几种真菌的诱孢实验初报

在常规人工培养条件下产生繁殖体及繁殖孢子的球壳孢目的真菌,通过预培养后扫刷营养体,经过光诱导能产生繁殖体及繁殖孢子;在常规人工培养条件下不产生繁殖体及繁殖孢子的从梗孢目的真菌,通过预培养后扫刷营养体,在常规培养条件下也能产生繁殖体及繁殖孢子.     

北冬虫夏草人工栽培技术研究及保健品研制

用北冬虫夏草菌人工接种固体培养基与柞蚕、蛹。模拟自然生态环境培养 ,长出同野生北冬虫夏草形态一致的子实体。用人工栽培的北冬虫夏草研制出系列保健品     

北冬虫夏草人工栽培技术研究及保健品研制

用北冬虫夏草菌人工接种固体培养基与柞蚕、蛹。模拟自然生态环境培养，长出同野生北冬虫夏草形态一致的子实体。用人工栽培的北冬虫夏草研制出系列保健品。     

南海红树林内源真菌#2240的四个格链孢酚类衍生物次级代谢产物研究

通过人工发酵培养,利用层析技术,首次从南海红树林内源真菌#2240的培养液中分离得到4个格链孢酚类衍生物次级代谢产物,它们分别是：4-甲氧基-10-乙酸格链孢酚酯（化合物1）、格链孢酚（化合物2）、4-甲氧基格链孢酚（化合物3）、4,10-二甲氧基格链孢酚（化合物4）.其结构通过谱图分析（包括1H、13C NMR,DEPT,HMQC,HMBC,HREIMS,UV及IR等）和相关文献得以确定.初步药理实验表明,化合物2和3对KB和KBv200癌细胞具有较强活性,IC50值分别为3.17、3.12μg/mL和4.82、4.94μg/mL,化合物1和4对上述两种癌细胞的抑制活性较弱,IC50值均超过50μg/mL.并且从生源途径角度也初步探索了上述四个化合物之间的相互关系.     

培育蝉花改善小鼠睡眠功能的试验研究

观察不同剂量的人工培养蝉花子实体及菌丝体对小鼠睡眠的改善作用,健康昆明小鼠,随机分成8组,每组10只.每天经口灌胃给予不同剂量的人工培养蝉花子实体及蝉花菌丝体,连续给予受试物30 d后进行直接睡眠作用试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏实验测定小鼠直接睡眠时间、戊巴比妥钠诱导的睡眠时间及阈下剂量的睡眠发生率、巴比妥钠诱导的睡眠潜伏时间.结果表明,与空白对照组比较人工培养蝉花子实体300 mg/kg、900mg/kg及菌丝体900 mg/kg对阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠一定的促进作用(P0.05),且没有明显的剂量依赖关系;与空白对照比较,300 mg/kg人工培养蝉花子实体和900 mg/kg蝉花菌丝体对戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间有明显的延长作用,但不同剂量的两种受试药物对巴比妥钠睡眠潜伏期基本无影响,且均无直接至眠作用.人工培养蝉花子实体和蝉花菌丝体对小鼠睡眠有一定的改善作用.     

不同根肿病抗性油菜根系分泌物的代谢组研究

为了探究寄主根系分泌物中对根肿菌休眠孢子萌发具有重要作用的代谢物，本研究首先测试了甘蓝型油菜不同根肿病抗性材料的根系分泌物对休眠孢子萌发的诱导能力，发现易感材料根系分泌物处理组的萌发率显著高于抗性材料处理组.进一步采用非靶向液相色谱-质谱联用代谢物分析法检测了抗病材料和易感材料的根系分泌物，在负离子(ESI-)模式下鉴定出次级代谢产物1079个，在正离子(ESI+)模式下鉴定出次级代谢产物1257个，其中差异代谢物分别为662和722个.选取部分差异较大的代谢物进行验证，结果表明，胸腺嘧啶，2′-脱氧尿苷，L-异亮氨酸，葫芦巴碱，磷酸吡哆醛，香豆素，D-来苏糖和穗花杉双黄酮等对休眠孢子萌发具有显著促进作用，继而影响根肿病的发生.     

粉被马利娅霉(Marianaea pruinosa)对苏云金杆菌抗紫外线辐射的保护效应

本文首次报道了粉被虫草的无性型粉被马利娅霉(Marianaea pruinosa Liang)对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis subsp. galleria Hermpel)的抗紫外辐射的保护作用,建立了粉被马利娅霉抗紫外辐射物质的苏云金杆菌检测法。用粉被马利娅霉的培养液,菌丝体浸提液及孢梗束浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后,活菌数依次比对照提高26.3％,138.6％和187.8％,揭示了抗辐射物质的含量是梗孢束高,菌丝体次之。培养液最低的趋势,主要为胞内产物。不同来源的粉被马利娅霉菌株抗紫外辐射物质的含量是有差异的。     

蛹草拟青霉有机代谢产物的合成特点及生理作用

研究蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris)液体发酵液有机代谢产物的合成特点和固体栽培基质有机代谢产物对蛹草拟青霉菌丝营养生长的影响.结果表明蛹草拟青霉液体发酵液有机代谢产物总量与其菌丝体生物量呈显著负相关.将蛹草拟青霉固体栽培采收后,其培养基质的乙酸乙酯萃取物对其菌丝生长有显著的抑制作用,并能促进菌丝体转色,使其由营养生长阶段向生殖生长阶段的转变时间显著缩短.     

虫草属多元起源的分子生物学证据

测定了虫草属 (Cordyceps)代表种及其相关无性型菌 (anamorphicstate )核糖体rDNAITS区序列 ,并从国际分子生物学数据库中调取相关序列 ,以Phylip35分析软件构建序列距离矩阵和分子系统发育树图 ,结果表明 :虫草属各个种之间ITS区序列差别比较大 ,不能形成一个单系的类群 .冬虫夏草 ,古尼虫草 ,蛹虫草 ,大团囊虫草在系统发育上分别与丝孢纲(Hyphomycetes) ,束梗孢目 (Stilbelaes)的中国被毛孢 ,丝孢目 (Hyphomycetales)的黄绿绿僵菌 ,丝孢目 (Hyphomycetales)的球孢白僵菌 ,担子菌纲的Cyphomyrmexminutus非常接近 ,在树图上分别处于相对独立的分支 ;说明形态学上划分的虫草属并非一自然发生的类群 ,也说明了虫生真菌形态与基因水平进化的不一致性 .     

环链棒束孢生长曲线的测定

明确环链棒束孢的生长曲线，为环链棒束孢代谢物的采集、孢子规模化生产奠定基础。采用重量法、显微直接计数法、比浊法3种方法对环链棒束孢2018 BY-1菌株的生长规律进行研究。结果表明，环链棒束孢的生长规律为0～3 d为迟缓期，3～5 d为对数期，5～6 d为稳定期，6 d以后为衰亡期；最大吸收波长为410 nm,此时菌丝干重、OD410值、孢子数均达到最大值，分别是0.22±0.00 g、0.64±0.03、4.14×10⁸个/mL;对数期的OD值和孢子数存在线性关系；稀释培养基的浓度可以降低培养基中色素对菌液的影响。     

光轴肿足蕨配子体发育及其系统学意义

采用改良Knop′s液体培养基对光轴肿足蕨(Hypodematium hirsutum(D.Don)Ching)的孢子进行培养,观察其孢子萌发和配子体发育过程。结果表明,成熟的孢子深褐色,不透明,两面体型,单裂缝,极面观椭圆形,赤道面观为豆形,周壁褶皱。接种18天后孢子开始萌发,孢子萌发为书带蕨型,播种25天左右发育为3～5个细胞的丝状体,35天左右发育为片状体,50天左右形成幼原叶体,原叶体发育为三叉蕨型。幼原叶体不对称,成熟的原叶体呈对称心形。原叶体边缘及背腹面都具单细胞乳头状的毛状体。播种65天左右开始出现性器官,精子器近圆球形,由3层细胞构成,成熟颈卵器颈部由4～5层细胞构成。光轴肿足蕨的配子体发育特征表现出较为进化的特点。     

红树蚬与歪红树蚬形态差异分析

【目的】从形态上区分红树蚬(Polymesoda erosa)和歪红树蚬(Polymesoda expansa)。【方法】运用多变量形态度量学分析方法,采用14项生物学形态性状指标比较广西廉州湾草头村红树林的红树蚬与歪红树蚬的差异。【结果】方差分析结果显示,1个比例性状达到差异显著水平(P0.05),12个比例性状达到差异极显著水平(P0.01)。主成分分析构建了4个主成分,第1主成分贡献率为30.70%,第2主成分贡献率为17.76%,第3主成分贡献率为10.11%,第4主成分贡献率为7.80%,累计贡献率为66.37%。逐步判别分析建立判别函数,其判别准确率p1为81.7%~89.0%,p2为81.7%~87.5%,综合判别率为86.0%。【结论】壳高、壳宽、韧带长、韧带宽等性状决定红树蚬和歪红树蚬两个种间的形态差异,判别方程可以有效将上述种群区分开来。     

褐牙鲆幼鱼GH、IGF-I、STC、RNA/DNA和糖原含量对盐度操作的响应

对不同盐度胁迫10d后盐度调节至19后恢复期间褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼血浆生长激素(GH)、类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-I)、司登尼亚钙素(STC)及肌肉和肝脏中RNA/DNA比值和糖原含量变化进行实验监测.结果表明:血浆GH质量浓度在整个实验期间未出现明显差异.IGF-I质量浓度在高盐处理始终较低,只在实验结束时恢复至对照处理水平,而低盐胁迫处理的IGF-I质量浓度则在恢复期间明显高于对照处理.胁迫期间低盐处理STC质量浓度显著低于对照处理和高盐处理,但是在恢复期间恢复至对照组水平;而高盐胁迫处理则下降至显著低于其余两个处理水平.除在胁迫结束时低盐处理的肝脏RNA/DNA高于其余两个处理外,在其他时间肌肉和肝脏的RNA/DNA在不同处理间不存在显著差异.肝脏和肌肉糖原含量在所有时间上不同处理间均不存在显著差异.     

Illumina高通量测序分析百合内生真菌群落多样性

百合具有较高的药用食用价值,研究发现它的许多内生菌代谢产物有进一步开发利用的潜能,深入了解百合内生真菌群落结构与多样性,有助于发现新菌种以及具有特定功能的内生菌代谢产物。以ITS区的rDNA为靶标序列,采用Illumina MiSeq测序技术分别对百合叶片(bhy417)、百合茎秆(bhj417)和百合地下鳞茎(bhl417)三个样品的内生真菌群落结构组成和多样性进行测定分析。经过分析有以下结果:三个样品共得到用于后续样品分析的436394条有效序列和122205709个碱基;样品bhy417的内生真菌群落丰富度最大;三个样品之间的内生真菌群落多样性差异不显著、群落结构不同;球腔菌属Mycosphaerella、外囊菌属Taphrina、炭疽菌属Colletotrichum、散斑壳属Lophodermium、壳二孢属Ascochyta、Zymoseptoria属、Catenulostroma属、Phaeophleospora属、Endoconidiophora属、Hormonema属、乌氏霉属Uwebraunia、Capnobotrylla属、丛赤壳属Neonectria、长毛盘菌属Trichophaea等在样品中丰度较高。FUNGuild功能预测结果显示,百合内生真菌包括以下功能菌群:植物病原菌、动物病原菌、腐生菌、未定义腐生菌、内生菌、木材腐生菌、地衣寄生菌等。研究结果表明百合有丰富的内生真菌定殖,其中的植物病原菌以及一些目前还未鉴定出来的菌将可能对百合生防菌以及具特定功能代谢产物的研发提供帮助。     

基因重组型枯草芽孢杆菌芽孢表面展示技术与应用

枯草芽孢杆菌是一种好氧型革兰氏阳性益生菌,在营养匮乏的环境下,可形成具有强抗逆性的芽孢。其芽孢独特的结构和生理功能使得芽孢表面展示技术相较于其他表面展示技术具有多种优势,构建的重组芽孢不但易纯化、回收率高,而且安全性好。近年来,枯草芽孢杆菌芽孢表面展示技术得到迅猛发展,已成功利用CotB、CotC、CotG、CotZ、CotA、OxdD、CotE、CotZ、CgeA等多种锚定蛋白将外源蛋白或多肽展示在芽孢表面,并应用于工业化酶、口服疫苗和药物、大分子量多聚体蛋白的生产以及环境污染的生物治理等领域。本文首先介绍了芽孢展示系统整合策略,并重点阐述了基因重组型枯草芽孢杆菌芽孢展示技术中涉及的锚定蛋白以及该技术在各领域的应用与展望。     

织锦巴非蛤稚贝与饵料微藻的脂质组成及分析

为了揭示织锦巴非蛤(Paphia textile)稚贝与3种饵料微藻的脂质组成特征及其相关性,本研究用氯仿-甲醇提取织锦巴非蛤稚贝和饵料微藻中的脂质,采用液液萃取技术分离,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对脂质进行分类和鉴定,采用色谱峰面积归一化法确定各组成成分的相对含量。结果显示,从5个样品中共鉴定出7类化合物,鉴定出的化合物占总峰面积的97%以上,主要为烷烃类化合物和脂肪酸。聚类分析结果显示,5个样品的长链脂肪酸可以聚类成2组,第一组包括织锦巴非蛤(湿、干)、球等鞭金藻(Isochrysis galbana)和牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri),第二组为青岛大扁藻(Tetrasemis helgolandica)。5个样品长链脂肪酸的主成分分析显示,主要分为主成分1(60.8%)和主成分2(23.0%),织锦巴非蛤、青岛大扁藻与主成分1显著相关,棕榈酸(C16:0)、亚麻酸(C18:3n3)、反油酸(C18:1n9t)、亚油酸(C18:2n6)、硬脂酸(C18:0)可作为其特征脂肪酸成分。研究表明,虽然织锦巴非蛤的长链脂肪酸和球等鞭金藻、牟氏角毛藻更相似,...     

条斑紫菜与坛紫菜挥发性风味的电子鼻分析

【目的】利用电子鼻技术区分条斑紫菜(Pyropia yezoensis)与坛紫菜(Pyropia haitanensis)的原藻及其制品。【方法】应用18个金属氧化型气体传感器并通过风味雷达图和主成分分析法对2种紫菜的挥发性风味进行轮廓性分析。【结果】两种方法分析原藻及其制品均显示条斑紫菜和坛紫菜的气味轮廓与敏感物质类型存在差异;相比紫菜原藻,各制品间的气味轮廓较为一致。【结论】电子鼻技术可以区分条斑紫菜与坛紫菜挥发性风味,原藻及其制品均有明显差异。加工过程使得产品挥发性风味趋于统一。     

北部湾玉足海参和花刺参骨片结构与营养成分研究

为明确玉足海参（Holothuria leucospilota）和花刺参（Stichopus variegatus）的骨片结构及营养成分,本研究利用扫描电子显微镜观察玉足海参和花刺参的骨片,采用国家标准测定其营养成分。结果表明,玉足海参的骨片类型为桌形体、扣形体、穿孔板体,花刺参的骨片类型为桌形体、花纹样体、C形体。营养测定结果显示,玉足海参与花刺参含量最多的成分是水,分别为93.83%和96.63%,差异显著（P<0.05）。干物质中,粗蛋白质含量分别为52.90%、53.10%,灰分含量分别为36.80%、35.47%,均不存在显著性差异（P>0.05）;粗脂肪含量分别为1.15%、0.89%,存在显著性差异（P<0.05）;盐分含量分别为15.32%、23.16%,还原糖含量分别为0.63%、0.76%,总糖含量分别为1.74%、1.14%,存在极显著性差异（P<0.01）。本研究的结果丰富了玉足海参和花刺参基础生物学资料,同时营养分析结果表明2种海参均为高蛋白低脂的优质食品,有很高的经济价值,可以对其进一步开发利用。     

UPLC-QQQ-MS/MS法用于粉防己根双苄基异喹啉生物碱合成途径中12种化合物的定量检测

超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)法用于粉防己(Stephania tetrandra S.Moore)中的有机酸和生物碱类化合物的同时定性、定量检测具有重要的研究意义，可为汉防己甲素等双苄基异喹啉类生物碱的代谢合成机理解析提供数据参考。本研究采用Poroshell 120 CS-C18色谱柱进行分离，以含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱，在喷射流技术离子源(AJS-ESI)，正、负离子多反应监测(MRM)模式下进行检测，通过一级和二级质谱数据对不同采集批次的粉防己根部代谢物进行定性和定量分析。结果显示：12种被测化合物在线性范围内都呈现出良好的线性关系，相关系数均大于0.99；粉防己根部中12种被测化合物的含量存在显著差异，同一化合物的含量在不同的采集月份也有着明显的差异；L-酪氨酸、汉防己甲素和汉防己乙素在粉防己根部的含量相对较高。本研究实现了粉防己根部中12种被测化合物的同时定性和精确定量分析。     

披针新月蕨的配子体发育及卵发生

采用显微观察技术对披针新月蕨（Pronephrium penangianum）的配子体发育和卵发生进行了研究.结果表明：披针新月蕨孢子褐色，二面型，接种后约12 d，孢子萌发，经丝状体和片状体阶段，发育成原叶体，孢子萌发是书带蕨型（Vittaria-type），原叶体发育是槲蕨型（Drynaria-type），成熟原叶体是心形，接种46 d后产生颈卵器和精子器.披针新月蕨的颈卵器起源于原叶体生长点下方的原始细胞.原始细胞经过2次不等分裂，形成3个细胞，分别是顶细胞、初生细胞和基细胞.其中，初生细胞不等分裂，形成中央细胞和颈沟细胞.随后，中央细胞不等分裂形成腹沟细胞和卵细胞.随着卵细胞成熟，颈沟细胞和腹沟细胞逐渐退化，但腹沟细胞通过孔区与卵细胞相连.卵细胞成熟后，细胞上表面具有明显的卵膜，中央具有受精孔.本研究对于完善蕨类植物生殖生物学和探讨蕨类植物的演化具有重要意义.