精氨酸脱羧酶活性与冬小麦抗旱性关系的研究初报

多胺(Polyamine)是生物体代谢过程中产生的具有生物活性的低分子量脂肪族含氮碱。常见的有腐胺、尸胺、亚精胺和精胺等。近年来发现多胺是一类重要的代谢调节物质,直接或间接地影响着细胞的生命活动[1、3]。特别是当任何组织的生长速率有显著改变时,多胺的含量也发生相应的改变[2、3、4]。植物体内的腐胺、亚精胺主要是由精氨酸脱羧进一步转化而来的[1、2、3、5、8]。精氨酸脱羧酶(ADC,EC.4.1.1.19)是多胺生物合成的限速酶,理论上ADC活性和     

中肋骨条藻体内及培养液中的游离态多胺

采用柱前衍生高效液相色谱法,监测实验室培养条件下中肋骨条藻藻体及培养液中游离态腐胺、精胺和亚精胺含量的变化,发现中肋骨条藻体内的游离态多胺主要为腐胺和亚精胺及少量的精胺。细胞中三者的含量在培养过程中一直增加,尤其是进入消亡期的腐胺和亚精胺含量骤增,这可能与胁迫条件下控制多胺合成的基因超表达有关。腐胺与亚精胺含量的比值与藻密度呈显著正相关(R2=0.775 1,p=0.049),可以反应细胞生长周期的变化。精胺与亚精胺含量比值的变化早于藻密度,反应出多胺在细胞生长过程中的调节作用。培养液中的游离态多胺主要为腐胺,其次是亚精胺和精胺。中肋骨条藻可以吸收水体的腐胺和精胺。指数增长期内,藻细胞代谢旺盛会向环境中释放腐胺,因进入消亡期藻体大量死亡,降解释放使水体多胺含量升高。     

La3+对枸杞体细胞胚发生及其内源多胺的影响

多胺是普遍存在于生物体内的一类低分子脂肪含氮物 ,是进化中高度保守的有机多聚阳离子[1 ] ,在细胞内主要有腐胺 ( Put)、精胺 ( Spm)、亚精胺 ( Spd)和尸胺 ( Cad)等 .它可与带负电荷的核酸、酶、蛋白质以及细胞功能团相结合而参与 DNA,RNA和蛋白质合成的调节 [1 ] .在植物体细胞胚发生过程中 ,多胺水平及其合成酶活性与体细胞胚发生发育密切相关 .Put和 Spm水平明显高于非胚性细胞[2 ,3] ,而且随着胚性细胞的发育 ,从原胚、球形胚、心形胚到鱼雷胚 ,Spm和 Spd水平逐渐升高 .其中心形胚以 Put为主 ,鱼雷胚则富含 Spd[4] .当用多胺…     

硫化氢对白桦悬浮细胞中多胺和次生代谢物积累的影响

【目的】分析硫化氢(H₂S)对白桦悬浮细胞中多胺含量和次生代谢物积累的影响。【方法】将不同浓度的H₂S供体硫氢化钠(NaHS)添加到白桦悬浮培养体系中,采用高效液相色谱法和比色法分析不同形态的多胺含量、多胺合成酶和分解酶活性以及黄酮、多酚和三萜等次生代谢物含量。【结果】 NaHS处理后白桦悬浮细胞中总多胺含量呈先增加后降低趋势,其中1 mmol/L NaHS处理24 h时腐胺和亚精胺总含量达最高值,分别比对照增加了30.51%和12.37%; 除高氯酸不溶性结合态亚精胺外,NaHS处理后白桦悬浮细胞中游离态、高氯酸可溶性结合态和不溶性结合态腐胺和亚精胺含量均有不同程度的增加; 同样,NaHS处理后多胺合成酶(ADC)和多胺分解酶(PAO)活性基本呈增加趋势,增加幅度分别为15.91%～26.33%和137.50%～250.12%; 1 mmol/L NaHS与不同浓度的腐胺、亚精胺和精胺分别处理悬浮细胞,不同程度地提高了白桦悬浮细胞中多酚、黄酮和三萜含量。其中,5 mmol/L 腐胺与NaHS共同处理后白桦悬浮细胞中多酚、黄酮和三萜含量达最大值,分别比NaHS单独处理增加了26.69%、13.22%和 4.55%。【结论】H₂S处理提高了白桦悬浮细胞中多胺和次生代谢物含量,H₂S与多胺共同处理可进一步促进次生代谢物的累积。     

国产葡萄酒中生物胺组成与含量分析

通过对国产葡萄酒产品中生物胺组成和含量的检测分析,了解国产葡萄酒中生物胺含量现状。采用GB/T 5009.208—2008方法,对国内市售的250个国产葡萄酒样品中8种生物胺(色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺)含量进行检测。结果显示,国产葡萄酒样品中8种生物胺含量范围分别为色胺0~32.78mg/L,苯乙胺0~48.20mg/L,腐胺0~46.60mg/L,尸胺0~9.38mg/L,组胺0~14.37mg/L,酪胺0~14.60mg/L,精胺0~12.73mg/L,亚精胺0~0.50mg/L；葡萄酒样品中检出率最高和最低的生物胺分别为腐胺和精胺,检出率分别为88.4%和50.0%,组胺检出率为52.8%；98.8%的葡萄酒样品中组胺含量低于10mg/L,98.0%的葡萄酒样品中酪胺含量低于10mg/L。同其他种类葡萄酒相比,干红葡萄酒样品中生物胺含量相对较高,但与欧洲葡萄酒传统酿造国家的同类产品含量水平一致。国产葡萄酒中生物胺含量水平符合食品安全要求,具有较好的饮用安全性。     

野蔷薇内源多胺的HPLC测定方法及其组织变化规律

以野蔷薇为材料，提取内源多胺，用高效液相色谱法HPLC进行腐胺、亚精胺、精胺含量测定.结果表明，多胺提取过程中，样品用量0.2 g、冰浴浸提液300μL、苯甲酰化反应37℃,提取效率最高.HPLC检测参数：流动相为V（甲醇）∶V（水）(60∶40),进样量15μL,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长254 nm,保留时间15 min时，3种内源多胺可完全分离并定量测定，相关系数均大于0.99,测定加标回收率为87.17%～103.64%,表明该方法可靠.在野蔷薇体细胞胚胎发生过程中，叶片培养3 h,内源多胺无明显变化，培养3 d后，多胺总量和腐胺含量显著增加，5 d后，亚精胺和精胺含量显著增加，亚精胺含量最高，精胺其次，腐胺含量极显著下降，同时多胺总量下降，说明在野蔷薇体细胞胚胎发生的启动阶段，腐胺向下游产物亚精胺和精胺发生了转化；在培养25 d的愈伤组织中，多胺总量显著下降，腐胺和精胺含量很低，说明在野蔷薇愈伤组织增殖阶段，可能精胺作用不大.该试验建立了内源多胺的2 mL提取体系，该方法降低了样品材料的用量，多胺提取过程更简便高效，并初步探索了野蔷薇...     

多胺代谢对石竹试管苗成花中内源激素含量的影响

以无根石竹试管苗为试材，通过外施多胺及多胺生物合成抑制剂调控石竹(Dianthus chinensis L.)试管苗成花，研究成花过程中石竹内源激素含量的变化。结果表明，外源腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)及多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)、二氟甲基精氨酸(DFMA)、环己胺硫酸盐(CHAS)能调控石竹试管苗成花率；Spm、Spd分别将成花率由38.3％提高至48．3％和60．0％，也提高了内源玉米素核苷类(ZRs)、异戊烯腺嘌呤类(iPAs)、吲哚-3-乙酸(IAA)水平；DFMO、CHAS则完全抑制成花，显降低内源IAA水平。因此，内源激素与多胺的代谢水平共同控制石竹试管苗成花。     

海洋围隔实验中的游离态多胺

在江苏南通附近海域进行围隔实验,运用高效液相色谱法测定围隔海水中游离态多胺的浓度。结果表明,围隔实验组中精胺的平均浓度最高,为17.13 nmol/L,亚精胺的平均浓度最低,为2.08 nmol/L;高盐度条件可提升环境中多胺浓度,对腐胺浓度影响最大;一次性添加硝酸盐氮(NO3—N)和磷酸盐磷(PO4—P)对环境中多胺的浓度水平有促进作用,其中对精胺和亚精胺的浓度影响最明显。一次性添加氨氮(NH4—N)和PO4—P与连续性添加相比,两者都可使环境中多胺浓度升高,与只添加NH4—N的情况相比,添加NO3—N和NH4—N更有利于提高环境中的亚精胺浓度水平。     

旱金莲胚胎发育中的内源多胺

旱金莲胚胎发育过程中，内源多胺以亚精胺含量最高，而且在整个胚胎发育过程中相对稳定，腐胺含量最低。腐胺、精胺和亚精胺的含量在幼胚分化期最高，幼胚分化完成后腐胺和精胺含量迅速下降，直至分化后期才稳定下来。这表明腐胺和精胺与旱金莲胚胎发育和分化相关。     

黄酒中降生物胺糖多孢菌的筛选及评价

为获得可降低黄酒中生物胺含量的菌株,研究对黄酒发酵过程中的糖多孢菌进行了分离鉴定,并对其生物胺降解能力进行了探究。研究从黄酒麦曲和发酵醪中共分离鉴定得37株糖多孢菌,以菌株产生物胺和降生物胺能力为评价指标,筛选获得2株低产生物胺且具有较强降生物胺能力的糖多孢菌(F1902和F2014)。经对菌株的分子生物学、生理生化指标进行鉴定,2株菌分别为披发糖多孢菌(Saccharopolyspora hirsuta)和玫瑰糖多孢菌(Saccharopolyspora rosea)。将分离得到的2株糖多孢菌在含有生物胺的培养基中于37℃发酵5 d,发现,两株糖多孢菌对总生物胺降解率分别高达76.41%±0.82%和74.62%±0.84%。进一步对2株菌在不同环境条件下的降生物胺能力进行研究,结果表明,温度、pH值和乙醇浓度均会影响糖多孢菌的生长及降生物胺能力。其中,S.hirsuta F1902和S.rosea F2014降解生物胺的较适温度为30℃,较适pH值为7,在添加体积分数7%乙醇的环境下仍能发挥一定的生物胺降解能力。希望研究为利用糖多孢菌控制黄酒酿造过程中的生物胺含量和以黄酒为生物资源的开发利用提供一定的理论参考。     

黄瓜去根苗离体培养条件下多胺对雌花形成的影响

研究了外源激素KT(激动素)和IAA(吲噪乙酸)对离体黄瓜去根苗内源多胺含量及其雌花形成的影响.在添加KT(3.0 mg/L) IAA(0.01mg/L)的MS培养基上培养的黄瓜去根苗其雌花诱导率占28%.对照组的为0,雌花形成过程中去根苗内源Spd(亚精胺)含量、Spd/Put(亚精胺/腐胺)明显高于对照组,表明高水平的内源Spd和Spd/Put有利于去根苗的雌花形成.添加KT(3.0ms/L) IAA(0.01 mg/L)处理和对照组的Spm(精胺)含量的变化趋势基本相同,雌花诱导率却差别明显.表明内源Spin对去根苗的雌花形成无直接的影响.KT(3.0 mg/L) IAA(0.01 mg/L)处理的DAP(1,3-二氨基丙烷)含量明显低于对照组,说明外源激素可通过降低多胺的分解代谢水平来促进去根苗的雌花形成,Cad(尸胺)含量早于对照组出现并高于对照组,说明Cad不是雌花形成过程的影响因素,而是该过程中的一种生理代谢物质.     

石蒜花期前后鳞茎内源多胺含量的动态变化

应用薄层层析-荧光测定法研究了石蒜花期前后鳞茎内源多胺含量的动态变化,分析了内源多胺与石蒜开花的关系.在花芽分化前期鳞茎内3种多胺的浓度是递增的,于6月初达到最大;在花芽分化后期,鳞茎内3种多胺的浓度是递减的.花期腐胺Put和精胺Spm含量迅速下降,并维持在较低水平,但花后展叶期又有明显回升.整个发育过程中以Put的含量最高,变幅较大,而亚精胺Spd含量最少,变幅较小.     

牡蛎鳃部腐败菌的分离鉴定及产胺特性分析

为探究牡蛎在腐败过程中产胺菌的种类及产胺特性，通过划线分离和16S rDNA分子鉴定菌株，并采用高效液相色谱检测生物胺质量浓度，结合高通量测序技术分析鳃部微生物的群落组成，.结果表明牡蛎鳃部分离纯化获得的16株菌，分别属于Shewanella、Oceanisphaera、Aeromonas、Marinomonas、Kocuria和Priestia菌属，其中Shewanella和Marinomonas菌属的菌株产胺能力较强.菌株产胺结果表明腐胺、色胺、β-苯乙胺和酪胺为牡蛎保藏过程中产胺菌株所产的主要生物胺，而亚精胺、精胺和组胺产量较低.研究结果将为牡蛎优势产胺菌的分离鉴定提供理论基础，并为牡蛎保鲜技术的应用提供科学指导.     

外源多胺对香蕉叶片的低温效应模拟实验

在人工气候箱中模拟寒潮对香蕉幼苗造成的冷害 ,研究外源多胺 (精胺、亚精胺、腐胺 )对低温期间香蕉叶片过氧化物酶和相对电导率的影响 .试验表明 ,叶面喷施 0 .6mmol·L-1精胺 ,0 .8mmol·L-1的亚精胺可明显提高过氧化物酶活性 ,而相对电导率则下降 ;但不同浓度的外源腐胺对两者影响不明显 .     

基于生物胺和氨基酸的黄酒产地判别

采用高效液相色谱法测定不同产地黄酒中的生物胺和氨基酸含量,并结合多元统计分析方法对黄酒产地进行区分判别.单因素方差分析(ANOVA)结果显示,除甘氨酸、β–苯乙胺和尸胺外,不同产地的黄酒样品中其他生物胺和氨基酸均存在显著差异.相关性分析(CA)结果显示,腐胺、组胺和酪胺与大多数氨基酸之间密切正相关,而亚精胺与氨基酸之间呈负相关.最后采用判别分析(DA)和人工神经网络分析(ANN),分别建立了基于生物胺和氨基酸的黄酒产地的判别模型.本研究建立的模型可以很好地区分不同产地的黄酒,为黄酒的鉴伪和原产地保护提供了一种参考方法.     

低温弱光对茄子叶片多胺质量分数的影响

为明确在低温弱光下茄子叶片腐胺、亚精胺、精胺等内源激素质量分数的变化规律,选取6个不同茄子品系,进行低温弱光处理,前2 d白天15℃,夜间10℃;后10 d白天10℃,夜间7℃,设常温对照(日间8:00～17:00保持25℃,夜间17:00～8:00保持18℃)。结果表明,在常温下各材料内源激素的叶片多胺质量分数差异不显著,腐胺质量分数在57.197～63.194 ng·g~(-1)之间,亚精胺质量分数在3.656～4.459 ng·g~(-1)之间,精胺质量分数在11.752～12.480 ng·g~(-1)之间。经低温处理后差异显著,腐胺、亚精胺质量分数上升,精胺质量分数下降。相关性分析发现,茄子幼苗耐低温性与处理后的腐胺、亚精胺、精胺质量分数均呈显著正相关,可以用上述指标鉴定茄子耐低温弱光性。     

低温等离子体冷杀菌对生鲜牛肉主要腐败菌及生物胺抑制效应研究

采用低温等离子体冷杀菌对气调包装V(O₂)∶V(CO₂)∶V(N₂)=35%∶35%∶30%生鲜牛肉在72kV条件下处理85s,4℃条件下贮藏10d,分析牛肉冷藏过程菌落总数、主要腐败菌属、挥发性盐基氮、硫代巴比妥酸值和主要生物胺含量变化,研究CPCS处理对牛肉冷藏过程中安全品质的影响。结果表明:CPCS会显著降低贮藏过程中牛肉中的菌落含量,贮藏10d菌落总数为5.76 lg(CFU/g)显著低于对照组7.46 lg(CFU/g),假单胞菌、热死索丝菌、乳酸菌微球菌和肠杆菌分别比对照组降低1.73、2.01、1.68、1.37、0.46 lg(CFU/g)。挥发性盐基氮和硫代巴比妥酸值含量缓慢升高,仍在可接受范围;生物胺含量显著低于对照组(p<0.05),精胺、组胺和亚精胺呈先增加后减少趋势,在第7天达到最大值并且比对照组分别下降了2.74、0.85、0.05mg/kg,苯乙胺和腐胺含量在第10天达到最大值并且比对照组下降0.78和0.62mg/kg。因此,低温等离子体冷杀菌能有效抑制牛肉中菌落总数、主要腐败菌生长和生物胺形成,保持其良好的安全和感官品质。     

多胺降解产生H2O2在莴苣种子萌发过程中的作用

以正常莴苣(Lactuca sativa L.)"挂丝红"种子为材料,采用外源多胺(Put,Spd,Spm)、亚精胺合酶抑制剂-环已胺(CHA)、多胺氧化酶抑制剂-氨基胍(AG)、H2O2清除剂N,N-二甲基硫脲(DMTU)处理,研究多胺降解产物H2O2在莴苣种子萌发过程中的作用.结果表明,三种外源多胺都可以显著促进莴苣种子的萌发,0.5 mmol/L的Spd作用效果最为显著;与此相对应的是CHA对莴苣种子的萌发有抑制作用;Spd对莴苣种子萌发的促进作用可能与多胺氧化降解产生的H2O2有关.因为(1)Spd可显著促进多胺氧化酶活性和增加吸胀种子的H2O2含量.(2)DMTU可降低Spd对H2O2含量的促进作用而抑制Spd对莴苣种子萌发的促进作用.(3)AG显著抑制Spd对莴苣种子萌发过程中PAO活性,而降低Spd对莴苣种子萌发的促进作用.实验结果暗示多胺氧化降解产生的H2O2参与莴苣种子的萌发过程.     

豇豆多胺氧化酶的底物动力学研究

从豇豆(Vigna unguiculata)幼叶分离纯化的多胺氧化酶对腐胺(Put)、尸胺(Cad)、1,6-己二胺和1,10-癸二胺等二胺类底物有较强的亲和力,底物的碳链长度越短,亲和力越强.该酶对亚精胺(Spd)和精胺(Spm)的氧化也有一定的催化活性.另外,反应介质的[Spd]/[Put]和[Spm]/[Put]比值以及O2浓度对该酶的催化活性有调节作用.     

N~1,N~(12)-二乙酰精胺作为一种新的肿瘤标志物的临床价值

N~1,N~(12)-二乙酰精胺(N~1,N~(12)-diacetylspermine,DiAcSpm)是精胺的二乙酰化衍生物。精胺是真核细胞生长和蛋白质合成所必需的物质,而DiAcSpm更与癌症的发病情况有着密切的关系。现已发现多种癌症(非小细胞肺癌、结肠癌、乳腺癌等)患者尿液中的DiAcSpm水平均较正常人有不同程度的升高,表明DiAcSpm可能是一种优秀的广谱肿瘤标志物。对已发表的关于癌症患者体液中DiAcSpm水平变化情况的临床实验结果进行了分析,并对DiAcSpm与癌症的相关性予以综述。