茶袋法固相合成胸腺五肽肽库

利用组合化学技术,采用简便的茶袋法固相合成制备胸腺五肽D型氨基酸取代类似物肽库,共合成32条肽。粗肽得率平均在54％左右。通过高效液相色谱分离得到纯肽,经质谱及HPLC分析,所制类似物相对分子质量与胸腺五肽一致,精制后的肽得率平均在36％左右。     

Fmoc(9-芴甲氧羰基)法固相合成胸腺五肽

采用对碱敏感的Fmoc法α-氨基保护策略固相合成了胸腺五肽,并讨论了胸腺五肽不同固相载体、不同活化试剂对胸腺五肽固相合成的影响。试验结果表明Fmoc合成策略中各步的缩合率均在90％以上,同时对产品进行色谱分析,纯度达到83％。     

细胞选择性穿膜肽的穿膜效果研究

细胞穿膜肽是一类能够穿透细胞膜并且不损坏细胞膜结构的小分子多肽,该多肽一般由不多于30个氨基酸组成.针对FITC标记的具有肺癌或肝癌细胞选择性的两种穿膜肽,设置不同浓度梯度,分别处理多种肿瘤细胞,荧光显微镜下观察不同作用浓度下细胞中绿色荧光的强弱,并通过流式细胞仪检测含有荧光的细胞数.结果表明:两种细胞穿膜肽具有不同的细胞选择性. CPP33在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于50%,CPP44在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于60%.并且随着作用浓度的增加,两种细胞中含有荧光的细胞数不断上升.因此这种针对肿瘤细胞的选择性穿膜肽可能为小分子药物在体内的精确递送提供一种新的方法.     

固相合成胸腺五肽的分离与纯化

胸腺五肽(TP5)是一种很有发展前景的药物，具有胸腺素的全部生理功能固相合成法是胸腺五肽生产的主流技术，目前，对固相合成的五肽一般采用反相色谱技术纯化，但效率低、成本高，仅限于小规模制备实验采用离子交换法纯化，并进行了方案优化，发现在pH4．4醋酸盐缓冲液平衡、盐梯度洗脱条件下纯化TP5，一步分离纯度可达98．23％该法可以满足大规模制备的要求，且成本很低     

生长激素释放肽（GHRP）的合成及促生长效应

采用Ｍｅｒｒｉｆｉｌｄ固相法合成了生长激素释放肽，其氨基酸序列为Ｈｉｓ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｄ－ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ２．ＨＰＬＣ分析纯度为９７．７％，氨基酸组分分析与理论值吻合。以窿不同剂量对１５、２５及３５日龄小鼠的生长效应，１０００μ／齐量可使小鼠体重较对照组增加１５．２％，当剂量高达１０ｍｇ／ｋｇ时仍安全无毒。     

猪胸腺激素肽PT_3的研究

本文报导从猪胸腺素注射剂中,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分离精制得猪胸腺激素活性肽PT_3的方法。该肽PT_3经反复聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳,呈单一区带。经测定,此肽主要由酸性和中性氨基酸组成。用Sephadex-G-50测定其分子量的结果。E-玫瑰花环法测定,有活性。     

血清胸腺因子(FTS)的合成和活性测定

采用芴甲氧羰基（Fmoc）固相肽合成法（Fmoc～SPPS）合成了血清胸腺因子（FTS）,用中压液相阴离子柱一步纯化,经HPLC分析纯度,通过质谱和氨基酸序列测定鉴定合成产物。根据FTS恢复胸腺切除小鼠的脾细胞对免疫抑制荆AZ敏感的特性测定合成FTS的活性。结果表明：化学合成血清胸腺因子的产率为94．7％;纯化后其纯度达到93．7％;质谱测定其相对分子质量为876．6,与理论分子量相符。氨基酸序列测定为NH2／Glu—Ala—Lys—Ser—Gin—Gly—Gly—Ser—Asn,与设计序列一致。实验显示在合成FTS的浓度为10^-14mol／L时尚有部分活力,在10^-13mol／L时能够完全恢复胸腺切除小鼠的脾细胞对AZ的敏感性。     

碳末端修饰的内吗啡肽类似物的合成和活性测定

本文采用片段缩合的液相多肽合成方法合成了内吗啡肽母体及其类似物共8个化合物,通过质谱鉴定其分子量,通过豚鼠回肠纵行肌实验（GPI）和小鼠输精管实验（MVD）鉴定它们的离体活性,结果表明内吗啡肽碳末端为中性或弱碱性有利于内吗啡肽跟μ阿片受体的结合,不利于跟δ阿片受体的结合;芳环朝向能大大影响其受体亲和性和选择性。     

BRC2基元的合成及与靶肽p53(171-192)的相互作用

乳腺癌易感基因2(Breast Cancer Susceptibility Gene 2,BRCA2)是能抑制细胞发生恶变的关键基因.p53蛋白是参与细胞过程的主调控蛋白,p53蛋白要想行使其功能,则需要BRCA2及其产物对p53进行调控.选择BRCA2中的BRC2重复基元,用Fmoc固相合成法合成了BRC2及其3个片段.通过反相高效液相色谱(RPHPLC)和质谱对其进行表征,得到纯度大于90%的目标肽链.利用圆二色谱法初步探究了BRC2及其3个片段与靶肽p53(171-192)的相互作用.结果表明,BRC2的3个肽片段中,片段NEVGFRGFYSAHG在BRC2肽行使其功能中起着主要的作用.     

具有GPx和SOD双酶活性含硒76肽的制备及其穿膜效应

根据模块酶原理设计一种嵌有穿膜结构域序列并具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)双酶活性的含硒76肽(Se-CuZn-76P),利用半胱氨酸缺陷表达法在单一蛋白生产(SPP)系统表达该肽,并鉴定其穿膜效应.实验结果表明:该方法可成功表达纯度较高的Se-CuZn-76P,并且每毫克蛋白表现出109μmol/min的GPx活力和1 218μmol/min的SOD活力;在Se-CuZn-76P存在的环境中培养肝L02细胞一段时间后,细胞内的GPx和SOD活力分别升高1.65和4.12倍,且Se-CuZn-76P可顺利进入L02细胞.     

Study on synthesis and biological activities of novel water-soluble metalloporphyrins

The synthesis and characterization of a series of metal porphyrins, M^II(Por), {Por=dianionic of 5, 10, 15, 20-tetrakis [4-(4′-bromobutyloxy) phenyl]porphyrinato and 5, 10, 15, 20-tetrakis [4-(4′-butyloxypyridine bromide)phenyl]porphyrinato, M=Zn, Cu, Mn, Co, Ni, Ru-CO} were described. The complexes 3a-3e were prepared from the reactions of compound 2 with metal acetates in chloroform, and the treatment of 3a-3f with excess of pyridine gave corresponding complexes 4a-4f. These new compounds were identified by absorption spectroscopies,¹H-NMR and elemental analyses. The results of biological activity testing for 4a-4f revealed that 4a and 4c had stronger inhibiting action on the growth metabolism ofEsche richia coli. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China (No: 29972035) and the Zi-Qiang Science Foundation of Wuhan University, 2000 Biography: Li Zao-ying (1949-), famale, Professor, research interests, study on synthesis and biological activities of metalloprphrins.     

软珊瑚化学成分及其生理活性研究

就中国南海处于亚热带地区的软珊瑚的化学成分(包括萜类、甾醇类、鲨肝醇、嘧啶类和含氮化合物等生理活性物质)作了详细的介绍,并对其相应结构的抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗癌以及明显的抗心律失常和心肌缺血作用作了论述。     

卟啉衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

为发现新型光动力疗法光敏剂,设计合成了8个具有抗肿瘤活性的小分子酸与萘基卟啉缩合成的酯类化合物,并用MTT法对这些化合物进行了光动力抗肿瘤活性研究.所合成的8个化合物均未见文献报道,采用1HNMR等光谱手段进行了结构分析,抗肿瘤活性结果表明,其中两个化合物具有明显的光动力抗肿瘤活性和剂量效应关系,其他化合物在较高剂量下,也表现出一定的光动力抗肿瘤活性.     

维生素E琥珀酸酯的合成及抗癌活性研究

利用维生素E及琥珀酸酐在催化剂的作用下合成了维生素E琥珀酸酯。在此基础上 ,以人胃癌细胞SGC - 790 1为实验模型 ,利用MTT法观测了维生素E琥珀酸酯对其细胞生长的影响 ,并对其进行了细胞凋亡形态学观察。利用WesternBlot法检测了与调亡有关的c -Jun蛋白表达情况。研究发现 ,维生素E琥珀酸酯合成品对SGC - 790 1细胞生长具有明显的抑制作用 ,并可通过促进c -Jun蛋白表达诱导SGC - 790 1细胞凋亡     

Preliminary crystallographic studies on two insulin analogues which retain high biological activities after alterations in A chain

Using Fmoc solid phase synthesis and site-directed gene mutagenesis, two insulin analogues, [A13-14GABA,A21Ala] porcine insulin and [A3Thr] human insulin, have been prepared respectively, which retain high biological activities. The results show that non-coded y-amino butyric acid (GABA) could replace the dipeptide, Leu-Tyr, in A13-A14 of insulin and that the hydrophilic Thr could substitute Val in A3 of insulin which is highly conservative and included in the receptor binding site. The crystal culture and preliminary crystallographic studies by X-ray diffraction on these two insulin analogues are reported.     

聚硅氧烷改性聚氨酯的合成及乳液粒径的研究

以聚醚二元醇(PEG)、甲苯二异氰酸酯(TDI)、端羟基硅油(GY-23)为主要原料经共聚反应,合成了羟基硅油改性嵌段阳离子聚氨酯乳液(GRK),经FTIR1、HNMR对产物进行表征,确认GRK分子结构中含聚二甲基硅氧烷甲苯氨基甲酸酯(-C6H3(CH3)NHCOO[Si(CH3)2]x—)结构单元(Ⅰ);用激光粒度分布仪测乳液粒径,得出当n(-NCO)/n(-OH)为1.2~1.3∶1,叔胺二元醇(ZC-10)用量质量比为5.87%~6.23%时,乳液中位粒径0.72~0.099μm的GRK棕色乳液,储存期限大于等于1年。     

Design,synthesis and biological activities of quinazoline containing sorafenib analogs as antitumor agents

A series of novel sorafenib derivatives containing quinazoline moiety were designed and synthesized. Their antiproliferative activities against HCT116 and HCT115 cell lines were evaluated using MTT assay. Most of the synthesized compounds showed significant cytotoxicity against the selected cell lines. These cytotoxicities were consistent with their inhibitory activity against the phosphorylation of c-Raf, MEK1/2 and ERK1/2. Compound GD-09 also showed much stronger anti-tumor activity than that of sorafenib in vivo by B16 melanoma xenograft model test.