一种简易的植物核酸提取方法：从干叶和新鲜叶中快速提取…

本介绍了一种植物核酸提取的简易方法，该法只需在常温下接常规的分子生物学操作条件已干燥的和新鲜的植物叶中快速提取总ＲＮＡ和ＤＮＡ。     

一种简易的植物核酸提取方法─—从干叶和新鲜叶中快速提取RNA和DNA

本文介绍了一种植物核酸提取的简易方法．该法只需在常温下按常规的分子生物学操作条件从已干燥的和新鲜的植物叶中快速提取总ＲＮＡ和ＤＮＡ．所获得的ＲＮＡ和ＤＮＡ能顺利用于下一步的ＰＣＲ、测序及小分子ＲＮＡ研究等分子生物学实验．     

一种从骨组织提取RNA的新方法的研究

1　材料与方法1 .1　主要试剂　异硫氰酸胍、β -巯基乙醇、DEPC为 Promega产品 .十二烷基磺酸钠、琼脂糖均为本室进口试剂 .其它试剂均为国产分析纯 .1 .2　仪器　贺利台式冷冻离心机 ( centrifuge 1 7RS) ,冰冻切片机 ( AO histostat microtomeAmerican) ,紫外分光光度计 (日本岛津 UV2 5 0 1 ) ,L KB激光密度扫描仪 ,内切式组织匀浆器( ZS83- 1型 ,浙西机械厂 ) .1 .3　骨标本的制备　取材前室内紫外灯照射 1 h.组织剪、包埋盒、冻存管、镊子、刀片均用75 %酒精浸泡 1 h后 ,0 .1 %焦碳酸二异酯 ( DEPC)浸泡 2 h,再用灭菌水冲洗…     

富含多糖番茄果实组织中总RNA的有效提取方法

本文介绍了一种从富含多糖的番茄果实组织中提取总RNA的有效方法,其产率约为每200 m g组织80μg RNA,并且RNA的吸光值的比值A260/A230在1.5~2.0之间,A260/A280在1.6~1.9之间.提取的RNA能够用于RT-PCR反应.这种方法也能有效地应用于富含次级代谢产物的真菌总RNA提取.     

一种水稻总RNA提取的简易方法

应用高效Trizol试剂,对水稻根、叶、花材料进行了总RNA的提取.采用摸索后的优化程序,可在不用液氮的室温下,1 h完成总RNA的提取.电泳结果可见清晰的条带,表明RNA的完整性较好;紫外测定结果表明了RNA的纯度较高,所得检测结果说明所得总RNA产品可作进一步的实验之用.     

植物挥发性次生物质对昆虫的行为调控及其机制

植物挥发性次生物质是植物在代谢过程中产生的一些短链碳氢化合物及其衍生物，在植食性昆虫的寄主植物定位、交配、寻找合适的产卵场所、取食等行为调控中起重要作用，还可调节天敌寻找寄主等行为，以及作为植物的间接防御手段和昆虫外激素的协同素。综述植物挥发性次生物质对昆虫的行为调控及其作用机理，进一步分析植物挥发性次生物质在害虫防治中的发展前景。     

植物病毒RNA提取方法的研究

病毒RNA提取技术是分子生物学中经常应用的重要技术,是对RNA病毒在分子水平进行研究的必要手段.介绍了一种从染病植物组织中提取病毒RNA的方法,利用此方法提取了马铃薯x病毒(PVX)的RNA基因组,并通过RT-PCR得到其外壳蛋白基因,提取的病毒RNA在纯度和产量上都可满足反转录和PCR扩增等基本分子生物学操作.     

从动物组织中提取总RNA的CTAB法

在生物及生物技术的研究和应用中,RNA的提取已经成为重要的基本实验技术。本研究对CTAB法提取RNA的过程中影响因素进行分析,尝试采用改良的CTAB方法从动物组织中提取总RNA。通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测分析可知,采用该方法提取的总RNA纯度高,完整性好,电泳条带完整清晰,可以进行下一步的分子生物学研究。结果表明,用改良的CTAB法提取动物组织RNA是切实可行的,它具有简便、实用性强的特点,是一个符合分子生物学实验教学要求的新方法。     

RNA的提取及3种RNA提取试剂盒的比较

概述了RNA的提取以及一些注意事项,并对实验室常用的3种RNA提取试剂盒进行了比较。     

库尔勒香梨总RNA的快速提取方法

以库尔勒香梨花、芽、茎尖、叶片和皮层为材料，对总RNA提取方法进行了改进，从而筛选出适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。采用该方法可以在3-4h内得到纯度高、含量高、完整性好的梨总RNA，并获得了逆转录活性较强的病毒RNA，同时使提取成本降低。此方法对苹果、葡萄、桃等果树总RNA的提取均适用。     

一株茈醌类光敏剂产生菌ALl8的总RNA提取

通过实验确定了采用异硫氰酸胍和β一巯基乙醇联合变性，酚、氯仿、异戊醇抽提的方法，从一株次生代谢产物为蔸醌衍生物的丝状真菌ALl8中提取总RNA。经甲醛变性凝胶电泳分析和紫外分光光度法检测，证实得到了完整、均一的总RNA，为构建此菌的cDNA文库和克隆生物合成关键基因奠定了基础。     

山药总RNA不同提取方法的比较研究

为提取高质量的山药总RNA,以铁棍山药茎段为材料,采用Trizol法、RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法、改良CTAB法和试剂盒法提取总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳分析所提取RNA的完整性,并用超微量分光光度计分析RNA的纯度.结果显示采用Trizol法难以提RNA,RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法提取效果不理想,存在DNA和蛋白质污染,而用改良CTAB法和试剂盒法提取到的总RNA纯度高、完整性好,其中,改良CTAB法较试剂盒法价格便宜,但提取过程较烦琐.因此,应根据实验需要选择CTAB法或试剂盒法提取铁棍山药总RNA.本结果对其他品种山药或富含多糖多酚类物质植物的RNA的提取也具有一定借鉴意义.     

兰州大尾羊脂肪组织总RNA提取方法的试验研究

在Trizol法的基础上通过优化操作规程、改进操作步骤等手段提取纯化了兰州大尾羊脂肪组织总RNA,并利用紫外分光光度计和凝胶电泳对其浓度和质量检测进行分析.结果表明:该方法可快速高效地获得适用于RT-PCR、基因表达的高通量分析、cDNA文库的构建等研究的高质量的总RNA.     

一种改进的珙桐(Davidia involucrata)干种子总RNA的提取方法

使用基于去污剂或盐酸胍等常规提取缓冲液 ,从含有大量脂肪、蛋白质和多酚类等次生代谢物的珙桐(ＤａｖｉｄｉａｉｎｖｏｌｕｃｒａｔａＢａｉｌｌ.)干种子中制备足够量的总ＲＮＡ极为困难 .著名的观赏植物珙桐特产于中国西南部 .其组织含大量多酚类物质 ,这些多酚类物质的污染 ,使得从其各种组织中提取核酸尤为困难 .一旦珙桐的组织破裂后 ,胞质内的这些污染物就直接与核酸接触 .许多植物组织中含有多酚类物质 ,它们是极强的氧化剂 .它们的存在会极大地降低所提取核酸的得率和纯度[1] .氧化后的多酚类物质会与蛋白质和核酸发生共价结合 .这…     

适于cDNA-AFLP的黑木相思组培苗总RNA快速提取方法的建立

针对黑木相思富含多酚、多糖等次生代谢物质的特点,以其组培苗为试材,采用改良CTAB裂解法、硼砂-SDS裂解法、改良异硫氰酸胍裂解法、CTAB-异硫氰酸胍裂解法、改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法等5种不同的提取方法提取其总RNA.结果发现:改良CTAB-异硫氰酸胍裂解法能有效地控制多酚、多糖、蛋白质以及DNA等对所提取总RNA的污染,所得总RNA质量高、完整性好.紫外分光光度检测,A260/A280比值为1.96～2.00,A260/A230比值1.98～2.20,总RNA得率为118.4～213.6μg.g-1,电泳检测,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,所提RNA质量可以满足dscDNA合成和cDNA-AFLP等后续分子操作要求.     

角倍蚜总RNA提取方法的比较及优化

采用Trizol法及试剂盒柱提法提取角倍蚜若虫及成虫总RNA,通过紫外分光光度法(OD260/OD280、OD260/OD230)及琼脂糖凝胶电泳检测,对所提取RNA的纯度、浓度及完整性进行了分析.结果表明,采用常规样品量两种方法提取的RNA均降解严重,分析认为角倍蚜富含内源性RNase.通过大幅降低样品量,优化提取步骤,缩短提取时间,有效消除了RNA降解现象.采用Trizol法获得了纯度高、完整性好的RNA样品,电泳显示清晰的28S、18S及5S三条带;试剂盒柱提法获得的RNA呈现较为特殊的带型,没有常规的5S条带,而在750bp～1 000bp之间有一明显条带.     

一个预测RNA二级结构的回溯算法

本文讨论了一个预测RNA二级结构的回溯算法。该算法根据极大基配对的原则按字典顺序产生所有可能的二级结构。它的时间复杂性是O(n~2),空间复杂性是O(n)。