中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.     

八宝景天茎段的组织培养和快速繁殖①

以八宝景天茎段为外植体,以MS为基本培养基,对八宝景天外植体消毒、不定芽诱导、继代增殖和生根培养基进行筛选试验,建立了八宝景天组织培养快繁技术体系。结果表明:75%C_2H_5OH 30s+0.1%HgCl_2 6min为八宝景天茎段消毒的最佳方法;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最佳培养基;MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L为继代增殖培养的最佳培养基;不定芽诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L或1/2MS+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%。     

蜻蜓凤梨快速繁殖的研究

通过对蜻蜓凤梨快速繁殖进行研究,结果表明:用蜻蜓凤梨试管苗茎的中部进行诱导侧芽效果比较好,培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;增殖阶段适宜培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L或MS 6-BA4.0mg/L IBA1.0mg/L NAA1.0mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;生根阶段适宜培养基为1/2MS NAA0.5mg/L 活性碳0.1%.蜻蜓凤梨组培苗容易移栽成活,移栽成活率可达95%以上.     

香果树的快速繁殖

以香果树芽外植体在MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L培养基上进行丛芽诱导和继代培养.丛芽分化率达100%,年繁殖系数为6.3×10~5.将单个芽转移到1/2MS无机盐+MS有机物+IBA 0.5mg/L培养基上,生根率为83.1%,移栽成活率达到90%.     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

沙枣叶片愈伤组织诱导研究初报

以沙枣叶片作为外植体,以MS为基本培养基,用两种不同浓度激素的组合,筛选5组培养基进行继代愈伤组织及增殖诱导.结果表明,沙枣叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5),诱导率达86.67%;以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5)作为愈伤组织增殖培养较理想.     

南天竹的离体培养研究

以南天竹茎段为材料,对不同消毒剂、消毒时间和内生菌抑制剂的消毒效果及诱导、增殖和生根培养基进行研究.结果表明:不同消毒剂消毒效果最佳时间为10min;消毒效果排序1g/L HgCl250mL/L NaClO220mL/L NaClO280mL/L NaClO2;适宜的诱导培养基为MS(murashige skoog培养基)+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+90mg/L青霉素+1 600mg/L Vc,诱导率达66.67%;MS+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA是最适增殖配方,株高1.67cm,增殖系数2.63;最佳壮苗培养基为MS+0.01mg/L NAA+0.3mg/L 6-BA,株高2.17cm,增殖系数6.27;在微量元素减半的1/2MS+0.2mg/L NAA+0.2mg/L IBA+4g/L活性碳+30g/L蔗糖的液体培养基上生根率可达76.67%.     

叠鞘石斛组织培养及植株再生体系优化

以叠鞘石斛成熟种子为材料，使用IBA、6-BA和NAA共3种生长调节剂与香蕉泥和椰子汁有机物等组合，采用3因素3水平正交设计及单因素设计进行组织培养研究.结果显示，最佳叠鞘石斛原球茎培养基为MS+50 g/L椰子汁+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂，40 d增殖系数为6.75,分化率为84.38%;最佳叠鞘石斛壮苗生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂.通过该技术，可以在较短时间获得大批量优质叠鞘石斛种苗，为大规模叠鞘石斛药材生产提供基础.     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

大樱桃优质矮化砧木吉塞拉批量组培快繁系统优化的研究

为应用组培技术批量生产优质苗木,以大樱桃优质矮化砧木吉塞拉作为试材,在组培中采用对比试验对如何获得较好的无菌外植体进行了研究.采用正交试验对分化配方和生根配方进行选择,采用多因素对比试验对室外驯化条件进行研究.研究结果表明:外植体材料应在温室自然光条件下培养,以0.1%升汞 0.1%升汞的灭菌方法较为适用;通过正交实验并于生产中验证得到的较佳分化配方为MS IBA 0.3 mg/L 6-BA 0.8mg/L 白糖30 g/L 琼脂7 g/L,生根配方为MS IAA 0.3 mg/L IBA 0.3 mg/L NAA0.3 mg/L 白糖20 g/L 琼脂6 g/L;采用温室控制光强并保持瓶苗密封处理的生根条件可以提高苗木的驯化成活率.将研究结果应用于生产达到了年批量生产30万棵吉塞拉苗木.     

濒危药材红芽大戟组培快繁影响因素研究

【目的】研究濒危药材红芽大戟(Knoxia corym bosa Willd)最适宜的组培快繁方法,为规模化生产红芽大戟提供依据。【方法】选取红芽大戟不同组织器官为外植体,采用不同配方的培养基培养,研究影响外植体诱导分化、增殖和生根的因素,筛选获得最佳培养基。【结果】外植体采用茎尖优于叶轴、叶片,茎尖接种于MS+1.5mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,萌芽率为100%,MS+3.0mg/L 6-BA+0.30mg/L NAA最适用于继代增殖培养,1/2MS+2.0mg/L IBA+0.2mg/L NAA最合适生根培养。【结论】选取合适的外植体,采用适宜的培养条件和培养基,可以有效地进行红芽大戟的组培快繁。     

福建山樱花不定芽诱导和植株再生规模化繁殖试验

取长约4 cm的3年生福建山樱花中选树的春梢为外植体,接种于添加6-BA和IBA的MS培养基中,诱导产生不定芽。结果表明:当培养基为1/4 MS时,能有效地防止外植体的褐化死亡;添加1.0 mg/L 6-BA和0.01 mg/L IBA的培养基上,外植体能快速生长,且无玻璃化苗发生。增殖阶段以添加1.0 mg/L 6-BA 0.3 mg/L GA3的MS培养基最好,1个周期的增殖率可达600%。当外殖体高约4 cm时,即转入1/2MS 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L IBA培养基进行生根诱导培养,25 d后即可陆续生根并长成完整植株,35 d生根率可达92.1%。以1/3份珍珠岩 2/3份泥炭混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达94%。该试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求,其技术措施可直接应用于规模化生产。     

杂交兰的组织培养与快速繁殖技术研究

以杂交兰的腋芽为材料,研究了杂交兰的组织培养和快速繁殖技术.结果表明：从诱导、增殖、分化到生根可以用同一种培养基,即MS＋6-BA1mg/L＋IBA0.5mg/L＋活性炭5g/L＋蔗糖30g/L＋琼脂8g/L（pH5.8）,IBA对杂交兰的增殖和分化影响较大.     

兰州百合的组织培养

以兰州百合鳞片作为外植体进行组织培养,分别对其进行芽诱导、增殖、生根培养,得到了兰州百合鳞片组织培养的最佳培养基配方：（1）芽诱导培养基：MS＋BA0．6mg／L＋NAA0．2mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8;（2）增殖培养基：Ms＋BA0．8mg／L＋NAA0．05mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8;（3）生根培养基：MS＋BA0．05mg／L＋NAA0．8mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8．观察与分析结果表明,外植体在前两种培养基上的繁殖速率较前人快约15d,第3种培养基与前人的相当,比其快2d．     

俄罗斯蓝靛果忍冬优良无性系微繁技术

以俄罗斯引进的蓝靛果忍冬优良无性系Berel(L.caerulea var.kamtschatika X altaica)、Rus1(L.caerulea var.kamtschatika)和Rus2(L.caerulea var.regeliana X altaica)为研究对象,以其健壮枝条上的茎尖及茎段为外植体,进行组织培养研究,建立适合俄罗斯蓝靛果忍冬外植体生长、扩繁、生根的基本培养程序.结果表明:俄罗斯蓝靛果忍冬的3个优良无性系以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA为初代培养基效果均较好,但继代增殖培养基和生根培养基差异较大.其中,适合Berel增殖的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数达到5.6,生根培养基为WPM+1.5 mg/L IBA;适合Rus1和Rus2继代增殖的培养基为WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数达到6.8和7.6,生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA;适合俄罗斯蓝靛果忍冬试管苗移栽的基质为草炭土+河沙(体积比1∶1)的混合基质.     

金花茶杂交种子无菌苗的组培快繁研究

【目的】建立金花茶杂交种质组培快繁技术体系,为优质杂交种质的保存和快繁提供技术支撑。【方法】以凹脉金花茶♀ב烈香'茶花♂(S1)、‘黄樽'薄叶金花茶♀×防城金花茶♂(S2)、防城金花茶♀×越南抱茎茶♂(S3)等3组杂交组合种子的无菌播种苗为材料,研究不同外植体诱导率的差异,杂交组合、基本培养基、生长调节剂种类浓度组合对芽苗增殖和生根的影响,蔗糖浓度对生根率的影响,及不同基质移栽成活率的差异等组培关键技术。【结果】S1、S2、S3等3组杂交组合无菌苗的顶芽平均诱导率为12%,茎段平均诱导率最高,达100%。杂交组合、基本培养基和6-BA对增殖倍数影响极显著,S1、S2、S3杂交组合在培养基B5+6-BA 2.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L上培养40 d,增殖倍数最高,分别为7.4、6.6、7.5倍,芽苗长势好; 在MS培养基上芽苗长势不佳,叶片脱落。杂交组合、生根剂种类浓度组合及蔗糖浓度对生根率影响极显著,S1、S2、S3杂交组合在培养基1/2 B5+ABT 1.0 mg/L+5 g/L蔗糖上,生根率最高,分别为92%、85%、89%。3组杂交组合在V_黄心土:V_蛭石=3:1基质上的平均移栽成活率最高,达94%。【结论】无菌播种苗的茎段是金花茶杂交种质离体培养最理想的外植体,最佳增殖和生根培养基分别为B5+6-BA 2.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L和1/2 B5+ABT 1.0 mg/L+蔗糖5 g/L,最佳移栽基质为V_黄心土:V_蛭石=3:1,营建组培快繁技术体系是金花茶杂交种质保存和植株高效再生的理想途径。     

兰州百合组织培养及快速繁殖技术研究

【目的】建立适于兰州百合(Lilium davidii var.Unicolor(Hoog)Cotton)的快速无性繁殖技术,为食用兰州百合试管苗规模化生产提供技术参考。【方法】以球根鳞片为外植体,采用不同消毒方法、取材部位、接种方法和植物生长调节剂及其浓度配比,筛选适合的诱导、增殖和生根培养基。【结果】球根鳞片先用75%酒精处理后,用10%的次氯酸钠与0.13%的升汞等体积混合液消毒,再用0.13%升汞消毒为最佳消毒方式;接种选择与鳞茎盘相连的下部鳞片为初代培养的最佳外植体;外植体在MS+6-BA 1.5mg/L+GA30.8mg/L+2,4-D 1.0mg/L的培养基中,能诱导出较多长势健壮的不定芽;在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L的培养基中,增殖倍数达1.25;而生根培养以MS+NAA 0.6mg/L+IBA 0.1mg/L为最佳,生根苗生长良好,生根率达100%。【结论】获得适合兰州百合快速繁殖的培养基配方,建立了兰州百合的快速繁殖技术。