美国：克隆动物间自然交配

这5只小猫是不久前通过两只克隆野猫自然交配而产下的。据研究人员介绍，一只雄性克隆猫已与两只雌性克隆猫通过自然交配方式成功生育了8只小猫。在此之前，克隆的羊、老鼠、牛也曾实现自然繁育，但这还是第一次实现两个克隆野生动物之间的自然交配，这表明，克隆技术可用于保护濒危物种。     

拟南芥中一个镍离子转运蛋白的亚细胞定位

离子的跨膜转运是细胞获取养分的重要环节，亦是植物在组织和器官水平上进行养分吸收运移的基础．在植物中镍（Ni）元素主要以Ni^2＋的形式存在，并通过Ni^2＋转运蛋白将其跨膜转运至相应的组织器官，参与氢酶和脲酶的合成．生物信息学分析表明，拟南芥中一个Ni^2＋转运蛋白AT2G16800含有叶绿体定位信息．克隆该基因5’端编码转运肽的272bp片段，与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合后，在拟南芥中高效表达，对其进行了亚细胞定位的研究．转基因植株通过共聚焦扫描显微镜的观察，发现GFP荧光信号只存在于叶绿体中，该结果表明A他G16800为叶绿体蛋白．     

头脑体操2

1.河的东岸只有一只小船,最大的载重量为100千克。有一位体重100千克的先生带着两个体重都是50千克的小孩,3人居然利用这条小船渡达西岸。问:他们是用什么方法渡河的?     

老鼠的五大天敌

老鼠的主要天敌是家猫、野猫、猫头鹰、黄鼠狼、蛇五种.猫是从地面向老鼠进攻的灭敌,一只猫每天捕捉老鼠三至五只,多则十来只,一猫镇千鼠.猫头鹰是从空中向老鼠进攻的天敌.一只猫头鹰一个夏季可捕食老鼠一千多只,一年可从鼠口夺粮二千多斤.黄鼠狼既可以从地面上捕鼠,又能掘洞捕鼠.一只黄鼠狼一年捕     

绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒载体pLNOX-EGFP-C1-hri的构建及鉴定

构建表达重组绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的逆转录病毒载体pLNCX—EGFP-c1-hri，为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用机制打下基础．用亚克隆法，将目的片段egfp-c1—hri从表达载体pEGFP-C1-hri克隆到pLNCX上，用酶切筛选得到阳性克隆后，用脂质体法将其转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中，用800mg／L G418筛选2周后，在荧光显微镜下检测其表达．双酶切鉴定得到pLNCX-EGFP-C1-hri阳性克隆，荧光显微镜显示绿色荧光在B16细胞质中高效表达．成功构建逆转录病毒表达载体pLNCX—EGFP-C1-hri．     

头脑有氧操

小明体重39千克，他要将两个各重1千克的铁球带过桥。桥的载重量只有40千克，如果小明必须带两个铁球过桥，那么，他必须采用什么办法才能安全过桥呢? （一 休）有一个木桶，里面盛着水。小华说桶里的水刚好是半桶，小玲说只有小半桶。如果不用别的器具，你能判断出谁对谁错吗? （小 谢）带球过桥半桶水 有4只口袋，分别装着1元硬币若干个，其中有一袋为假币，每个假币比真币轻5克。现可从口袋中取出若干硬币放在天平秤上称，但只能称一次就找出装假币的那一袋，该如何称？ …     

克隆猫的“遗言”

多年前,富商弗洛兹的爱宠猫咪丹芬不幸患上了肺癌,看着即将远离自己的爱猫,他难过极了。一个偶然的机会,弗洛兹得知美国一家基因科学实验室可以帮他制造出一只与丹芬一模一样的"克隆猫",弗洛兹决定不惜花费巨资重新"制造"     

克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

克隆克氏原螯虾主要过敏原原肌球蛋白的一个片段区基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫原性.提取克氏原螯虾总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆得到目的基因;将目的基因连入pMD19-T载体,提质粒酶切鉴定并测序;将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白;利用Western-blotting和ELISA检测该重组蛋白的免疫原性.克隆获得目的基因,其片段长为291 bp,编码97个氨基酸.重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting和ELISA结果表明该蛋白与克氏原螯虾过敏病人混合血清中IgE结合,具有免疫原性.     

局域网内安装软件的快捷方法

局域网内多台计算机安装系统时，可使用蓝沙快克或三茗网络对拷。蓝沙快克要求网卡有远程启动功能，而三茗网络对拷是一款对硬件要求极低的网络克隆软件，使用方便，网络克隆速度快。     

天花粉蛋白与腺嘌呤、单磷酸腺苷、三磷酸腺苷之间的相互作用

利用荧光光谱和透析平衡法研究了腺嘌呤、单磷酸腺苷（ＡＭＰ）、三磷酸腺苷（ＡＴＰ）与天花粉蛋白之间的相互作用。荧光光谱揭示腺嘌呤与天花粉蛋白结合后对其荧光强度影响较小，但使蛋白的荧光峰位红移，而ＡＭＰ和ＡＴＰ只引起蛋白荧光强度下降而不改变峰位。ＡＭＰ，ＡＴＰ引起的荧光强度下降包含着快慢两个过程。透析平衡法测得ＡＭＰ，ＡＴＰ与天花粉蛋白相互作用的结合常数分别为１．２×１０￣（－１）ｍｏｌ／Ｌ和４．５×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ，二者自由能之差为－２．２６ｋＪ／ｍｏｌ。     

粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定

PCR扩增来自质粒pUC119的β-内酰胺酶基因(bla)作报告基因,克隆进质粒pNZ8037上的能被Nisin诱导的启动子PnisA下游,构建了粪肠球菌启动功能片段探测载体pNZ-bla.利用该探测载体从粪肠球菌染色体总DNA中克隆到了能在粪肠球菌中表达的一系列具有启动功能的DNA片段,将包含克隆片段的pNZ-P-bla6质粒电击转化粪肠球菌,培养转化子并检测其抗氨苄强度,结果表明其抗氨苄强度大于Nisin诱导的含pNZ-bla质粒的粪肠球菌.表明克隆的功能片段启动能力强于PnisA.在pNZ-P-bla6的启动功能片段下游Sau3AⅠ和EcoRⅠ之间接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建表达绿色荧光蛋白的质粒载体pNZ-P-gfp并导入粪肠球菌中,共聚焦显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的表达.     

脱毒马铃薯综合高产栽培技术与产量函数模型初探

牡丹江山区半山区脱毒马铃薯的主要栽培措施对产量的影响顺序是氮肥〉钾肥，最佳组合为，密度４５５４－５３７６株／６６７ｍ＾２，纯Ｎ９．４７－１０．８１千克／６６７＾２，Ｐ２Ｏ５３．１５－４．９６千克／６６７ｍ＾２，Ｋ２Ｏ２，３２－３．８千克／６６７ｍ＾２，每６６７ｍ＾２，产量可达２５００千克以上。     

猫传染性腹膜炎的诊断

目的对临床疑似猫传染性腹膜炎病例进行分子生物学、病理学诊断。方法根据冠状病毒3'UTR保守基因序列设计一对引物,对4例病死猫的组织器官和10例腹水进行RT-PCR检测,并对扩增产物进行序列测定;同时对所有病死猫组织器官进行组织病理学诊断。结果RT-PCR扩增产物克隆测序结果与GenBank中猫传染性腹膜炎病毒基因序列同源性为97%~98%。小肠浆膜、肝脏、脾脏等组织可观察到典型的炎性肉芽肿样变、灶性坏死和炎性细胞浸润。结论证实了4只病死猫感染了猫传染性腹膜炎病毒,且10例腹水中检测到猫传染性腹膜炎病毒核酸。     

稳定表达EGFP-LC3蛋白的HeLa细胞系的构建

自噬是指细胞自身将细胞质蛋白或细胞器经溶酶体降解的一种过程.微管相关蛋白1轻链3(LC3)是自噬的标志蛋白,利用荧光显微镜观察EGFP-LC3荧光蛋白是否聚集成点状是检测自噬的方法之一.首先构建了表达EGFP-LC3蛋白的真核表达质粒,其具有荧光和药物筛选双标签.转染到HeLa细胞中,利用药物初步筛选后,再稀释到96孔板中筛选出有荧光的单细胞克隆,得到稳定表达EGFP-LC3蛋白的HeLa单克隆细胞系.该细胞系在饥饿诱导条件下EGFP-LC3蛋白可聚集成点状,验证了该细胞系能够用于指示自噬,为今后自噬研究奠定了基础.     

绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒载体pLNCX-EGFP-C1-hri的构建及鉴定

构建表达重组绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的逆转录病毒载体pLNCX-EGFP-c1-hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用机制打下基础.用亚克隆法,将目的片段egfp-c1-hri从表达载体pEGFP-C1-hri克隆到pLNCX上,用酶切筛选得到阳性克隆后,用脂质体法将其转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,用800 mg/L G418筛选2周后,在荧光显微镜下检测其表达.双酶切鉴定得到pLNCX-EGFP-C1-hri阳性克隆,荧光显微镜显示绿色荧光在B16细胞质中高效表达.成功构建逆转录病毒表达载体pLNCX-EGFP-C1-hri.     

不同蔬菜应选用不同叶面肥

叶菜类蔬菜：叶面追肥以尿素为主，喷施浓度0．3％至0．5％，每亩喷洒75千克至100千克，全生育期共喷2至3次；也可喷施0．3％米醋溶液，每亩喷50千克左右。     

DNA的不同提取方法对转基因产品定值的影响

国内外非常重视转基因产品的检测工作,主要依赖于DNA的PCR方法进行检测,其检测结果可靠、稳定、灵敏度较高。尤其在转基因产品的定值实验中,荧光定量PCR的应用起到重要的作用,但是DNA的质量是保证荧光定量PCR定值准确的关键。实验以100%的克螟稻为材料,用CTAB法、商品化的Promega、Qiagen以及TIANGEN提取试剂盒,分别提取克螟稻基因组DNA,经过核酸蛋白分析仪初步测定浓度、纯度以及离子浓度后,分别以水稻内源基因PLD和克螟稻特异性转化体引物及探针实施荧光定量PCR实验,以100%克螟稻为盲样实施定值,来确定一种更适合荧光定量PCR定值实验的DNA提取方法,最终确定Qiagen和TIANGEN提取试剂盒满足荧光定量PCR对100%的克螟稻标准物质定值实验的要求。     

猫咪疗法

不久前,世界猫联盟(WCF)在莫斯科举办的猫展令人眼花缭乱。参展的600多只猫品种多样,五花八门。全世界首届猫展于1871年在英国举行。据说,当时国王一家也亲临参观。猫主人们无一例外深为自己的猫咪自豪,不论你问起哪只猫,它都是了不起的,如国王或王后一般。猫有极强的生命力和超凡的繁殖能力。古埃及的猫———巴斯德特神是产妇的保护神。一只来自美国得克萨斯州、名叫达特西的猫以产仔420只的记录被写入吉尼斯世界记录大全。1989年6月,32岁高龄的英国猫吉提死了,她留下了218只猫仔,其中有两只是她在30岁时产下的。“猫有四条腿,还有一条…     

马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位

为了研究马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位情况,采用RT-PCR技术克隆到马铃薯StHb1基因cDNA序列,并成功构建了StHb1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pBI121-StHb1-GFP.利用农杆菌介导法将重组载体转化洋葱内表皮细胞,通过荧光显微镜观察融合蛋白的瞬时表达以确定StHb1蛋白在细胞内的分布.结果表明StHb1蛋白主要分布于细胞核中.     

神奇的狞猫

繁衍生息在非洲和西亚等地的猫科动物狞猫,个头儿中等,体重一般在13～18千克,但是,它们却被划归为小型猫科之中. 狞猫喜欢生活在干燥的旷野,尤其干草原和半沙漠地带更是它理想的家园,不过,灌木林和稀树大草原也有它们的踪迹. 狞猫的"外衣"多为浅黄棕色或深红棕色,也有少量全身为黑色的.它的长相,最突出的特征,是它的耳朵.它的那双大耳朵又长又尖,而且都长有黑色丛毛.故而,土耳其人将狞猫称为"黑耳".据研究,狞猫的这双大耳朵具有特殊的功能,可以帮助它寻找猎物,一旦寻找到猎物,丛毛很快就可以帮助它定位猎物的精确位置.