜡为稀释剂对锌的固液萃取行为.考察了水相酸度、萃取剂浓度、锌离子浓度、相比、稀释剂用量、搅拌时间、温度等因素对锌的萃取率影响,并用该萃取体系在盐酸介质中对锌与镉两种离子进行了分离尝试,pH≤0.7时可获得最大分离系数为1 172.     

修饰聚合物-盐水液-固亲和萃取体系分离纯化大豆中的氨基酸

用亚氨基二乙酸 (IDA )修饰聚乙二醇 60 0 0 (PEG)后 ,再与 Cu SO4反应 ,形成 PEG修饰聚合物 PEG-(IDA-Cu) 2 ,混合吐温 80、磷酸盐 ,即构成液 -固亲和萃取体系 .采用该体系 ,直接从大豆蛋白匀浆中提取了氨基酸 .选定萃取条件 :磷酸盐摩尔比 n(K2 HPO4)∶ n(Na H2 PO4) =4.8∶ 1,维持体系 p H值 7.70 ,总盐浓度 1.60 mol·L- 1;吐温 80的体积分数 10 .5% .结果表明 :该体系对大豆蛋白匀浆中氨基酸的二次萃取率为 66.5%     

淫羊藿中有效成分淫羊藿甙分离纯化的研究

在Tween80-(NH4)2SO4液-固萃取体系中,试验了淫羊藿甙在两相的分配行为.选择Tween80浓度为9%,(NH4)2SO4浓度为1.667mol/L,萃取pH4.20,淫羊藿甙的一次萃取率可达95.2%.选择(NH4)2SO4浓度为2.121mol/L,反萃pH10.30,经一次反萃,可使94.2%的淫羊藿甙与Tween80分离.用HPLC对分离效果作了评价,结果表明,该萃取体系对淫羊藿粗提液有明显的分离纯化作用.     

异丙醇-盐-水体系萃取分离苏丹红Ⅰ-Ⅳ

基于异丙醇-盐-水双水相体系建立一种萃取分离苏丹红Ⅰ-Ⅳ的新方法,考察了盐的种类及用量、苏丹红浓度对该体系萃取行为的影响。研究结果表明在异丙醇-K2CO3-水体系中苏丹红萃取率达92%-102%,线性检测范围为0.1-20μg.mL-1,检出限均为10 ng.mL-1(S/N=3)。该方法操作简便、无污染,与液相色谱法联用有望能用于复杂样品中苏丹红Ⅰ-Ⅳ的检测。     

Tween80-水杨基荧光酮-(NH_4)_2SO_4体系萃取分离Mo(Ⅵ)

研究了 Ｔｗ ｅｅｎ８０－ 水杨基荧光酮（ Ｓ Ａ Ｆ）－ （ Ｎ Ｈ４）２ Ｓ Ｏ４ 体系萃取钼的行为及 Ｔｗ ｅｅｎ８０ 水溶液分相条件的选择．实验表明,在适当ｐ Ｈ 条件下,该体系能使 Ｍｏ（Ⅵ）与 Ｆｅ３＋ 、 Ｃｏ２＋ 、 Ｎｉ２＋ 、 Ｍｎ２＋ 、 Ｚｎ２＋ 、 Ｃｄ２＋ 、 Ｃｕ２＋ 等常见离子分离     

水提分离钝顶螺旋藻藻蓝蛋白及其稳定性研究

应用水提法分离钝顶螺旋藻藻蓝蛋白后,考察了螺旋藻细胞破碎液的藻液比、盐离子浓度、pH和环境温度等对藻蓝蛋白分离的影响,并对藻蓝蛋白的耐热性能及耐酸碱性能进行了研究.结果表明：用藻液比为5 g/L及50%（NH4）2SO4进行盐析沉淀,提取藻蓝蛋白的收率可达62.4 mg/g藻粉;螺旋藻藻蓝蛋白在常温时保持稳定,在较高温度时稳定性下降;在中性溶液环境时,藻蓝蛋白的稳定性良好,偏酸或偏碱环境均改变螺旋藻藻蓝蛋白的性能.     

Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)非有机溶剂液—液萃取行为的研究

本文研究了PEG—EBT—(NH_4)_2SO_4体系对Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)的非有机溶剂萃取行为。指出在pH7～10(NH_3H_2O～NH_3Cl)的水溶液中,有(NH_4)_2SO_4存在下,Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)可被PEG相几乎完全萃取,而Cd(Ⅱ)基本上不被萃取。从而获得了(d(Ⅱ)与Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)混合离子的定量分离。     

乙醇-盐-水——液-液萃取分离PAR的研究

研究了在（ＮＨ４）２ＳＯ４,Ｎａ２ＣＯ３存在下,乙醇与水相分离萃取ＰＡＲ的情况．并研究了不同盐量与不同ｐＨ值对萃取分离的影响,实验表明,在乙醇－盐－水,液－液萃取体系中,ＰＡＲ及其络合物能够完全进入乙醇相中,结果令人满意,表明乙醇－盐－水是一种较为理想的液－液萃取体系     

黑豆凝集素的提取及血凝效果研究

采用70%饱和度硫酸铵盐析的方法,分别以蒸馏水、生理盐水、pH=7.2的磷酸缓冲液、pH=5.2的乙酸缓冲液和0.7mol/L的甲酸作为浸提溶液,提取黑豆凝集素粗品,透析并用分子筛层析纯化黑豆凝集素,以鸡血凝集试验检测.结果表明:磷酸缓冲液为最佳浸提液,黑豆凝集素提取率最高,为9.17%,凝血效果最好.血凝试验表明分子筛层析图谱中出现的第1个峰即为黑豆凝集素,冷冻干燥后所得产品为白色粉末.     

土壤中有效钾的快速提取研究

比较了Mehlich3法、1mol/L NH4Ac法、2mol/L冷HNO3法、0.05mol/L HCl 0.0125mol/L H2SO4法等四种土壤有效钾的快速提取方法。对土壤中有效钾的提取率而言,1mol/L NH4Ac法与Mehlich3法基本一致,0.05mol/L HCl 0.0125mol/L H2SO4法则偏低,而2mol/L冷HNO3法则偏高。综合分析认为1mol/LNH4Ac法是比较方便可行。进一步优化了1mol/L NH4Ac法的实验条件。在最佳实验条件下,测定了五个实际土样,所得结果满意;标准加入法回收试验表明,加入回收率为93.8%~96.9%,相对标准偏差为2.6%.     

AOT／异辛烷萃取猪心细胞色素C的方法研究初探

用５０ｍｍｏｌ／ＬＡＯＴ反胶团系统在添加０．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ，ｐＨ７．５条件下萃取了猪心糜粗提液（Ⅰ）、ｐＨ７．５沉淀杂质蛋白后的提取液的滤液（Ⅱ）、硫酸铵（５００ｇ／Ｌ）盐析除杂蛋白的清液透析液（Ⅲ）、硫酸矮（５０ｇ／Ｌ）除杂蛋白的滤液并透析除盐的溶液（Ⅳ）、细胞色素Ｃ的三氯乙酸的沉淀物的饱和硫酸铵溶液透析除盐细胞色素Ｃ溶液（Ⅴ）中的细胞色素Ｃ。用１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ｐＨ１３．０的水溶液对萃取有机相中的细胞色素Ｃ进行反萃取获得细胞色素Ｃ溶液。结果显示，ＡＯＴ反胶团系统能够将细胞色素Ｃ从猪心提取液中萃取到有机相中，并经调节离子强度和ｐＨ值又能将细胞色素Ｃ从有机相中反萃取到水溶液中。其萃取效率（％）分别为８６．９、７８．１、６３．１、４３．１和６。     

乳状液膜浓缩稀土(Ⅱ)

这是《乳状液膜浓缩稀土 (Ⅰ)》的继续 ,但以 (NH4 ) 2 SO4 型料液为提取、浓缩对象。它包括以下实验 :料液类型比较 (NaCl型和 (NH) 2 SO4 型 )、NaAc加入量、膜相有无石蜡、膜的回收及再用。获得了从 (NH4 ) 2 SO4 型浸取料液中浓缩稀土的适宜液膜体系N2 0 5-P50 7-煤油 -HCl。液膜富集液中的稀土浓度可达 1 0 2g·L-1,稀土提取率达 93 %。     

鸡卵黄抗体的制备及其不均一性

介绍了免疫期卵黄液中白蛋白（牛）抗体效价和亲合力的变化。研究了ＰＨ对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对ＩｇＹ浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白ＩｇＹ的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和ＩｇＹ盐析的最适合条件分别是ＰＨ５．１和２．２ｍｏｌ／Ｌ。经免疫亲和柱层析或金属螯合亲和柱层析后,白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体,还